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Koma BioTech/Pfu DNA Polymerase Kit/K0566001/250U
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Koma BioTech/Pfu DNA Polymerase Kit/K0566001/250U
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Description
Pfu DNA polymerase isolated from Pyrococcus furiosus, a proofreading DNA polymerase due to 3'→5'exonuclease activity exhibits the lowest error rate of any thermostable DNA polymerase studied. This feature makes Pfu DNA polymerase the ideal choice for a variety of techniques requiring high fidelity DNA synthesis by PCR such as cloning, gene expression, and site-directed mutagenesis. Pfu DNA polymerase is a highly thermostable enzyme, retaining 94-99% of its polymerase activity after 1 hour at 95°C.
To amplify GC-rich regions, denaturation temperature up to 98C can be used to with Pfu DNA polymerase. Pfu DNA polymerase is devoid of terminal deoxynucleotidyltrasferase (TdT) activity, which is characterized by the addition of nontemplate-directed nucleotide(s) at the 3'-end of PCR-generated fragments. Therefore, it generates blunt-ended PCR products. This kit contains all optimized reagents for PCR reaction.
Specification
• High PCR fidelity with improved yield
• Highly thermostable: active more than 4 hrs at 95°C
• Source: E.coli, recombinant gene from Pyrococcus furiosus
• Lowest error rate
• 3'→5' exonuclease activity
• No extra A addition activity: Generate blunt-ended PCR products
• Amplification range:
- Lambda DNA: up to 60Kb
- Human genomic DNA: up to 2Kb
• Composition of all optimized reagents for PCR reaction (Pfu DNA Polymerase, Pfu PCR buffer containing MgSO4, dNTP mix, loading dye, nuclease free water and Magic buffer) in separate tubes
• A supply of enhancer (Magic buffer) for GC rich template or secondary structures
Components
• Pfu DNA Polymerase
• 10X Pfu PCR Buffer
• 10X dNTP Mix (2.5mM each)
• 10X Loading Buffer
• Nuclease Free Water
• 4X Magic Buffer
Citation
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磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline,简称PBS)的是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。... 查看更多>
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所有产品都有正品保障,透析袋现货,为美国spectrumlabs、viskase、MFPI cellu.sep三大公司生产相关分类 移液管 离心管 冻存管 培养板 培养瓶 培养皿 牛... 查看更多>
For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多>
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请问什么软件可以测蛋白质的酸碱性
Whatman的网站上说DE52(货号4057-200)是预膨胀的(Preswollen),有的中文网站上说DE52是即用型。
这就是说不用酸碱预处理吗?
Whatman的网站上没有DE52最大耐受压力,请问又经验的战友应该是多少?

Whatman的网站上:
DE32DryMicrogranularDEAECellulose
SimilarperformancecharacteristicsafterprecyclingasDE52.

DE52PreswollenMicrogranularDEAECellulose
ProbablythemostwidelyusedDEAEcelluloseintheworld;usedforbiopolymerswithlowtohighnegativecharges;exhibitsexcellentresolutionwithgoodflowrates.

附件是一本图书(MethodsinMolecularMedicine,)的章节,上面说:
WhatmanDEAE52comesalreadypreswollenandonlyneedstobetransferred
totherunningbuffer50mMTE8.

lAntibodiesUsingIonExchangeChromatography.pdf(87.06k)

:)
我在做一细菌不同酸碱度生长状况时,发现这些奇怪现象:pH=3的培养基灭菌(TSB液体培养基)灭菌后pH上升到到9.2!而原来pH=9.0的降到8.7(基本没多少变化),请问各位大侠,这是什么原因?

一般做不同酸碱度生长实验时,该如何才能防止pH在湿热灭菌后基本不变化?
通HCl前,溶液是c(CH₃COOH)=c(CH₃COONa)=0.1mol/L的混合溶液,按照缓冲溶液pH的求法求.
pH(1)=pKa+lg[c(CH₃COONa)/c(CH₃COOH)]=pKa=4.74
通HCl后,溶液是c(CH₃COOH)=0.2mol/L、c(NaCl)=0.1mol/L的混合溶液,溶液pH按照弱酸溶液pH的求法求.
c(H⁺)=√[Ka*c(CH₃COOH)]=√(10^-4.74*0.2)=0.00191(mol/L)(采用了近似公式)
pH(2)=-lg{c(H⁺)}=2.72
两个pH求得,那么pH的变化量也就可得了.pH的变化量=|pH(2)-pH(1)|=|2.72-4.74|=2.02
1)PH缓冲溶液作用原理和pH值
  当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液.弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液.
  由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故.当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H离子基本上被A-离子消耗:
  所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化.
  2)PH缓冲溶液的缓冲能力
  在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用.这说明它的缓冲能力是有一定限度的.
  缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关.0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大.关于这一点通过计算便可证实.但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用.
  组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH最小,缓冲能力大.不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用.缓冲溶液的pH值可用下式计算:
  此时缓冲能力大.缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用.对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内.
  弱酸及其盐(弱酸及其共轭碱)体系pH=pKaφ±1
  弱碱及其盐(弱碱及其共轭酸)体系pOH=pKbφ±1
  例如HAc的pKaφ为4.76,所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76~5.76的缓冲溶液,在这个范围内有较大的缓冲作用.配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力最大,此时(c(HAc)/c(NaAc)=1.
  3)PH缓冲溶液的配制和应用
  为了配制一定pH的缓冲溶液,首先选定一个弱酸,它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值,然后计算酸与碱的浓度比,根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液.
  以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法.对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法.
  PH缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛,如鉴定Mg2离子时,可用下面的反应:
  白色磷酸铵镁沉淀溶于酸,故反应需在碱性溶液中进行,但碱性太强,可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反应的pH值需控制在一定范围内,因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液,保持溶液的pH值条件下,进行上述反应.
缓冲溶液为什么能够低抗外来酸碱对ph的改变
缓冲物质更重要。
由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为缓冲溶液。
相关疾病:高钾血症碱中毒代谢性酸中毒输入库存血,钾离子大量释放入血,会导致高钾血症,同时容易伴发代谢性碱中毒,查了相关资料解释说:大量输...
【酸碱缓冲溶液的类型及选择】酸碱缓冲溶液有三种类型:
1、弱酸和它的盐(如:HAc---NaAc)的水溶液组成;
2、弱碱和它的盐(如:NH3·H2O---NH4Cl)的水溶液组成;
3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐(如:NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液组成。
酸碱缓冲溶液的选型一般应根据具体情况进行选择。缓冲酸性可选用碱性缓冲液,缓冲酸性可采用碱性缓冲液。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。
【酸碱缓冲溶液】由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为酸碱缓冲溶液。
我按下面方法配制电泳缓冲液
Tris-base15.1g
甘氨酸94g
SDS5g
H2O1000ml
听人说就这样配制,PH值就会在8.3左右,都不要怎么调PH的,但不知我这样配制后PH值在6.4左右?迷惑,配制了几次还是这样。本人初次做sds-page,请前辈们指教。
另外Tris是以前师兄留下的,几年了已经,SDS也是以前的,但是没有开封,密封的很好。甘氨酸是新买进口封装的。会不会试剂过期的原因?
就是通过微弱的中和反应控制溶液的酸碱度。
如何选择缓冲溶液?_123
sweetwater2021-07-21
做试验的时候用到很多种缓冲液,Tris,triethanolamine,HEPES,还有磷酸缓冲液,不知道这些缓冲液之间有没有大的区别,选择缓冲液的依据是什么?

如果只是为了缓冲酸碱度,是不是可以用一种缓冲液来代替所有其他的?这样做试验就方便多了。谢谢指教
PH值在多少为碱性水?123
wuzhixuan20032005-06-13
25倍电转缓冲液的ph=8.3真的不能调吗?听师兄说一次配好液后它的ph值就必须是8.3,不能再进行加酸或加碱调节,可我配了一天也没达到这个要求,用的是18g甘氨酸和3.64g的trisbase加dd水到100ml,总是ph值到8.8左右,在配过程中可以加热吗,不然太难溶解了,