
Mammalian Cell Lysis Buffer has been developed for extraction of total soluble proteins from mammalian cultured cells. The Mammalian Cell Lysis Buffer is based on organic buffering agents, which utilizes a mild non-ionic detergent and a proprietary combination of various salts and agents to enhance extraction and stability of proteins. Depending on the application, additional agents such as chelating agents, reducing agents and protease inhibitors may be added into Mammalian Cell Lysis Buffer. Mammalian Cell Lysis Buffer reagent has been tested for use with a wide variety of mammalian cells. Mammalian Cell Lysis Buffer can be used for both suspension as well as adherent cells. The proprietary combination of this reagent provides a simple and versatile method for the extraction of proteins from mammalian cells.
Product SpecificationsMammalian Cell Lysis Buffer
Storage/Handling: Store at 4°C. When stored under the recommended conditions and handled correctly, these products should be stable for at least 1 year from the date of receipt.
GoldBio活体成像技术:早在1999年由美国哈佛大学Weissleder博士率先提出了分子影像学(molecularimaging,MI)的概念,即应用影像学的方法对活体状态下的生物过程进行细胞和分子水平的定性和定量研究。活体成像便是基于分子影像学孕育而生的,通过这个成像系统,可以观测活体动物体内肿瘤的生长及转移,感染性疾病的发展进程,特定基因的表达等生物学过程。活体成像技术主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。★生物发光是用荧光素酶基因标记细胞或DNA。★荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP,Cyt及dyes等)进行标记。★这一技术对肿瘤微小转移灶的检测灵敏度极高,不涉及放射性物质和方法,非常安全。操作极其简单、所得结果直观、灵敏度高。
活体成像两种检测技术介绍活体成像特点优点缺点生物发光检测bioluminescence★荧光素酶(Luciferase)对基因、细胞和活体动物进行标记;★荧光素酶催化底物(例如荧光素钾盐)反应后,会产生化学发光。这种光是由化学反应而来,不需要激发光;★标记方法是通过克隆技术,将荧光素酶的基因插入到预期观察的细胞染色体内,通过对克隆细胞进行筛选,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。再将细胞株转移至特定的小鼠体内形成模型。★特异性强,无自发荧光;★高灵敏度,在体内可检测到几百个细胞,检测的深度在3-100px;★定量精确 ★信号较弱,检测时间较长;★仪器精密度要求较高;★细胞或基因需要转基因标记;★不可用于人体,不适用于抗体、多肽等标记荧光检测fluorescence★采用荧光报告基因(GFP、RFP等)或荧光染料进行标记;★需要外接激发光源,利用报告基因、荧光蛋白质或染料产生的荧光,就可以形成体内的生物光源。★荧光染料、蛋白标记能力强;★信号强,成像速度快,操作简便,实验成本较低;★未来可用于人;★适用范围广,可以是动物、细胞、微生物,也可以是抗体、药物、纳米材料等。★存在自发荧光,影响灵敏度;★光容易被动物组织吸收;★检测深度受限;★背景光干扰,定量准确度低
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因为常用的缓冲溶液由弱酸及其共轭酸盐组合而成,当加入酸时,弱酸盐部分转化为弱酸;当加入碱时,弱酸部分转化为弱酸盐。而弱酸在水中不完全电离,弱酸盐在水中可以水解,所以ph变化较小,保持了溶液的PH基本不变。
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1、根据所需求的酸碱性选择合适的缓冲对,若是配制酸性缓冲液就选择弱酸与弱酸盐缓冲对;若是配制碱性缓冲液就选择弱碱与弱碱盐缓冲对。
2、根据所需要控制的PH范围以及弱酸和弱碱的解离常数(pKa/pKb)选择具体的共轭酸碱对,公式为PH=pKa±1=(14-pKb)±1。
3、根据公式计算缓冲溶液的组分比,酸性缓冲液PH=pKa-lgc酸/c盐,碱性缓冲液PH=14-pKb+lgc碱/c盐。
4、根据共轭酸碱对以及其组分比配制缓冲液,方法同普通溶液。
举例:试配制一种缓冲液,体积为1L,PH能维持在10.25左右。
a、依题意选择弱碱与弱碱盐的共轭对;
b、由PH=(14-pKb)±1,算出pKb在3.75与4.75之间,查弱碱的解离常数表可知氨水(pKb=4.75)符合要求,故可选择NH3-NH4Cl体系;
c、由PH=14-pKb+lgc碱/c盐,算出c(氨水)/c(氯化铵)=10;
d、设氨水的浓度为10mol/L,则氯化铵的浓度为1mol/L,所以在浓度为10mol/L体积为1L的氨水中加入1mol的氯化铵即可。
根据组成不同,可分为两种,弱酸及其对应的强碱弱酸盐,弱碱及其对应的强酸弱碱盐。
因为HF可以和NaOH反应生成NaF和水,当NaOH反应完之后,NaF就可以与HF组成缓冲溶液,所以说可以直接使用NaOH和HF来配制缓冲溶液。
这也是一般配制缓冲溶液的方法,也就是用强碱和弱酸(或者强酸和弱碱)来配制缓冲溶液。
甲液:0.05mol/L Na2HPO4溶液 :称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸 馏水至1000ml ;
乙液:0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1.
将甲乙液分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:
pH 甲液ml 乙液mI
5.29 2.5 97.5
5.59 5.0 95.0
5.91 10.0 90.0
6.24 20.0 80.0
6.47 30.0 70.0
6.64 40.0 60.0
6.81 50.0 50.0
6.98 60.0 40.0
7.17 70.0 30.0
7.38 80.0 20.0
7.73 90.0 10.0
8.04 95.0 5.0
你要配制pH=6.8的PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可.

