求助!!!第一次做琼脂糖凝胶电泳
2021-07-26
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sicaujj
用户
微光ksm 我用试剂盒提了质粒，想跑琼脂糖凝胶电泳看看质粒的纯度如何，结果Marker很清晰，但是样本一点条带都没有，孔的位置也不亮，做了两次，也加大了上样量，都没有出现条带，求朋友们指点!!!测浓度了吗？
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微光ksm
用户sicaujj测浓度了吗？测了，浓度不高，60纳克/微升左右
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sicaujj
用户微光ksm测了，浓度不高，60纳克/微升左右这个kit提出来是用于测序的吗？浓度太低了，你要想看到条带，至少要上个5ul吧。
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微光ksm
用户sicaujj这个kit提出来是用于测序的吗？浓度太低了，你要想看到条带，至少要上个5ul吧。我用的是10*loADIngbuffer,样本加了9微升
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LIJI18621679755
用户1．制胶以制备50ml,1%凝胶为例，按压取1片低渗琼脂糖，放入50ml缓冲液浸泡203分钟使之完全崩解，之后操作与粉末琼脂糖相同。（注意，不需添加任何染料。）2．染色GelRedLoADIngBuffer与样品按照1:4体积比混合放置3-5分钟。3．上样样品与Marker按常规方法上样。4．电泳、成像分析同常规做法。您可关注公司网址：www.life-ilab.com
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微光ksm
用户sicaujj这个kit提出来是用于测序的吗？浓度太低了，你要想看到条带，至少要上个5ul吧。又提了一次浓度在160多，A260峰明显，上样量9μl,还是没有条带，真的不知道哪里出了问题，高手能帮忙分析一下吗
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sicaujj
用户展开引用微光ksm又提了一次浓度在160多，A260峰明显，上样量9μl,还是没有条带，真的不知道哪里出了问题，高手能帮忙分析一下吗......做转化后板上的菌长的正常吗？用的什么感受态？什么载体？用的什么kit提质粒的？
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微光ksm
用户sicaujj做转化后板上的菌长的正常吗？用的什么感受态？什么载体？用的什么kit提质粒的？这个是空白质粒，别人给的菌种，是15年的，摇过夜后用康维世纪小提试剂盒提的，给的人说这次的不是很好，但还是可以跑出条带的
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sicaujj
用户微光ksm这个是空白质粒，别人给的菌种，是15年的，摇过夜后用康维世纪小提试剂盒提的，给的人说这次的不是很好，但还是可以跑出条带的过夜培养后离心下来的菌量也很少咯？要不划线活化一下。要么把你现在的质粒拿去换一种感受态快转看看。
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