请使用支持JavaScript的浏览器! +,GenePORTER® 3000 Transfection Reagent GenePORTER® 3000 Transfection Reagent GenePORTER 3000 Reagent, Transfection Efficiency 蚂蚁淘商城
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genlantis/GenePORTER/kit 1.5 ml/203015
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genlantis
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203015
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Description
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  • High performance in hard-to-transfect cells
  • Fast protocol, optimized for same-day transfection
  • Minimal cytotoxicity

GenePORTER® 3000 (GP3K) Transfection Reagent is a proprietary cationic lipid that utilizes Advanced Conjugation Enhancement (ACE) technology to maximize target molecule delivery with minimal cytotoxicity. GP3K was developed for rapid same-day transfection with or without serum in a broad range of cells. GenePORTER 3000 Transfection Reagent is Genlantis" next generation delivery lipid. This novel reagent is the result of many years of transfection expertise and applied research, and comes from a distinguished and proven pedigree of cationic lipids that provide the highest quality and performance in hard-to-transfect cells.

Contents

  • GenePORTER 3000 Reagent
  • GP3K Diluent

Storage

GenePORTER 3000 Transfection Reagent kits are shipped on blue ice (sample is shipped at room temp). For maximum stability, store all reagents at 4ºC upon receipt. If stored properly, all components are stable for 6 months.

GenePORTER 3000 Transfection Reagent Kit

  • 107 rxn kit 0.75 ml, T203007
  • 214 rxn kit 1.5 ml, T203015
  • 2,140 rxn kit 15 ml, T203115
  • 10 rxn sample kit 0.1 ml, T203001
  • GP 3000 Diluent, 5 vials x 4 ml T203D05

GenePORTER 3000 Transfection Reagant Images (click images to enlarge)

Same-Day TransfectionProtocol for GenePORTER 3000 (click for PDF)

GenePORTER vs L2K B-Gal Results (click images to enlarge)

GP3K-vs-L2K-CHO-K1-72hrs-SF.gifGP3K-vs-L2K-CHO-K1-72hrs-SF.gif
GP3K-vs-L2K-HEK-293-72hrs-SF.gifGP3K-vs-L2K-HEK-293-72hrs-SF.gifGP3K-vs-L2K-HeLa-S3-48hrs-SF.gif
GP3K-vs-L2K-HeLa-S3-72hrs-SF-S.gifGP3K-vs-L2K-HeLa-S3-72hrs-SF.gifGP3K-vs-L2K-Jurkat-E6-1-24hrs-SF.gif
GP3K-vs-L2K-Jurkat-E6-1-48hrs-SF.gifGP3K-vs-L2K-NIH-3T3-72hrs-SF.gifGP3K-vs-L2K-NIH-3T3-72hrs-SF.gif

GenePORTER 3000 vs. JetPRIME reagent (click on images to enlarge)

GenePORTER™ 3000 manual (pdf)How to use GenePORTER™ 3000 transfection reagent (pdf)GenePORTER™ 3000 Brochure (pdf) GenePORTER™ 3000 Optimization Table (pdf)GenePORTER™ 3000 in NIH-3T3 cells Application Paper (pdf)GenePORTER™ 3000 - Highly Efficient Transfection of HepG2 Cells (pdf)GenePORTER™ 3000 - Highly Efficient Transfection of RAW 264.7 Cells (pdf)
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CAS Number: 9012-36-6 Synonym(s): None Molecular Weight: N/A Molecular Formula: N/A Storage Condition: ROOM TEMPERATURERisk Statements: N/A Safety Statements: N/A Coge————0710-100G Sige————100g 查看更多>
产品描述DNA fragments bind to silica membrane in high salt buffer. Cellular metabolite and proteins are removed by a serial of elution-centrifugation steps. Then DNA fragments are eluted in low salt and high pH buffer. Featu... 查看更多>
2016-01-18
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)可以:(1)测定两种目标蛋白质是否在体内结合;(2)确定一种特定蛋白质的新的作用搭档;(3)分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。实验步骤:一、试剂准备 1. 预冷 PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机。2. 用预冷的 PBS 洗涤细胞两次,最后一次吸干 PBS.3. 加入预冷的 RIPA Buffer(1 ml/107 个细胞、10 cm 培养皿或 查看更多>
产品描述DNA fragments bind to silica membrane in high salt buffer. Cellular metabolite and proteins are removed by a serial of elution-centrifugation steps. Then DNA fragments are eluted in low salt and high pH buffer. Featu... 查看更多>
标准熔点琼脂糖 有以下三种:一、SeaKem LE琼脂糖-----凝胶电泳的世界标准属于分子生物学级别,是进行核酸电泳和印迹分析的理想凝胶。每块凝胶均能提供清晰的DNA条带及一致的分辨能力。不含可检测到的DNase和RNase活性,具有高强度、低背景等优点。因其电渗(EEO)较低,故DNA在凝胶中的迁移速度较快。同时可在Ouchterlony和放射免疫扩散(RID)实验中进行蛋白凝胶电泳。应用:DNA和RNA的电泳和印迹、免疫沉淀二、S... 查看更多>
琼脂糖凝胶CL-6B/SepharoseCL-6BSepharoseCL-6B270316浙江爱因斯生物科技有限公司琼脂糖凝胶 CL-6B/Sepharose CL-6B 查看更多>
琼脂(Agar),又名琼胶、菜燕、冻粉,是一类从石花菜及其它红藻类(Rhodophyceae)植物提取出来的藻胶(phycocottoid),在我国及日本已有三百多年(1658年)的历史。琼脂糖Agarose,缩写为AG,是琼脂中不带电荷的中性组成成份,也译为琼胶素或琼胶糖。 性状:   条状琼脂为类白色或淡黄色半透明细长条状;粉状琼脂为鳞片状无色或淡黄色粉末。琼脂糖一般为白色粉末。在沸水中极易分解成溶胶;在冷水中不溶,但能吸水膨胀成... 查看更多>
吸附柱式琼脂糖胶DNA回收试剂盒... 查看更多>
l、去除DNA样品中的杂质 琼脂糖是从琼脂中提取出来的,其中吉有较多的酸根和羟基多糖。目前大多数级别的璩脂糖中混有硫酸酯多糖,这种物质能抑制基因克隆中使用的多种工具酶的活性,如DNA限制性内切酶、连接酶、激酶及聚合酶。在回收DNA时应尽量减少这些酶抑制剂的污染。不管用哪种方法,回收DNA片段的溶液,要用2.5mol/L醋酸铵和乙醇沉淀再用7。q.乙醇漂洗数次,这样处理,可以很有被地去除一些有害的有机分子和无机盐沉淀。已筏列 查看更多>
rotein A 琼脂糖凝胶为Protein A与Agarose偶联后产物,本产品可从血清,腹水,细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。 查看更多>
   随着生物技术的不断发展,基因工程表达体系的生产能力大幅度增加,不少基因工程药物的生产规模已达数千甚至万升级发酵罐。细胞表达量可达数g/L甚至10g/L。种类丰富的高表达量上游产品对下游纯化提出了挑战,尤其是目前的纯化工艺中多采用琼脂糖基质的微球作为层析填料,该基质微球虽生物相容性好,但骨架刚性低,在较高的压力下容易出现变形或者孔道的改变,影响纯化效率。很多企业只能以牺牲高流速的形式来保证纯化效率,无形中拉长了蛋白的纯化时间,使... 查看更多>
用途: 脱氧核糖核酸(DNA),脂蛋白和免疫电泳用。生化研究免疫扩散等的支持物。生物学、免疫学、生物化学和微生物学研究。临床医学上用于乙型肝炎抗原(HAA)测定。血脂电泳分析。甲胎球蛋白测定。肝炎、肝癌和心血管等疾病的诊断。 查看更多>
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请问各位大神,配制琼脂糖胶的电泳浓度是怎么设定,比如百分之1或百分之1.5的浓度是怎么设置,是1.5g的琼脂糖粉加100g的TAE麽?

琼脂糖
1、α-琼脂糖酶及其生产方法
2、磁性琼脂糖复合微球的制备方法
3、高容量大孔琼脂糖凝胶介质的制备方法
4、一种新琼四、六糖的制造方法
5、一种制造新琼八糖、新琼十糖和新琼十二糖的方法
6、油水两相法制备磁性琼脂糖凝胶微球的方法
琼脂有毒吗_苹果绿123
susantian20062021-08-04
琼脂条的用法?琼脂有毒吗?

琼脂糖凝胶电泳的时候不同的样品电流电压设置怎么设置呢?

电流电压设置值的依据是什么呢?如何确定电泳的电压电压值?

电泳仪是恒压还是恒流呢?设置电压和电流了,不应该功率就定了没,怎么还要设置功率?

跑电泳的时候起初电压还基本满足设定值,但是随后就一直降低,这是怎么回事?


区别是:
biowest agarose 指的是西班牙琼脂糖。
agarose指的是琼脂糖。
用琼脂在温度高于50℃时熔化、而低于此温度时则凝固的特性,将其溶于水后与微生物混合,然后冷却凝固或滴入非水相溶液中,从而制成固定化微生物。其特点是包埋微生物活性较高,制作较容易。缺点是氧和底物及产物的扩散受到限制,琼脂凝胶的机械强度较差,且成球受温度影响较大。  以琼脂为载体,建立包埋固定化微生物细胞的方法如下。  方法I  ①将琼脂加热溶于水,冷却至45—50℃;  ②使琼脂溶液与微生物细胞混合均匀,琼脂的最终浓度为3%;  ③将琼脂与微生物细胞的混合液倒入已灭菌的培养皿中,使之冷却凝固; ④将凝胶切成3mm×3mm×3mm的小方块,用生理盐水洗净,备用。  方法Ⅱ  ①将琼脂加热溶于水,冷却至45—50℃;  ②将琼脂溶液与微生物细胞混合均匀,琼脂的最终浓度为3%;  ③在常温条件下(45—50℃),将琼脂与微生物细胞混合物用针形管滴入上层是液体石蜡、下层是水的量筒中;  ④滤出固定化细胞颗粒,用生理盐水洗净,备用。  方法Ⅲ  ①将按方法Ⅱ制得的固定化细胞颗粒在下列溶液中浸泡30min;        ACAM 7.5%  BIS 0.4%        TEMED 0.5%  VC  2.0%  ②滤出固定化颗粒,加入到0.8%K2S2O4溶液中,在缓速搅拌下放置30min  ③滤出固定化颗粒,用生理盐水洗净,备用。‍

影响核酸电泳迁移率的几个因素

1、核酸分子大小

在一定浓度的琼脂糖凝胶中,DNA片段迁移距离和其含有的碱基对数量成反比,因此可以通过与标准条带迁移距离进行比较,由此得出目的条带的大小,但这仅对双链线性的DNA比较准确(DNAMarker一般为双链线状DNA),且对大于20kb的DNA不适用(普通琼脂糖凝胶很难将其分开)。

2、核酸分子构象

DNA分子在电场中的迁移速度不仅和分子量有关,还和它本身的构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中的移动速度不一样,移动速度次序为:共价闭环DNA>线性DNA>开环DNA。当琼脂糖浓度太大时,环状的DNA一般不能进入胶内(停留在孔中)。

3、琼脂糖浓度

同样的线状DNA分子在不同浓度的琼脂糖凝胶中的迁移速度不同,DNA电泳迁移率的对数和琼脂糖凝胶浓度呈线性关系,凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。

琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围

凝胶浓度(%)线性DNA长度(bp)

0.51000~30000

0.7800~12000

1.0500~10000

1.2400~7000

1.5200~3000

2.050~2000

4、电源电压

在低电压时,线状DNA片段的迁移速率和所加电压成正比。但电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分离率达到最大,所使用的电压不得超过5V/cm。

5、电泳方式

用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。垂直型电泳,一般用聚丙烯酰胺凝胶做为支撑物。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。

6、嵌入染料的存在

常用的荧光染料EB可以嵌入到堆积的碱基对之间,使其刚性更强,并使其迁移速率有所下降。

7、电泳缓冲液的离子强度

电泳缓冲液的组成和离子强度也能影响DNA的迁移速度。在离子存在很少的情况下(如无用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动;在高离子强度的缓冲液中(如误用10×电泳缓冲液),则电导率很高并产热明显,严重时能引起凝胶融化或DNA变性。

琼脂糖珠培养123
yinj8412021-08-02
有没有人听说过用琼脂糖珠技术做肿瘤细胞迁移实验?
琼脂糖凝胶电泳是常用的分离和检测方法,琼脂是最常用的载体支持物,核酸分子具有电荷效应和分子筛效应,利用此特性可达到分离检测的目的。
  一、琼脂糖凝胶的特点
  天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离效果。因此,目前多用琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳,其优点如下。
  1. 琼脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样品不需事先处理就可以进行电泳。
  2. 琼脂糖凝胶结构均匀,含水量大(约占98%~99%),近似自由电泳,样品扩散较自由电流,对样品吸附极微,因此电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好。
  3. 琼脂糖透明无紫外吸收,电泳过程和结果可直接用紫外光灯检测及定量测定。
  4. 电泳后区带易染色,样品极易洗脱,便于定量测定。制成干膜可长期保存。
  目前,常用琼脂糖作为电泳支持物,分离蛋白质和同工酶。将琼脂糖电泳与免疫化学相结合,发展成免疫电泳技术,能鉴别其他方法不能鉴别的复杂体系,由于建立了超微量技术,0.1ug蛋白质就可检出。
  琼脂糖凝胶电泳也常用于分离、鉴定核酸,如DNA鉴定,DNA限制性内切核酸酶图谱制作等。由于这种方法操作方便,设备简单,需样品量少,分辨能力高,已成为基因工程研究中常用实验方法之一。
  二、DNA的琼脂糖凝胶电泳
  琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用主要是依据它们的相对分子量质量及分子构型,同时与凝胶的浓度也有密切关系。
  1、核酸分子大小与琼脂糖浓度的关系
  ① DNA分子的大小 在凝胶中,DNA片段迁移距离(迁移率)与碱基对的对数成反比,因此通过已知大小的标准物移动的距离与未知片段的移动距离时行比较,便可测出未知片段的大小。但是当DNA分子大小超过20kb时,普通琼脂糖凝胶就很难将它们分开。此时电泳的迁移率不再依赖于分子大小,因此,就用琼脂糖凝胶电泳分离DNA时,分子大小不宜超过此值。
  ② 琼脂脂糖的浓度 如下表所示,不同大小的DNA需要用不同浓度的琼脂糖凝胶进行电泳分离。
  表 琼脂糖浓度与DNA分离范围琼脂糖浓度/%0.30.60.70.91.21.52.0线状DNA大小/kb60-520-110-0.87-0.56-0.44-0.23-0.1
  2、核酸构型与琼脂糖凝胶电泳分离的关系
  不同构型DNA的移动速度次序为:供价闭环DNA(covalently closed circular,cccDNA)>直线DNA>开环的双链环状DNA。当琼脂糖浓度太高时,环状DNA(一般为球形)不能进入胶中,相对迁移率为0(Rm=0),而同等大小的直线双链DNA(刚性棒状)则可以长轴方向前进(Rm>0),由此可见,这三种构型的相对迁移率主要取决于凝胶浓度,但同时,也受到电流强度、缓冲液离子强度等的影响。
  3、电泳方法
  ① 凝胶类型
  用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。
  ② 缓冲液系统
  缺少离子时,电流太小,DNA迁移慢;相反,高离子强度的缓冲液由于电流太大会大量产热,严重时,会造成胶熔化和DNA的变性。
  常用的电泳缓冲液有EDTA(pH8.0)和Tris-乙酸(TEA),Tris-硼酸(TBE)或Tris-磷酸(TPE)等,浓度约为50mmol/L(pH7.5~7.8)。电泳缓冲液一般都配制成浓的贮备液,临用时稀释到所需倍数。
  TAE缓冲能力较低,后两者有足够高的缓冲能力,因此更常用。TBE浓溶液长期贮存会出现沉淀,为避免此缺点,室温下贮存5×溶液,用时稀释10倍0.5×工作溶液即能提供足够缓冲能力。
  ③ 凝胶的制备
  以稀释的电极缓冲液为溶剂,用沸水浴或微波炉配制一定浓度的溶胶,灌入水平胶框或垂直胶膜,插入梳子,自然冷却。
  ④ 样品配制与加样
  DNA样品用适量Tris-EDTA缓冲液溶解,缓冲液内含有0.25%溴酚蓝或其他指示染料,含有10%-15%蔗糖或5%~10%甘油,以增加其比重,使样品集中。为避免蔗糖或甘油可能使电泳结果产生U形条带,可改用2.5%Ficoll(聚蔗糖)代替蔗糖或甘油。
  ⑤ 电泳
  琼脂糖凝胶分离大分子DNA实验条件的研究结果表明,在低浓度、低电压下,分离效果较好。在低电压条件下,线性DNA分子的电泳迁移率与所用的电压呈正比。但是,在电场强度增加时,较大的DNA片段迁移率的增加相对较小。因此随着电压的增高,电泳分辨率反而下降,为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率,电场强度不宜高于5V/cm。
  电泳系统的温度对于DNA在琼脂糖凝胶中的电泳行为没有显著的影响。通常在室温下进行电泳,只有当凝胶浓度低于0.5%时,为增加凝胶硬度,可在4℃进行电泳。
  ⑥ 染色和拍照
  常用荧光染料溴乙锭(EB)染色,在紫外光下观察DNA条带,用紫外分析仪拍照,或用凝胶成像系统输出照片,并进行有关的数据分析。
  注意事项:电泳中所使用的染料EB是致癌物质,一定要小心,避免其接触皮肤等,进行电泳操作的时候一定要带手套,手套要及时更换,现在也除了一些EB的替代物,如Goldview等。
准备干净的配胶板和电泳槽
注意DNA酶污染的仪器可能会降解DNA,造成条带信号弱、模糊甚至缺失的现象。 电泳洗脱法
低熔点琼脂糖凝胶电泳挖块法
冻融回收法
玻璃奶回收法
柱回收法 将电泳槽用ddH2O反复清洗干净,倒入新鲜配制的灭菌电泳缓冲液;
根据点样量制备合适厚度的琼脂糖凝胶板;
切胶时尽可能切掉不含DNA片段的凝胶;
要尽量减少DNA在紫外下的照射时间以减少对DNA的损伤;
熔胶要完全。向左转|向右转
25微升体系总是出现下面的状况,心好累,恳求指导