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Smartox/Potent blocker of voltage-gated sodium channels/12HTX001-01000/1mg

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Smartox/Potent blocker of voltage-gated sodium channels/12HTX001-01000/1mg

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Smartox

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12HTX001-01000

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Hainantoxin-IV(HNTX-IV)isapeptidethatwasoriginallyisolatedfromthevenomoftheChinesebirdspiderOrnithoctonushainanaLiang(SelenocosmiahainanaLiang).IthasbeenreportedthatthispeptideisapotentantagoNISToftetrodotoxin-sensitive(TTX-S)voltage-gatedsodiumchannels(VGSCs).Hainantoxin-IVbindstoTTX-SwithanIC₅₀valueof34nMinadultratdorsalrootganglion(DRG)neurons.Tetrodotoxin-resistant(TTX-R)voltage-gatedsodiumchannelsarenotaffectedbyHainantoxin-IV.Itprobablyinteractswiththesite1throughamechanismquitesimilartothatofTTXwithoutaffectingtheactivationandinactivationkinetics.

Description:

Productcode:N/A.Category:Sodiumchannels.Tags:nav,tetrodotoxin,ttx.

AAsequence:Glu-Cys²-Leu-Gly-Phe-Gly-Lys-Gly-Cys⁹-Asn-Pro-Ser-Asn-Asp-Gln-Cys¹⁶-Cys¹⁷-Lys-Ser-Ser-Asn-Leu-Val-Cys²⁴-Ser-Arg-Lys-His-Arg-Trp-Cys³¹-Lys-Tyr-Glu-Ile-NH2
(DisulfidebondsbetweenCys²-Cys¹⁷,Cys⁹-Cys²⁴,andCys¹⁶-Cys³¹)
Length(aa):35
Formula:C₁₆₆H₂₅₇N₅₃O₅₀S₆
MolecularWeight:3987.6Da
Appearance:Whitelyophilizedsolid
Solubility:waterandsalinebuffer
CASnumber:Notavailable
Source:Synthetic
Purityrate:>97%

Reference:

Apositivelychargedsurfacepatchisimportantforhainantoxin-IVbindingtovoltage-gatedsodiumchannels

Hainantoxin-IV(HNTX-IV),isolatedfromthevenomofthespiderOrnithoctonushainana,isaspecificantagonistoftetrodotoxin-sensitive(TTX-S)voltage-gatedsodiumchannelsinratdorsalrootganglion(DRG)cells.Itadoptsaninhibitorcystineknotmotif,andstructuralanalysisrevealedapositivelychargedpatchconsistingofArg26,Lys27,His28,Arg29andLys32distributedonitsmolecularsurface.OurpreviousstudydemonstratedthatLys27andArg29butnotArg26werecriticalresiduesforHNTX-IVbindingtoTTX-Ssodiumchannels.Inthepresentstudy,weexaminedtherolesofHis28andLys32intheinteractionofHNTX-IVwithitstarget.Twomutants,HNTX-IV-H28DandHNTX-IV-K32A,weregeneratedbysolid-phasechemicalsynthesisandpurifiedbyreverse-phaseHPLCafterrefoldingandoxidation,yieldingtwocompoundsofhighpuritywithmonoisotopicmassesof3962.66and3927.70 Da,respectively,asdeterminedbyMALDI-TOFmassspectrometry.Thisindicatedthepresenceofsixcysteineresiduesformingthreedisulfidebonds.Moreover,circulardichroismspectroscopyanalysisdemonstratedthatthesubstitutionofHis28orLys32didnotaffecttheoverallstructureofHNTX-IV.TheinhibitoryactivityofHNTX-IV-H28DandHNTX-IV-K32AagainstTTX-SsodiumchannelsinratDRGcellswasanalyzedbywhole-cellpatch-clamptechnique.TheIC(50)valuesforthemutantswere0.57and5.80 μM(17-foldand170-foldlowerthantheactivityofthenativetoxin),indicatingthatHis28andLys32maybeimportantfortheinhibitoryactivityofHNTX-IV.Takentogether,ourresultssuggestthatthepositivelychargedpatchmightbethebindingsitefortheinteractionofHNTX-IVwithTTX-Ssodiumchannels.ThesefindingsmightcontributetotheelucidationofthestructureandfunctionrelationshipofHNTX-IV.

LiuY,etal.(2012)Apositivelychargedsurfacepatchisimportantforhainantoxin-IVbindingtovoltage-gatedsodiumchannels.JPeptSci.PMID:22927181

Structure--activityrelationshipsofhainantoxin-IVandstructuredeterminationofactiveandinactivesodiumchannelblockers.

Hainantoxin-IV(HNTX-IV)canspecificallyinhibittheneuronaltetrodotoxin-sensitivesodiumchannelsanddefinesanewclassofdepressantspidertoxin.ThesequenceofnativeHNTX-IVisECLGFGKGCNPSNDQCCKSSNLVCSRKHRWCKYEI-NH(2).Inthepresentstudy,toobtainfurtherinsightintotheprimaryandtertiarystructuralrequirementsofneuronalsodiumchannelblockers,wedeterminedthesolutionstructureofHNTX-IVasatypicalinhibitorcystineknotmotifandsynthesizedfourmutantsdesignedbasedonthepredictedsitesfollowedbystructuralelucidationoftwoinactivemutants.PharmacologicalstudiesindicatedthattheS12AandR26AmutantshadactivitiesnearthatofnativeHNTX-IV,whileK27AandR29Ademonstratedactivitiesreducedby2ordersofmagnitude.(1)HMRanalysisshowedthesimilarmolecularconformationsfornativeHNTX-IVandfoursyntheticmutants.FurThermore,inthedeterminedstructuresofK27AandR29A,thesidechainsofresidues27and29werelocatedintheidenticalspatialpositiontothoseofnativeHNTX-IV.TheseresultssuggestedthatresiduesSer(12),Arg(26),Lys(27),andArg(29)werenotresponsIBLeforstABIlizingthedistinctconformationofHNTX-IV,butLys(27)andArg(29)werecriticalforthebioactivities.ThepotencyreductionsproducedbyAlasubstitutionswereprimarilyduetothedirectinteractionoftheessentialresiduesLys(27)andArg(29)withsodiumchannelsratherthantoaconformationalchange.Aftercomparisonofthesestructuresandactivitieswithcorrelatedtoxins,wehypothesizedthatresiduesLys(27),Arg(29),His(28),Lys(32),Phe(5),andTrp(30)clusteredononefaceofHNTX-IVwereresponsibleforligandbinding.

LiD,etal.(2004)Structure–activityrelationshipsofhainantoxin-IVandstructuredeterminationofactiveandinactivesodiumchannelblockers.JBiolChem.PMID:15201273

Isolationandcharacterizationofhainantoxin-IV,anovelantagonistoftetrodotoxin-sensitivesodiumchannelsfromtheChinesebirdspiderSelenocosmiahainana.

Aneurotoxin,namedhainantoxin-IV,waspurifiedfromthevenomofthespiderSelenocosmiahainana.TheaminoacidsequencewasdeterminedbyEdmandegradation,revealingittobea35-residuepolypeptideamidatedatitsCterminalandincludingthreedisulfidebridges:Cys2-Cys17,Cys9-Cys24,andCys16-Cys31assignedbypartialreductionandsequenceanalysis.Hainantoxin-IVshares80%sequenceidentitywithhuwentoxin-IVfromthespiderS.huwena,apotentantagonistthatactsatsite1ontetrodotoxin-sensitive(TTX-S)sodiumchannels,suggestingthathainantoxin-IVadoptsaninhibitorcystineknotstructuralmotiflikehuwentoin-IV.Underwhole-cellvoltage-clampconditions,thistoxinhasnoeffectontetrodotoxin-resistantvoltage-gatedsodiumchannelsinadultratdorsalrootganglionneurons,whileitblocksTTX-Ssodiumchannelsinamannersimilartohuwentoxin-IV,andtheactionsofbothtoxinsonsodiumcurrentsareverysimilartothatoftetrodotoxin.Thus,theydefineanewfamilyofspidertoxinsaffectingsodiumchannels.

LiuZ,etal.(2003)Isolationandcharacterizationofhainantoxin-IV,anovelantagonistoftetrodotoxin-sensitivesodiumchannelsfromtheChinesebirdspiderSelenocosmiahainana.CellMolLifeSci.PMID:12827284

Inhibitionofneuronaltetrodotoxin-sensitiveNa+channelsbytwospidertoxins:hainantoxin-IIIandhainantoxin-IV.

Hainantoxin-IIIandhainantoxin-IV,isolatedfromthevenomoftheChinesebirdspiderSeleconosmiahainana,areneurotoxicpeptidescomposedof33-35residueswiththreedisulfidebonds.Usingwhole-cellpatch-clamptechnique,weinvestigatedtheiractiononionicchannelsofadultratdorsalrootganglionneurons.ItwasfoundthatthetwotoxinsdidnotaffectCa2+channels(bothhighvoltageactivatedandlowvoltageactivatedtypes)nortetrodotoxin-resistantvoltage-gatedNa+channels(VGSCs).However,hainantoxin-IIIandhainantoxin-IVstronglydepressedtheamplitudeoftetrodotoxin-sensitiveNa+currentswithIC50valuesof1.1and44.6nM,respectively.Bothhainantoxin-III(1nM)andhainantoxin-IV(50nM)causedahyperpolarizingshiftofabout10mVinthevoltagemidpointofsteady-stateNa+channelinactivation,buttheyshoweddifferenceinthereprimekineticsofVGSCs:hainantoxin-IIIsignificantlydecreasedtherecoveryratefrominactivationataprepulsepotentialof-80mVwhilehainantoxin-IVdidnotdo.Itisinterestingtonotethatsimilartohuwentoxin-IV,thetwohainantoxinsdidnotaffecttheactivationandinactivationkineticsofNa+currentsandataconcentrationof1microMtheycompletelyinhibitedtheslowinginactivationcurrentsinducedbyBMK-I(toxinIfromthescorpionButhusmartensiKarsch),ascorpionalpha-liketoxin.Theresultsindicatethathainantoxin-IIIandhainantoxin-IVarenovelspidertoxinsandaffectthemammalneuralNa+channelsthroughamechanismquitedifferentfromotherspidertoxinstargetingtheneuralreceptorsite3,suchasdelta-aractoxinsandmu-agatoxins.

XiaoY,etal.(2003)Inhibitionofneuronaltetrodotoxin-sensitiveNa+channelsbytwospidertoxins:hainantoxin-IIIandhainantoxin-IV.EurJPharmacol.PMID:14512091

Determinationofdisulfidebridgesoftwospidertoxins:Hainantoxin-IIIandHainantoxin-IV

Peptidetoxinsareusuallyhighlybridgedproteinswithmultipairsofintrachaindisulfidebonds.Analysisofdisulfideconnectivityisanimportantfacetofproteinstructuredetermination.Inthispaper,wesuccessfullyassignedthedisulfidelinkageoftwonovelpeptidetoxins,calledHNTX-IIIandHNTX-IV,isolatedfromthevenomofOrnithoctonushainanaspider.BothpeptidesareusefulinhibitorsofTTX-sensitivevoltage-gatedsodiumchannelsandarecomposedofsixcysteineresiduesthatformthreedisulfidebonds,respectively.Firstly,thepeptideswerepartiallyreducedbytris(2-carboxyethyl)-phosphine(TCEP)in0.1Mcitratebuffercontaining6Mguanidine-HClat40°Cfortenminutes.Subsequently,thepartiallyreducedintermediatescontainingfreethiolswereseparatedbyreversed-phasehigh-performanceliquidchromatography(RP-HPLC)andalkylatedbyrapidcarboxamidomethylation.Then,thedisulfidebondsoftheintermediateswereanalyzedbyEdmandegradation.Byusingthestrategyabove,disulfidelinkagesofHNTX-IIIandHNTX-IVweredeterminedasI-IV,II-VandIII-VIpattern.Inaddition,thisstudyalsoshowedthatthismethodmayhaveagreatpotentialfordeterminingthedisulfidebondsofspiderpeptidetoxins.

WangW.,etal.(2009)Determinationofdisulfidebridgesoftwospidertoxins:Hainantoxin-IIIandHainantoxin-IV.JVenomAnimToxinsinclTropDis.

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2021-07-21

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2021-09-12

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2018-07-16

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学渣拍照秒变学霸，用了在线教育APP，中国学生更爱学习了 ...

2021-07-20

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磷酸盐缓冲液（PB）的配制实验方法

2021-07-22

磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，简称PBS）的是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。... 查看更多>

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2018-07-16

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人维生素D(VD)试剂盒(ELISA)

2021-09-21

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2018-07-16

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2021-09-14

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2021-08-06

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2018-07-16

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2018-07-16

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PH值在多少为碱性水?123

wuzhixuan20032005-06-13

25倍电转缓冲液的ph＝8.3真的不能调吗？听师兄说一次配好液后它的ph值就必须是8.3，不能再进行加酸或加碱调节，可我配了一天也没达到这个要求，用的是18g甘氨酸和3.64g的trisbase加dd水到100ml，总是ph值到8.8左右，在配过程中可以加热吗，不然太难溶解了，

大家一起来讨论下哈~单抗分析:不同CEX方法测定同一个单抗,酸碱性...123

threetigers2015-03-06

如题：
两个CEX方法A和B测定同一单抗，结果碱性峰比例差不多，酸性峰比例相差约7%，相应主峰也差了7%左右。
具体来说，A方法酸性峰高，主峰低，碱性峰稍微低点；B方法酸性峰低，主峰高，碱性峰稍微高点；另外也做了CIEF，结果呢和A方法更接近。
仔细比较起来，AB两个方法的峰性和数量差不多，就不知道为什么会有这么大的差异。两个方法一个用的WCX柱-磷酸缓冲液，一个用SCX柱-MES缓冲液
大家帮我分析下：
1.两个方法哪个方法更准确，是以酸性峰高的为准还是什么？为什么？
2.这显著差异是由方法造成，具体原因是什么？柱子？
3.CIEF的结果和A方法更接近，是不是可以由此证明A方法更好或者CIEF的方法更好（因为CIEF更快更方便）？
欢迎讨论~
纠正下，A方法用的是Tosoh的柱子，B方法用的是SCX柱。TOSOH的柱子是7um的填料，10cm长。SCX是10um的填料。我本人TOSOH的阳离子柱子用的很少，这次信手用用，结果发现差异很大
那我现在就考虑，在以后方法开发过程中，除了通过流动相pH和组成、梯度、柱子选择来获得样品主峰和酸碱性的最大分离，还要关注各峰比例。因为之前比较方法好坏都只看分离度，尤其是主峰和邻近峰的分离度，获得最大分离度，自然可以做到主峰尽可能纯，但从未认真比较过各峰比例。这是一个大疏忽吧！
另外，CIEF和CEX方法原理还是有点差异的，所以分的是不同的异质体，原液放行两个方法肯定是都要做的。问题就是在早期细胞株筛选和工艺开发阶段，哪个方法才是又快又准。CIEF（iCE280)一般15分钟一个样，比CEX快多了。如果CIEF测得主峰要低于CEX结果，是不是真的完全可以取代CEX呢？CEX分离出的峰远比CIEF的多！
欢迎大家继续讨论~

【求助】蛋白质酸碱性对离子交换色谱填料的选择蛋白质和糖学...123

ldx74226632009-08-05

求助：我目前需用离子交换法进行蛋白质的分离和纯化，但是我不知道要纯化的蛋白质的等电点，怎么样选择柱料及洗脱缓冲液呢？如果必须知道，有没有什么简便的方法测定蛋白质的等电点呢？谢谢

培养基高压蒸气灭菌后pH值的变化及其对细菌生长的影响123

mars7472005-08-25

:)
我在做一细菌不同酸碱度生长状况时,发现这些奇怪现象:pH=3的培养基灭菌(TSB液体培养基)灭菌后pH上升到到9.2!而原来pH=9.0的降到8.7(基本没多少变化),请问各位大侠,这是什么原因?

一般做不同酸碱度生长实验时,该如何才能防止pH在湿热灭菌后基本不变化?

酸碱滴定法中为什么要用缓冲溶液调节ph值123

格子控shy8032017-10-03

EDTA对金属离子的络合能力随酸度改变而不同，酸度越低，络合能力增强；酸度越高，络合能力越弱。可见控制溶液的pH在络合滴..

求大侠帮助啊,怎样确定蛋白质的酸碱性啊??? 生物科学...123

空镜2021-07-20

请问什么软件可以测蛋白质的酸碱性

酸碱加入到缓冲液做的excel的散点图怎么做123

怪小米米2017-10-03

首先你需要有源数据，
有了源数据之后把源数据按照大小排列，
选中源数据区域-->ALT+A1-->选中图标区右键-->更改图表类型-->散点图

药典中,纯化水酸碱度能用PH计测量吗?《中国药典》2020版讨论区...123

rainbow09282021-07-25

药典上说取本品10ml，加甲基红指示液（变色范围ph4.2-6.3，红~黄）2滴不得显红色；加溴麝香草酚蓝（变色范围ph6.0-7.6，黄~蓝）5滴不得显蓝色。
是否可以理解为纯化水得PH范围为6.3-7.6？能否直接用pH计测量？谢谢!

强酸碱溶液配制_强酸碱溶液配制商家/厂家/公司/123

逆天吟べ僥錚2017-10-03

因为强酸（碱）是完全电离,弱酸（碱）是部分电离,滴定的终点难以控制,所以一般用强酸（碱）.太浓或太稀的溶液,也不利于控制滴定终点,部分酸碱的性质还会因为浓度的该变而发生变化,如浓H2SO4有强氧化性.

一般的酸碱缓冲溶液有哪些类型,如何选择？123

2017-10-02

【酸碱缓冲溶液的类型及选择】酸碱缓冲溶液有三种类型：
1、弱酸和它的盐（如：HAc---NaAc）的水溶液组成；
2、弱碱和它的盐（如：NH3·H2O---NH4Cl）的水溶液组成；
3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐（如：NaH2PO4---Na2HPO4）的水溶液组成。
酸碱缓冲溶液的选型一般应根据具体情况进行选择。缓冲酸性可选用碱性缓冲液，缓冲酸性可采用碱性缓冲液。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。
【酸碱缓冲溶液】由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液，能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响，从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为酸碱缓冲溶液。

【求助】Whatman的DEAE52到底用不用酸碱预处理?怎么说法不一...123

langfeng2021-07-26

Whatman的网站上说DE52（货号4057-200）是预膨胀的（Preswollen），有的中文网站上说DE52是即用型。
这就是说不用酸碱预处理吗？
Whatman的网站上没有DE52最大耐受压力，请问又经验的战友应该是多少？

Whatman的网站上：
DE32DryMicrogranularDEAECellulose
SimilarperformancecharacteristicsafterprecyclingasDE52.

DE52PreswollenMicrogranularDEAECellulose
ProbablythemostwidelyusedDEAEcelluloseintheworld;usedforbiopolymerswithlowtohighnegativecharges;exhibitsexcellentresolutionwithgoodflowrates.

附件是一本图书(MethodsinMolecularMedicine,)的章节,上面说:
WhatmanDEAE52comesalreadypreswollenandonlyneedstobetransferred
totherunningbuffer50mMTE8.

lAntibodiesUsingIonExchangeChromatography.pdf(87.06k)

我是菜鸟,请教各位:强酸碱性样品可以用普通C18柱吗?谢谢了~ ...123

yandongliu2021-07-24

我的实验是考察药物不同PH值（水溶液，HCL和NaOH调PH值）下的稳定性情况等，PH从2-13。请问各位大侠：这种强酸性或强碱性水溶液样品可以直接进普通C18柱进行分析吗？
因为是考察不同PH对药物的影响，样品又不好改变其PH值，这种情况怎么办？希望有经验的高手指教。

我的流动相是甲醇-水（90：10）

谢谢赐教！

请进子版按格式发贴，自行修改，谢谢。