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阴道分泌物带来的

最近在做黄体化颗粒细胞分离培养，但是注射器吸取大卵泡液或者从下颗粒细胞离心时就会凝固成果冻状，大家有碰到过这样的事情么？已经好几次了，一直是这样，大家给支个招吧

干细胞的分类：
（一）按功能分类

1、全能干细胞，由卵子和精子的融合产生受精卵。而受精卵在形成胚胎过程中八细胞期之前任一细胞皆是全能干细胞。具有发展成独立个体的能力。也就是说能发展成一个个体的细胞就称为全能干细胞。具有形成完整个体的分化潜能，如胚胎干细胞，受精卵就是最高层次的胚胎干细胞。
2、多功能干细胞，一种或多种组织的起源细胞，它能分化出多种类型细胞，是全能干细胞的后裔，但不可能分化出足以构成完整个体的所有细胞。具有分化出多种细胞组织的潜能，如造血干细胞、神经细胞。
3、多潜能干细胞，只能分化成特定组织或器官等特定族群的细胞。
4、专一性干细胞，只能产生一种细胞类型；但是，具有自更新属性，将其与非干细胞区分开。只能向一种或两种密切相关的细胞类型分化，如上皮组织基底层的干细胞，肌肉中的成肌细胞。
（二）按发育过程出现先后和分布分类
1、胚胎干细胞(Embryonic stem cell)：在胚胎发育早期的囊胚中，可发育为不同的细胞，是所有细胞最初期的形态。
ES细胞是一种高度未分化细胞，它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞；研究和利用ES细胞是生物工程领域的核心问题之一；在未来几年，ES细胞移植和其它先进生物技术的联合应用很可能在移植医学领域引发革命性进步。
2、成体干细胞(Adult stem cell)：亦称成人干细胞，医学上常用的大致包括骨髓干细胞、脐带血干细胞及周边血干细胞。它们存在成体特定的组织中，具有由干原细胞形成先驱细胞，分化成具特定功能细胞的能力。例如：骨髓干细胞、造血干细胞、神经干细胞。
干细胞（英语：Stem cell）是原始且未特化的细胞，它是未充分分化、具有再生各种组织器官的潜在功能。干细胞存在所有多细胞组织里，能经由有丝分裂与分化来分裂成多种的特化细胞，而且可以利用自我更新来提供更多干细胞。对哺乳动物来说，干细胞分为两大类：胚胎干细胞与成体干细胞，胚胎干细胞取自囊胚里的内细胞团；而成体干细胞则来自各式各样的组织。在成体组织里，干细胞与先驱细胞担任身体的修复系统，补充成体组织。在胚胎发展阶段，干细胞能分化为任何特化细胞，但仍会维持新生组织 (像是血液、皮肤或肠组织) 的正常转移。
干细胞的应用：
（一）基础应用
干细胞的调控是指给出适当的因子条件，对干细胞的增殖和分化进行调控，使之向指定的方向发展。
1、内源性调控
干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化，包括调节细胞不对称分裂的蛋白，控制基因表达的核因子等。另外，干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞内调控因子的制约。
（1）细胞内蛋白对干细胞分裂的调控。
（2）转录因子的调控。
2、外源性调控
除内源性调控外，干细胞的分化还可受到其周围组织及细胞外基质等外源性因素的影响。
（1）分泌因子间质细胞能够分泌许多因子，维持干细胞的增殖，分化和存活。
（2）膜蛋白介导的细胞间的相互作用。
（3）整合素（Integrin）与细胞外基质。
（二）科研应用
1、器官修补更新；
2、人造器官与组织的来源；
3、新药开发；
4、基因功能研究；
5、基因治疗的工具；
6、毒理、药理研究；
7、癌症研究。
（三）医疗运用
干细胞移植治疗技术，被誉为人类有史以来的飞跃式医疗手段，实现人体各个器官修复和更新。
主要治疗项目：
1、器官修复：干细胞能在短时间内修复各种器官组织，为各类疾病提供非常有效的治疗效果。
2、肿瘤：把成人神经干细胞注射到老鼠大脑中的研究可以神奇地成功治疗肿瘤。由于脑癌的扩散迅速，运用传统的技术几乎不可能治愈。哈佛医学院的研究人员注射了由基因工程得到的成人干细胞，用以把另外注射的无毒性物质转化成抗癌剂。几天之内，成人干细胞迁移到癌变区域，注射物可以减少百分之八十的肿块。
3、骨骼：骨髓间充质干细胞是具有自我更新能力并可以分化成为成骨细胞的一种干细胞。多项基于动物骨髓的研究和一些初步的临床数据显示了它们在重建骨骼方面的贡献。在整形外科方面，一些由创伤引起的，由癌症引起的或感染引起的骨细胞的损失，如进行手术弥补人造关节会引起一些不便，而进行干细胞的自体移植正可以解决这方面的问题。
4、脱发：毛发囊泡也具有干细胞。治疗可能可以简单地向毛囊干细胞发出信号从而向附近那些因年长而萎缩的毛囊细胞发出化学信号，使它们轮流再生制造健康的头发。
5、治疗不孕：研究人员发现从成年女性身上获取的干细胞在实验室中可以自发生成新的卵子。在小鼠身上进行的实验显示这些卵子可以进一步发育。
6、糖尿病：干细胞移植可用于治疗糖尿病的。干细胞治疗糖尿病是在血液内提取相应干细胞体外分离、纯化、扩增后经静脉注射或介入等方式输入到患者体内，在胰腺组织微环境的诱导下分化增殖为胰岛样细胞并分泌胰岛素，促进受损胰岛组织细胞的再生、修复，从而达到功能重建的目的，起到治疗糖尿病的作用。

我的u266人多发性骨髓瘤细胞株复苏后常规培养总是生长缓慢或逐渐变少,请问人多发性骨髓瘤细胞株培养的注意事项,有何需要特殊处理吗

一个瓶子中的细胞，如果可以培养到50代，怎么分原代培养的和传代培养的

需要连接到载体上才能转染受体细胞，载体可能是质粒或者病毒

细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段：
接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化（Caspase）→进入连续反应过程 细胞凋亡的启动是细胞在感受到相应的信号刺激后胞内一系列控制开关的开启或关闭，不同的外界因素启动凋亡的方式不同，所引起的信号转导也不相同，客观上说对细胞凋亡过程中信号传递系统的认识还是不全面的，比较清楚的通路主要有：
1）细胞凋亡的膜受体通路：各种外界因素是细胞凋亡的启动剂，它们可以通过不同的信号传递系统传递凋亡信号，引起细胞凋亡，我们以Fas -FasL为例：
Fas是一种跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，它与FasL结合可以启动凋亡信号的转导引起细胞凋亡。它的活化包括一系列步骤：首先配体诱导受体三聚体化，然后在细胞膜上形成凋亡诱导复合物，这个复合物中包括带有死亡结构域的Fas相关蛋白FADD。Fas又称CD95，是由325个氨基酸组成的受体分子，Fas一旦和配体FasL结合，可通过Fas分子启动致死性信号转导，最终引起细胞一系列特征性变化，使细胞死亡。Fas作为一种普遍表达的受体分子，可出现于多种细胞表面，但FasL的表达却有其特点，通常只出现于活化的T细胞和NK细胞，因而已被活化的杀伤性免疫细胞，往往能够最有效地以凋亡途径置靶细胞于死地。Fas分子胞内段带有特殊的死亡结构域（DD,death domain）。三聚化的Fas和FasL结合后，使三个Fas分子的死亡结构域相聚成簇，吸引了胞浆中另一种带有相同死亡结构域的蛋白FADD。FADD是死亡信号转录中的一个连接蛋白，它由两部分组成：C端（DD结构域）和N端（DED）部分。DD结构域负责和Fas分子胞内段上的DD结构域结合，该蛋白再以DED连接另一个带有DED的后续成分，由此引起N段DED随即与无活性的半胱氨酸蛋白酶8（caspase8）酶原发生同嗜性交联，聚合多个caspase8的分子，caspase8分子遂由单链酶原转成有活性的双链蛋白，进而引起随后的级联反应，即Caspases，后者作为酶原而被激活，引起下面的级联反应。细胞发生凋亡。因而TNF诱导的细胞凋亡途径与此类似
2）细胞色素C释放和Caspases激活的生物化学途径
线粒体是细胞生命活动控制中心，它不仅是细胞呼吸链和氧化磷酸化的中心，而且是细胞凋亡调控中心。实验表明了细胞色素C从线粒体释放是细胞凋亡的关键步骤。释放到细胞浆的细胞色素C在dATP存在的条件下能与凋亡相关因子1（Apaf-1）结合，使其形成多聚体，并促使caspase-9与其结合形成凋亡小体，caspase-9被激活，被激活的caspase-9能激活其它的caspase如caspase-3等，从而诱导细胞凋亡。此外，线粒体还释放凋亡诱导因子，如AIF，参与激活caspase。可见，细胞凋亡小体的相关组份存在于正常细胞的不同部位。促凋亡因子能诱导细胞色素C释放和凋亡小体的形成。很显然，细胞色素C从线粒体释放的调节是细胞凋亡分子机理研究的关键问题。多数凋亡刺激因子通过线粒体激活细胞凋亡途经。有人认为受体介导的凋亡途经也有细胞色素C从线粒体的释放。如对Fas应答的细胞中，一类细胞（type1）中含有足够的胱解酶8 （caspase8）可被死亡受体活化从而导致细胞凋亡。在这类细胞中高表达Bcl-2并不能抑制Fas诱导的细胞凋亡。在另一类细胞（type2）如肝细胞中，Fas受体介导的胱解酶8活化不能达到很高的水平。因此这类细胞中的凋亡信号需要借助凋亡的线粒体途经来放大，而Bid -- 一种仅含有BH3结构域的Bcl-2家族蛋白是将凋亡信号从胱解酶8向线粒体传递的信使。 尽管凋亡过程的详细机制尚不完全清楚，但是已经确定Caspase即半胱天冬蛋白酶在凋亡过程中是起着必不可少的作用，细胞凋亡的过程实际上是Caspase不可逆有限水解底物的级联放大反应过程，到目前为止，至少已有14种Caspase被发现，Caspase分子间的同源性很高，结构相似，都是半胱氨酸家族蛋白酶，根据功能可把Caspase基本分为二类：一类参与细胞的加工，如Pro-IL-1β和Pro-IL-1δ，形成有活性的IL-1β和IL-1δ；第二类参与细胞凋亡，包括caspase2,3,6,7,8,9.10。Caspase家族一般具有以下特征：
1)C端同源区存在半胱氨酸激活位点，此激活位点结构域为QACR/QG。
2)通常以酶原的形式存在，相对分子质量29000-49000(29-49KD），在受到激活后其内部保守的天冬氨酸残基经水解形成大（P20）小（P10）两个亚单位，并进而形成两两组成的有活性的四聚体，其中，每个P20/P10异二聚体可来源于同一前体分子也可来源于两个不同的前体分子。
3)末端具有一个小的或大的原结构域。
参与诱导凋亡的Caspase分成两大类：启动酶（inititaor）和效应酶（effector）它们分别在死亡信号转导的上游和下游发挥作用。向左转|向右转

干细胞都能用来干什么啊？？提取方法多吗？都在哪儿提取啊？？

最近导师给了一个任务，要做关于原代细胞、细胞系课题研究。之前买过中科院的细胞，不仅价格死贵，而且还没得售后服务，真是坑死人，哪家生产细胞的公司在这方面技术比较过硬？

请问一下大家，如果想做流式细胞仪检测细胞凋亡情况，请问细胞应该接种在多大的孔板上

看了一篇文献说，某某干预对SV40转染的人成纤维细胞有细胞毒性。不明白他想说明什么。#细胞生物学#

直接用dmem就可以的吧，6孔板每孔加多少培养基比较合适呢？没做过共培养比较忐忑，各位大神有什么经验可以分享一下吗