glucose
12C, 13C, 2H, 18O and mixed isotopes
Systematic Name: gluco-hexose
CAS Number: 50-99-7 (unlabeled D-glucose)
CAS Number: 921-60-8 (unlabeled L-glucose)
Molecular Formula: C6H12O6
NMR Spectrum (
): D-glucose,D-[1-13C]glucose
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|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 0.010g | 0.025g | 0.050g | 0.10g | 0.25g | 0.50g | 1.0g | |
| GLC-079 L-glucose | 75 | ||||||
| GLC-016 D-[1-12C]glucose | 250 | 420 | 695 | ||||
| GLC-017 D-[2-12C]glucose | 250 | 420 | 695 | ||||
| GLC-018 D-[1-13C]glucose | 90 | 150 | 235 | ||||
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| GLC-021 L-[2-13C]glucose | 175 | 305 | 540 | ||||
| GLC-022 D-[3-13C]glucose | 105 | 175 | 335 | 580 | 1050 | ||
| GLC-104 L-[3-13C]glucose | 235 | 445 | |||||
| GLC-023 D-[4-13C]glucose | 190 | 305 | 580 | 1030 | 1850 | ||
| GLC-024 D-[5-13C]glucose | 210 | 315 | 615 | 1090 | 1965 | ||
| GLC-025 D-[6-13C]glucose | 145 | 275 | 465 | 810 | |||
| GLC-026 D-[1,2-13C2]glucose | 145 | 260 | 445 | 755 | |||
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| GLC-027 D-[1,3-13C2]glucose | 665 | 1135 | 1965 | ||||
| GLC-148 D-[1,4-13C2]glucose | Request Price | ||||||
| GLC-028 D-[1,6-13C2]glucose | 175 | 280 | 605 | 975 | 1735 | ||
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| GLC-118 D-[2,5,6-13C3]glucose | Request Price | ||||||
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| GLC-039 D-[1-13C;2-2H]glucose | 190 | 290 | 580 | 1040 | 1850 | ||
| GLC-135 D-[1-13C;3-2H]glucose | Request Price | ||||||
| GLC-134 D-[2-13C;1-2H]glucose | 235 | 465 | 835 | 1390 | |||
| GLC-069 D-[2-13C;2-2H]glucose | 190 | 290 | 580 | 1040 | 1850 | ||
| GLC-136 D-[2-13C;3-2H]glucose | Request Price | ||||||
| GLC-040 D-[6-13C;6,6"-2H2]glucose | 165 | 260 | 500 | 835 | 1390 | ||
| GLC-041 D-[1,6-13C2;6,6"-2H2]glucose | 190 | 290 | 580 | 1040 | 1850 | ||
| GLC-125 D-[UL-13C6;UL-2H7]glucose | 120 | 235 | 420 | 770 | |||
| GLC-129 D-[1-13C;1,2-18O2]glucose | Request Price | ||||||
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请问各位大神,配制琼脂糖胶的电泳浓度是怎么设定,比如百分之1或百分之1.5的浓度是怎么设置,是1.5g的琼脂糖粉加100g的TAE麽?
影响核酸电泳迁移率的几个因素
1、核酸分子大小
在一定浓度的琼脂糖凝胶中,DNA片段迁移距离和其含有的碱基对数量成反比,因此可以通过与标准条带迁移距离进行比较,由此得出目的条带的大小,但这仅对双链线性的DNA比较准确(DNAMarker一般为双链线状DNA),且对大于20kb的DNA不适用(普通琼脂糖凝胶很难将其分开)。
2、核酸分子构象
DNA分子在电场中的迁移速度不仅和分子量有关,还和它本身的构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中的移动速度不一样,移动速度次序为:共价闭环DNA>线性DNA>开环DNA。当琼脂糖浓度太大时,环状的DNA一般不能进入胶内(停留在孔中)。
3、琼脂糖浓度
同样的线状DNA分子在不同浓度的琼脂糖凝胶中的迁移速度不同,DNA电泳迁移率的对数和琼脂糖凝胶浓度呈线性关系,凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。
琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围
凝胶浓度(%)线性DNA长度(bp)
0.51000~30000
0.7800~12000
1.0500~10000
1.2400~7000
1.5200~3000
2.050~2000
4、电源电压
在低电压时,线状DNA片段的迁移速率和所加电压成正比。但电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分离率达到最大,所使用的电压不得超过5V/cm。
5、电泳方式
用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。垂直型电泳,一般用聚丙烯酰胺凝胶做为支撑物。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。
6、嵌入染料的存在
常用的荧光染料EB可以嵌入到堆积的碱基对之间,使其刚性更强,并使其迁移速率有所下降。
7、电泳缓冲液的离子强度
电泳缓冲液的组成和离子强度也能影响DNA的迁移速度。在离子存在很少的情况下(如无用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动;在高离子强度的缓冲液中(如误用10×电泳缓冲液),则电导率很高并产热明显,严重时能引起凝胶融化或DNA变性。
溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。
注意DNA酶污染的仪器可能会降解DNA,造成条带信号弱、模糊甚至缺失的现象。 电泳洗脱法
低熔点琼脂糖凝胶电泳挖块法
冻融回收法
玻璃奶回收法
柱回收法 将电泳槽用ddH2O反复清洗干净,倒入新鲜配制的灭菌电泳缓冲液;
根据点样量制备合适厚度的琼脂糖凝胶板;
切胶时尽可能切掉不含DNA片段的凝胶;
要尽量减少DNA在紫外下的照射时间以减少对DNA的损伤;
熔胶要完全。向左转|向右转
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