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kint6
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反应体系操作如下:PCR反应体系(酶除外)+酵母单菌落或乳酸单菌落然后沸水或者金属浴2min。接下来加入聚和酶 放入PCR 扩增 程序和普通PCR 反应相同。
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wxp
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细胞壁厚,直接加热能破壁吗?用不用特殊处理一下呀?你是这么做的吗?谢谢!
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Liu_wei
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可以用玻璃珠破碎,效果更好一些:)
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wxp
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谢谢!哪里有卖玻璃珠的?
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Liu_wei
用户
在一般的试剂公司就有卖的,不过直径大小不一样的,我们用的是100um的,是破碎阳性菌的外壁的
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wxp
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非常感谢!好人哪!
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kint6
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沸水或者金属浴2min,100度没有问题的
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wxp
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什么是金属浴?怎么做呀?谢谢啦!
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kint6
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就是一种加热工具比热水浴调节方便一样的呵呵
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wxp
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谢谢!我们都是劳动者,祝你节日快乐!
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bluecell
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glassbeads+酚氯仿法很好,votex3min,centrifuge3min,取上清1ul,可以google出来很多.
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cxdcty
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我一般将粘有菌落的牙签在装有15微升dd水的pcr离心管中晃动几下,而后将牙签顺序接中于另一平皿(剩下体积安10微升算),加入10微升反应mixture(MgdNTPBufferPrimerTaq),反应程序和普通一样.
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