Details
Viagen DirectPCR® DNA Extraction System is a single-tube system forrapid preparation of DNA from mouse tails, ear pieces, yolk sac, andculture cells. The patent-pending components developed by scientists atViagen Biotech Inc. allow the resulting DNA extracts to be compatiblewith genomic PCR for genotyping. Crude extracts of biological samplesare not compatible with many molecular biology-grade reactions such aspolymerase chain reaction (PCR), in part due to inhibitors contained incrude extracts. The DirectPCR reagents not only mediate the rapid lysisof biological samples but also contain inhibitors that effectivelysuppress the inhibitory activities of crude lysates for PCRamplification, while maximally maintaining the integrity of releasedgenomic DNA. The patent-pending simple procedure completely eliminateany solution transfer or tube-opening steps, providing you withsubstancial extra time.
Brief procedure1. Lyse tails in DirectPCR® Lysis Reagent.2. Incubate for 45 min at 85°C.3. PCR genotyping with 1 μl lysates.
Detailed protocols: Tail, Ear, Yolk Sac, and Cultured cells.
DirectPCR® system offers advantages over conventional protocols that include:·Time saving:Less hands-on time. Crude tail lysates for PCR! ·Money saving: Cost-effective reactions.·Safe: No organic reagents. ·Environmental:Less waste (organic reagents, tubes, tips, etc...) ·Reliable and efficient: Virtually 100% success rate with high yields.
DirectPCR Lysis Reagent (mouse tail)
101-T50ml (250 mouse tails).
102-T 100ml (500 mouse tails).
Viagen生產快速溶解細胞組織樣品,提供DirectPCRLysisReagents多種樣品,包含老鼠尾巴、耳朵、細胞,卵黃囊genomicDNA,適合各廠牌的PCR酵素快速分析。只需要1µllysates.即可快速執行genotyping分析。
ViaGen生物技术DirectPCR裂解试剂是一条完整的生产线用于快速、方便、可靠地从小鼠尾巴、耳朵、卵黄囊和培养细胞中提取DNA。
世界顶级实验材料供应商viagenbiotech正式授权苏州蚂蚁淘为其中国代理,viagenbiotech在一直是行业的标杆,一直为广大科研客户提供最为优质的产品和服务,苏州蚂蚁淘一直秉承为中国科研客户带来最好的产品,最好的服务,签约viagenbiotech就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们最大的收获viagenbiotech中国代理,viagenbiotech上海代理,viagenbiotech北京代理,viagenbiotech广东代理,viagenbiotech江苏代理viagenbiotech湖北代理,viagenbiotech天津,viagenbiotech黑龙江代理,viagenbiotech内蒙古代理,viagenbiotech吉林代理,viagenbiotech福建代理,viagenbiotech江苏代理,viagenbiotech浙江代理,viagenbiotech四川代理,ViagenBiotechInc.是创新的DNA提取技术和生命科学研究产品的领先供应商。ViagenDirectPCRDNA提取系统是一种单管系统,用于从小鼠尾巴,耳朵片,卵黄囊和培养细胞中快速制备DNA。由ViagenBiotechInc.的科学家开发的正在申请专利的组件允许得到的DNA提取物与用于基因分型的基因组PCR相容。生物样品的粗提取物与许多分子生物学级反应(如聚合酶链反应(PCR))不相容,部分原因是粗提物中含有抑制剂。DirectPCR试剂不仅介导生物样品的快速溶解,而且还含有有效抑制粗裂解物对PCR扩增的抑制活性的抑制剂,同时最大限度地保持了释放的基因组DNA的完整性。该过程完全消除了任何溶液转移或开管步骤,节省了大量的时间和精力。DirectPCR试剂每尾只花费26美分,可以节省任何使用量。Viagenbiotech致力于简便快速提取和制备核酸(DNA/RNA),以批量、快速进行基因分析。公司拥有的专利技术不仅加快样品的裂解,而且降低了粗提物中PCR抑制因素,因而使DNA提取与PCR基因分析完美兼容,样品经一步消化后即可进行PCR扩增,并且保证了基因组的完整性。DirectPCRLysisReagent(MouseTail)100ml快速概述目录号:102-T最多500尾(100ml)在4℃下稳定长达12个月描述ViagenDirectPCRDNAExtractionSystemisasingle-tubesystemforrapidpreparationofDNAfrommousetails,earpieces,yolksac,andculturecells.Thepatent-pendingcomponentsdevelopedbyscientistsatViagenBiotechInc.allowtheresultingDNAextractstobecompatiblewithgenomicPCRforgenotyping.Crudeextractsofbiologicalsamplesarenotcompatiblewithmanymolecularbiology-gradereactionssuchaspolymerasechainreaction(PCR),inpartduetoinhibitorscontainedincrudeextracts.TheDirectPCRreagentsnotonlymediatetherapidlysisofbiologicalsamplesbutalsocontaininhibitorsthateffectivelysuppresstheinhibitoryactivitiesofcrudelysatesforPCRamplification,whilemaximallymaintainingtheintegrityofreleasedgenomicDNA.Thepatent-pendingsimpleprocedurecompletelyeliminateanysolutiontransferortube-openingsteps,providingyouwithsubstancialextratime.Briefprocedure1.LysetailsinDirectPCRLysisReagent.2.Incubatefor45minat85°C.3.PCRgenotypingwith1μllysates.Detailedprotocols:Tail,Ear,YolkSac,andCulturedcells.DirectPCRsystemoffersadvantagesoverconventionalprotocolsthatinclude:Timesaving:Lesshands-ontime.CrudetaillysatesforPCR.Moneysaving:Cost-effectivereactions.Safe:Noorganicreagents.Environmental:Lesswaste(organicreagents,tubes,tips,etc...)Reliableandefficient:Virtually100%successratewithhighyields.DirectPCRLysisReagent(mousetail)101-T50ml(250mousetails).102-T100ml(500mousetails).我们公司最大优势是强大的采购,1:基本什么都能进口,血清,抗体,耗材,还有部分限制进口的,2:货品全,现经营过700多个品牌,基本所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷偏的产品那就更有优势,3:提供加急服务,一般1-2周到货,超过时限加急费全免4:价格公道,绝大部分价格有优势,当然不能保证100%产品都是价格最低,因为价格最低意味着没有服务.5:良好的信誉,大部分客户我们提供货到付款服务,客户包括清华,北大交大复旦,中山等100多所大学,ROCHE,阿斯利康,国药,fisher等500多家公司6:我们独家代理的品牌有:AntibodyResearchCorporation,arcticzymes,Biorelevant,AmberGen,Inc.,clemente-associates,clodronateliposomes,ColumbiaBiosciences,enzymeresearch,GeneBridgesGmbH,Genovis,AmberGen,Inc.BiotechnologyGmbH,HaematologicTechnologiesHTIHaemtech,hookelabs,Immudex,InnovativeResearchofAmerica,inspiralis,ListBiologicalLaboratories,Inc.,lumafluor,Microsurfaces,multiplicom,nanotools,Pel-FreezBiologicals,pentapharm,progen,ProteinArk,QA-Bio,Inc,QA-Bio,IncQuickZymeBiosciences,Teknova,TriLinkBioTechnologies,Inc.,ZyagenLaboratories等7:我们还是invitrogen,qiagen,MidlandBioProductsCorporationam,sigma;neb,roche,merck,rnd,BD,GE,pierce,BioLegend等知名大品牌批发,欢迎合作。
ViagenBiotechInc.isaleadingproviderofinnovativeDNAextractiontechnologiesandproductsforlifescienceresearch.ViagenDirectPCR®DNAExtractionSystemisasingle-tubesystemforrapidpreparationofDNAfrommousetails,earpieces,yolksac,andculturecells. Thepatent-pendingcomponentsdevelopedbyscientistsatViagenBiotechInc.allowtheresultingDNAextractstobecompatiblewithgenomicPCRforgenotyping.Crudeextractsofbiologicalsamplesarenotcompatiblewithmanymolecularbiology-gradereactionssuchaspolymerasechainreaction(PCR),inpartduetoinhibitorscontainedincrudeextracts. TheDirectPCRreagentsnotonlymediatetherapidlysisofbiologicalsamplesbutalsocontaininhibitorsthateffectivelysuppresstheinhibitoryactivitiesofcrudelysatesforPCRamplification,whilemaximallymaintainingtheintegrityofreleasedgenomicDNA.Theprocedurecompletelyeliminatesanysolutiontransferortube-openingsteps,savingasubstantialamountoftimeandeffort.DirectPCRreagentscostonly26centspertail,providingsavingsatanyusagevolume.
ViagenBiotechInc.是一家为生命科学研究提供DNA提取技术和产品的*供应商。ViagenDirectPCR®DNA提取系统是一种单管系统,用于从小鼠尾巴,耳朵,卵黄囊和培养细胞中快速制备DNA。由ViagenBiotechInc.的科学家开发的正在申请专li的组件使得所得的DNA提取物与基因组PCR相容,可用于基因分型。生物样品的粗提物与许多分子生物学级反应如聚合酶链反应(PCR)不相容,部分原因是粗提物中含有抑制剂。DirectPCR试剂不仅介导生物样品的快速裂解,而且还含有抑制剂,其有效抑制粗裂解物对PCR扩增的抑制活性,同时zui大程度地维持释放的基因组DNA的完整性。该程序完全消除了任何溶液转移或管打开步骤,节省了大量的时间和精力。我们的产品销往学术研究市场,生物技术公司和制药公司。 详细产品列表:Viagen全国代理 产品 货号 规格 价格 102-T 100ml $149.00 101-T 50ml 402-E 50ml $149.00 302-C 100ml $149.00 202-Y 100ml $149.00 505-PKP 100mg $85.00 501-PK 5ml $99.00 602-P 100ml $295.00 21141 1mlvial $59.00 24073 0.5ml $35.00 24073-5 2.5ml $160.00 24075 50μg $35.00 24076 50μg $39.00 24071 50μg $59.00 24072 50μg $49.00
DirectPCRLysisReagent(MouseTail)
DirectPCRLysisReagent(MouseTail)
$85.00
DirectPCRLysisReagent(Ear)
DirectPCRLysisReagent(Cell)
DirectPCRLysisReagent(YolkSac)
ProteinaseKPowder
ProteinaseKSolution(20mg/ml)
E-PrepDNAExtractionReagent
NucleicAcidStainingSolution
100DNAMarker
100DNAMarkerSet
1kbplusDNAMarker
15kbDNAMarker
20bpDNAMarker
50bpplusDNAMarker
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
1、根据所需求的酸碱性选择合适的缓冲对,若是配制酸性缓冲液就选择弱酸与弱酸盐缓冲对;若是配制碱性缓冲液就选择弱碱与弱碱盐缓冲对。
2、根据所需要控制的PH范围以及弱酸和弱碱的解离常数(pKa/pKb)选择具体的共轭酸碱对,公式为PH=pKa±1=(14-pKb)±1。
3、根据公式计算缓冲溶液的组分比,酸性缓冲液PH=pKa-lgc酸/c盐,碱性缓冲液PH=14-pKb+lgc碱/c盐。
4、根据共轭酸碱对以及其组分比配制缓冲液,方法同普通溶液。
举例:试配制一种缓冲液,体积为1L,PH能维持在10.25左右。
a、依题意选择弱碱与弱碱盐的共轭对;
b、由PH=(14-pKb)±1,算出pKb在3.75与4.75之间,查弱碱的解离常数表可知氨水(pKb=4.75)符合要求,故可选择NH3-NH4Cl体系;
c、由PH=14-pKb+lgc碱/c盐,算出c(氨水)/c(氯化铵)=10;
d、设氨水的浓度为10mol/L,则氯化铵的浓度为1mol/L,所以在浓度为10mol/L体积为1L的氨水中加入1mol的氯化铵即可。
1)缓冲溶液作用原理和pH值
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。
由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H 离子基本上被A-离子消耗:
所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。
2)缓冲溶液的缓冲能力
在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。
缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用。
组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH最小,缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算:
此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内。
弱酸及其盐(弱酸及其共轭碱)体系pH=pKaφ±1
弱碱及其盐(弱碱及其共轭酸)体系pOH=pKbφ±1
例如HAc的pKaφ为4.76,所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76~5.76的缓冲溶液,在这个范围内有较大的缓冲作用。配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力最大,此时(c(HAc)/c(NaAc)=1。
3)缓冲溶液的配制和应用
为了配制一定pH的缓冲溶液,首先选定一个弱酸,它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值,然后计算酸与碱的浓度比,根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液。
以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法。对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法。
缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛,如鉴定Mg2 离子时,可用下面的反应:
白色磷酸铵镁沉淀溶于酸,故反应需在碱性溶液中进行,但碱性太强,可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反应的pH值需控制在一定范围内,因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液,保持溶液的pH值条件下,进行上述反应。
表面活性剂
表面活性剂 surfactant,surface activeagent
溶于液体后,具有使表面张力显著降低作用的物质,称为表面活性剂。由于其分子内存在着亲水性部分和疏水性部分,因此表面容易吸附;另外在一定浓度(胶粒临界浓度)以上时,则形成称为胶粒的分子团。亲水性、疏水性两部分之比,是决定表面活性剂性质的重要因素,所以以此作为表示亲水、疏水平衡〔hydrophilc hydrophobic (=lipophilc)〕(缩写HLB)的数量夫系。随着水溶液中的解离状况,分为阴离子、阳离子、两性和非离子性等四种表面活性剂。表面活性剂具有洗涤剂等广泛用途,但基于难溶于水的非极性物质的溶解作用,所以在活体膜的研究上占有重要的地位。为了使膜蛋白稳定和易溶化的目的,所使用的主要为中性表面活性剂,而以Tritonx -100为代表的Triton系、Tween系等各种HLB值不同的市售品都可以利用。十二基硫酸钠(SDS)等阴离子表面活性剂和十六烷三甲胺等阳离子表面活性剂,一般均具有较强的溶化作用,但对蛋白质也有较强的变性作用。利用SDS和蛋白质的复合体的聚丙烯酰胺凝胶电泳,被广泛应用于测定蛋白质分子量的一种方法。
它是一类具有表面活性的化合物。溶于液体(特别是水)后,能显著降低溶液的表面张力或界面张力,并能改进溶液的增溶、乳化、分散、渗透、润湿、发泡和洗净等能力。主要用于制作合成洗涤剂、乳化剂、破乳剂、渗透剂、发泡剂、消泡剂、润湿剂、分散剂、浮选剂、柔软剂、抗静电剂、防水剂等助剂。广泛用于纺织、食品、医药、农药、化妆品、建筑、采矿等工业领域。表面活性剂具有共同的特点,即分子中同时存在亲水基和亲油基(又称疏水基)。亲水基通常是溶于水后容易电离的基团,如羧酸盐、磺酸盐、硫酸酯盐等,以及在水中不电离的羟基或聚氧乙烯基。亲油基能与油类互相吸引、溶解,通常是由石油或油脂组成的长碳链的烃基 ,可以是脂肪烃,也可以是芳香烃。亲水基性能强,就溶解于水,反之,亲油基性能强,就溶于油。表面活性剂溶于水后,能生成单分子膜和胶束,其分子在水中能自动定向吸附于水溶液-空气的界面处 ,亲水基伸向水溶液 ,亲油基伸向空气,分子通过界面吸附形成的单分子膜在界面处起着隔离作用 ,使空气和水溶液的接触面显著减少,因此,水溶液的表面张力急剧下降。表面活性剂通常按离子类型分为离子型(溶于水后电离成离子)、非离子型(溶于水不电离)。(1)非离子型,如多元醇、聚氧乙烯等.(2)离子型,它又可分为阴离子型(如:磺酸盐、羧酸盐等)、阳离子型(如各类胺盐)、两性型(如氨基酸)
(2)酸和盐浓度等比例也增减时,溶液的pH值不便。
(3)酸和盐浓度相等时,缓冲液的缓冲效率为最高,比例相差越大,缓冲效率越低,一般地说缓冲液有效缓冲范围为PK±1pH
甲液:0.05mol/L Na2HPO4溶液 :称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸 馏水至1000ml ;
乙液:0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1.
将甲乙液分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:
pH 甲液ml 乙液mI
5.29 2.5 97.5
5.59 5.0 95.0
5.91 10.0 90.0
6.24 20.0 80.0
6.47 30.0 70.0
6.64 40.0 60.0
6.81 50.0 50.0
6.98 60.0 40.0
7.17 70.0 30.0
7.38 80.0 20.0
7.73 90.0 10.0
8.04 95.0 5.0
你要配制pH=6.8的PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可.