
求助:HPLC氨基酸分析
2021-08-01
问题描述:
采用OPA柱前衍生,波长是338nm
流动相A:20mmol/LNaH2PO4(用10mol/LNaOH溶液调pH至7.8±0.2);
流动相B:甲醇:乙腈:水=(45:45:10,V/V/V);
柱温:40℃;
然后进其他单标氨基酸的时候都没有问题,但是进单标胱氨酸的时候,HPLC色谱图中出了两峰,为什么会有两峰?这两峰分别是什么峰?其中一个是半胱氨酸的峰吗?用何种方法可以确定这两个分别是什么峰?
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三神山


如果用的DAD检测器看看他们紫外吸收是否相同 如果相同可能为样品离子化 如果不一样则可能对照品溶液有东西

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xiangjie_1984


你买点半胱氨酸定位试试。

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fangenyao


关注下对照品的贮存、使用过程是否都正确,使用时有没有注意事项。确保对照品没问题的情况下再去找其他原因。

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滴水10穿


顺便请教一下:柱前衍生,检测结果的稳定性怎么样?

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e_liang369


流动相pH可能未到位使得氨基状态不同,导致畸形不同从而保留时间有差异
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