【求助】糖类的鉴别
2005-03-18
问题描述：
我想鉴别一下黄酮糖苷上的糖，已经水解了，请问纸薄层鉴别糖常用的展开体系有哪些？最好有三种以上！五碳糖和六碳糖的展开剂有区别吗？用径向展开比垂直展开有何优点？
还有如果用气相做糖的鉴别的话，需要样品量大不大？怎么衍生化？
不好意思，我是学药分的，对植化比较外行，请详细些，谢了先！
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cgcai
用户
《糖复合物生化研究技术》可以找找看，
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WENDYLXQ
用户谢谢cgcai，不过我们图书馆未必能找到这样的书，馆藏资源有限呀，要找也得到下周了（周末他们不上班），你那是不是有这本书，能不能帮我找到答案，非常感谢！我想植化的同学做过这方面工作的话应该不难回答吧，是不是我写得不够清楚，还是问得太菜了，恳请高人指点一二！期待中......
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polestar
用户你可以试一下用硅胶TLC，与标准糖做对照，展开系统：氯仿：甲醇：水（65：35：7），或者正丁醇：醋酸：水（4：1：5）系统，我做过两者系统都可以的，黄酮上连的糖种类不是很多，连糖的个数也不太多，我建议你先做个质谱推测下到底是什么糖，这样找标准糖做对照会容易些。
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WENDYLXQ
用户谢谢polestar，我的要鉴别的糖是六碳糖，你提供的两种展开系统我都试过，可惜葡萄糖和半乳糖的Rf值是一样的，没法确定是哪种糖。我不知道用什么样的展开剂能在薄层上把它俩分开？
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polestar
用户你试一下EtOAc:MeOH:HAc:H2O(12:3:3:2)，半乳糖比葡萄糖的Rf值大，两糖可以区分开。
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dracula75
用户纤维素板（不是硅胶板），展开剂乙酸乙酯：吡啶：乙酸：水=5：5：1：3，显色剂苯胺-邻苯二甲酸均匀喷洒在板上，110度烘烤10分钟，显色。和单糖的标准品对照，鉴定单糖的种类。试一下葡萄糖和半乳糖能不能分开
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WENDYLXQ
用户谢谢二位提供方法！Re:polestar,EtOAc:MeOH:HAc:H2O(12:3:3:2)的展开剂我试了，还是分不开呀，跑了几块板都不行。Re:dracula75，非得用纤维素板吗？我问了几个我们常买东西的地方都买不着纤维素粉，还有别的办法吗？
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dracula75
用户我们用的是Merck-SchuchardtCo.的DC-AlufoliencelluloseTLC再问问看能否买到
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dracula75
用户买到的就是现成的TLC薄板，不是拿纤维素粉自己铺的
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runner1999
用户如果大部分薄层层析的方法你都试过了，那就线把水解了，然后做GC－MS。就可以知道你的六糖组成和比例了。可能在这之前需要衍生化一下。
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dracula75
用户“......还有如果用气相做糖的鉴别的话，需要样品量大不大？怎么衍生化？”糖的气相色谱分析需要样品量不多，有两毫克足矣！首先要保证完全水解成单糖，然后还要还原（一般用硼氢化钠）、乙酰化（羟基转化为乙酰基，因而易挥发），进行GC分析。最好有常见单糖的标准品（当然包括葡萄糖和半乳糖），标准品也要做上述衍生化处理。这样和标准品对照就可以根据出峰时间判断糖的组成并计算相对含量，用这个方法可以不需要MS。
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