蛋白质含量的测定(Folin—酚法)
| 实验方法原理 | FOLIN酚法所用的试剂有两部分组成。试剂甲可与蛋白质中的肽键起显色反应,试剂乙在碱性条件下极不稳定,易被酚类化合物还原成蓝色(蛋白质中的酚基将磷钼酸-磷钨酸还原成蓝色复合物)。在一定条件下,蓝色强度与蛋白质的量成正比,范围约在25～250μg/ml蛋白质浓度。 | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 蛋白质 试剂、试剂盒 | 碳酸钠氢氧化钠硫酸铜酒石酸钠钨酸钠钼酸钠蒸馏水磷酸浓盐酸硫酸锂液体溴酚酞 仪器、耗材 | 722S型分光光度计电子天平离心机容量瓶试管吸管 实验步骤 | 1. 样品的制备 2. 标准曲线的制作与样品测定 按下表操作，A.FOLIN酚法 B.考马斯亮蓝法
(标:标准蛋白质溶液,F:FOLIN试剂:K:考马斯亮蓝 G250试剂。自己制备的蛋白质溶液测定含量时注意稀释度) 注意事项 | 1. 蛋白质样品和呈色剂都不应有沉淀,有沉淀应过滤除去。 2. 染料与蛋白质结合后,形成的蓝色复合物易轻度沾附试管壁或比色皿,每次使用不能用有着色的比色皿。使用完后应立即清洗干静。 |
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发布于 ： 2018-08-10
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