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References
1.ACSChemicalBIOLOGy5(5),455(2010).
2.ProteinEngDesSel22(4),243(2009).
Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,公司位于美国加利福尼亚的BAYAREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多,包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料GelRed和GelGreen,以及最新推出的CheetahTaq热启动酶个CF系列蛋白质标记染料等等。
GelReD®是一种超灵敏、极稳定和环境安全的荧光核酸染料,用于取代高毒性溴化乙锭(EB),用于在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中染色dsDNA、SSDN或RNA。GelRed®比EB敏感得多,无需拆解步骤。
GelReD®和EB具有几乎相同的光谱,因此您可以直接更换EB与GeldRead®,而不改变您现有的成像系统。
凝胶红可用于琼脂糖凝胶中dsDNA、ssDNA或RNA的预染色或后染色。凝胶红还可用于聚丙烯酰胺凝胶中dsDNA、ssDNA或RNA的后凝胶染色。因此,凝胶化与下游DNA操作(如限制性消化、测序和克隆)兼容。
优势
1.比EB更安全:Ames试验和其他试验显示无致突变和非细胞毒性
2.易处理:通过直接排放到下水道或常规垃圾中的环境安全试验
3.超灵敏:比EtBr和SYBR®安全型更灵敏
4.非常稳定:可在水中使用,在室温下长期储存稳定,可微波
5.使用简单:非常简单的预处理或电泳后凝胶染色程序
6.与标准紫外线透照仪兼容:无需改变光学设置即可替代EtBr
7.与下游应用兼容:凝胶纯化、限制性消化、测序和克隆
GelRed和GelGreen是设计以取代剧毒的代替高毒性的溴化乙锭(EtBr)的新一代核酸凝胶荧光染料。Biotium科学家研发的GelRed和GelGreen集低毒性、高灵敏性和出色的稳定性等优点于一体,效果由于EtBr及其他EtBr替代品。
几十年来,EtBr因极其低廉的价格,一般的灵敏度,一直被用作核酸凝胶染色的主要染料。然而EtBr是一个高度诱变的物质。该染料的使用安全隐患,净化及废物处置的相关费用等,终导致其代价高昂。正因如此,近年来市场上出现了一些替代品,如SYBR系列染料等。尽管这些替代染料减少了致突变性,但却丧失了染料其他方面的功能。例如,SYBRSafe的灵敏度很低,SYBRGreen及SYBRGold的稳定性远远低于EtBr。SYBR染料能快速的进入细胞,结合线粒体及细胞核DNA,是的染料在一定浓度是有毒的。事实上,在紫外线或其他诱变剂诱导下,SYBRGreenI强烈的突变性已经被广泛认知。(Ohta,etal.MutRes492,91(2001))
为了保证GelRed和GelGreen的安全性,Biotium的科学家采用一种新型非常简单的概念:阻止染料进入活细胞减少遗传毒性。我们相信,不给DNA结合染料渗透活细胞中结合基因组DNA的机会,便可以保证染料没有或大幅度减少其诱变性作用。因此,我们设计的GelRed和GelGreen染料拥有独特化学结构保证其无法渗透细胞膜。Ames试验验证即使浓度远远高于实验者操作凝胶染色的工作浓度,GelRed和GelGreen也无诱变性。此外,环境的安全性试验表示,GelRed和GelGreen是完全无害的,对水生生物无毒。因此,废弃的GelRed和GelGreen可以直接倒入下水道,或按照普通垃圾处理。
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该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。
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Microtubule spindowns for visual analysis can be performed on single microtubules or microtubules nucleated from axonemes/centrosomes. Although live DIC analys
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用考马斯亮蓝R-250染色1.凝胶的固定液中轻微摇荡至少1小时。2.凝胶在染色液中摇荡过夜或至少1小时。3.胶在脱色液中摇荡过夜或至少1小时以消除背景。4.凝胶放于保存液中至少4小时以进一步脱色。在最初的1小时内换两次溶液,以后每一小时换一次溶液。5.封好的胶置于保存液中,4℃下最少可保
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第十一课 离子色谱法 离子色谱法 离子色谱法是利用离子交换原理和液相色谱技术测定溶液中 阴离子和阳离子的一种分析方法。离子色谱是液相色谱的一种。离子色谱是利用不同离子对固定相亲合力的差别来实现 分离的。离子色谱的固定相是离子交换树脂,离子交换树脂是苯乙烯- 二乙烯基苯的共聚物。
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AP Buffer: 100 mM Tris-HCl, pH 9.5 100 mM NaCl 10 mM MgCl2 PTM: PBS 0.1% Tween-20 2 mM MgCl2 Since this is generally done in conjunction with lacZ staining, em
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在间期细胞核中,女性X 染色质和男性Y 染色质均可用特殊染色法显示出来。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)
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METHOD 1:Formaldehyde preservative – 2% formaldehyde solution in protein-free phosphate-buffered saline (PBS).Prepare as follows:Add 2 g paraformaldehyde powd
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来源:生物化学与分子生物学实验指导,邵雪玲 等,武汉大学出版社,2003
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在葡萄糖-6-磷酸(GbB)和NADP存在下,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)能使用NADP还原成NADPH,后者在紫外线照射下不会发出荧光。本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导
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1.将固定液中的凝胶摇动过夜或至少1小时。2.将保温液中的凝胶轻微振荡2小时。3.去离子水清洗凝胶3次,每次20分钟。4.将硝酸银溶液中凝胶轻微振荡30分钟。5.用去离子水快速洗胶30秒。6.将定影液中凝胶摇动5~30分钟,时间由所加的蛋白质量决定。7.如果已经达到所需的颜色深度,将凝胶放到定
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活体染色是利用某些无毒或毒性很小的染料来显示细胞内某些天然结构,而不影响细胞的生命活动或产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。...
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ReagentsCells to be studied expressing green fluorescent protein (GFP). Note that the same cell type without GFP is needed as a control.1 X PBS2% Buffered for
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PCR核酸检测试剂中常用的
荧光染料,如RTGreen、SYBRGreen、EvaGreen等,其核心原料的化学结构是什么?它们到底是菁基染料、酞菁、方酸染料,还是新型罗丹明?有没有相关技术说明?FITC-异硫氰酸荧光素(CAS:3326-32-7)算不算是其中常用的一个?
请问有哪位高手用过EvaGreen的
荧光染料,最近有人推荐其性能很好,目前已经有很多原来使用SYBRGreen的国内用户都已经改用该产品,不知具体效果究竟如何,有谁亲自用过啊,介绍一下经验吧,非常感谢!!!
荧光显微镜是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯(FDA):FAD 本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。 一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生 具有荧光的极性物质荧光素。它不能自由出入原 生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力 的原生质体不能分解FAD无荧光产生。5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用 时取0.22mlFDA贮存液加入5ml0.65mol/L甘露醇中.使用时,使最终浓度为0.01%。荧光染料Ho33342和若丹明123: 活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内。但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用。荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合。采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
大家好!因为是新手,所以想知道只有molecularprobe的SYBEGREENI
荧光染料,其他都是用于普通PCR的(Mg2+、Taq酶),仪器是
ABI7900实时
定量PCR系统,是否能作相对定量PCR啊?:~(?)(?)(?)
生物物质,比如细胞内的大分子,都会产生荧光。不过比起专门的荧光染料来,强度要低很多。被激光照射后,所产生的荧光就是背景荧光
实验要用
荧光染料monodansylcadaverine(MDC)(0.1mmol/l),但不清楚MDC要用什么溶剂溶解,如何配制,及配好后如何储存?请高手们帮忙,谢谢!!!
示踪染料有很多种,跟据你的目的和实验方法来选取,比如calcein,dri,cfda,还有bcef等。
这些染料都非常成熟,光毒和淬灭都很低,当然要考虑到你采集图像时的显微镜参数。
比如calcein,常用的示踪,绿光(虽然这些颜色只是根据光谱加上去的伪彩),但要考虑你的实验过程中结合细胞结构,是否会伴随calcein的泄漏,就是荧光降低。
dri,还可以看膜啊
cfda也不错
bcef虽是ph指示,但你试验时不仅可观察细胞,还可看细胞ph变化,也行。
当然你或许还要结合其他方法,如细胞免疫化学等手段去双染或多染,都需要综合考虑染料之间特性。单独染一个染料,有点浪费,不如多染,数据和图像也好看些。现在流行细胞成像。
做细胞免疫荧光实验,请问波长为633nm的选用那种
荧光染料,从没接触到这样的实验,一切都要从头开始做,好晕呢.作实验真的郁闷.
我现在正在做细胞吞噬铁的实验,想在共聚焦下观察细胞吞噬的实验,想找一个
荧光染料可以染到细胞膜的?新手上路,还望各路高手多多指点啊!
希望同路人多多交流啊!
荧光染料是一种能吸收部分子外光,将紫外光转化为可见光,从而增加亮度的着色剂,从而使颜色极为鲜明。
荧光燃料使用的问题有两个:
一个就是迁移性,使用时要严格控制用量,以避免产生迁移现象;
二是荧光染料使用有一个极限值,如果超量使用,导致荧光线被吸收,使吸收和发光成叠所致。
想请问一下,DAPI这个染料到底有没有膜通透性,我通过百度搜索查询关于DAPI染料的,基本上是说它能透过细胞膜对活细胞和死细胞均能染上蓝色;但是也有人说DAPI只可以透过死细胞膜,不能对活细胞进行染色,用以区分活死细胞,到底哪个是对的啊,蒙了!!!!!!
荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。向左转|向右转