
【求助】tricinesdspage帮忙解图
2006-07-18
问题描述:
电泳中总是出现,条带前沿,蝌蚪状的一片兰色,条带好象也不直.样品经过milipore膜1kd和3kd滤过收集,没冻干直接上样.这是什么原因?
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雨下天


帮忙解下,各位xd,在来一张

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雨下天


呵呵,在来张sephadex G-10脱盐 紫外检测曲线图.因为原样硝酸银检测有明显白色沉淀.分子量主要1kd-5kd.是不是小分子电泳都有这样啊.

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雨下天


等待ing

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雨下天


来张差的,蝌蚪图

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zhao81115


你所指的蝌蚪状条带,不是你要的东东,1-5KDa应该在胶的下半部分,很难出来条带,我郁闷了3各多月了,目前只跑到5KDa,下面的条带还在摸索,Marker多出一条带,可能是时间久了,降解了。样品应该充分变性,SDS的量要稍多,沸水煮5-10min,离心上样。另外电压要高,采用有效的冷却设备,防止时间过长导致蛋白带弥散。

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雨下天


我的Marker最小的是6.4kd的,没上1kd的,那个比较贵,所以先摸条件.楼上的小分子的电泳有什么比较好的条件吗,相告一声.

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水仙子2005


是不是降解了

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zhao81115


我还在摸条件,越小的蛋白扩散越厉害,需要高电压,和较好的冷凝系统。

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雨下天


我用100v跑分离胶,太慢了,用制冰机制冰水浴还行

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xuhongbin


借鉴一下,谢谢

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xuhongbin


楼主的问题解决了吗?

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xuhongbin


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