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qdeev
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首先确定你所选的检测蛋白的状态,比如有无标签,如6*HIS等。选择一抗就根据检测蛋白的状态来选,如果有蛋白带标签,就选针对标签的抗体。如果没有标签,那么就要自己制备一抗。二抗的选择则主要根据一抗的来源来选择,如果一抗是鼠源的,二抗一般就选用羊抗鼠的就可以了。
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比如你要做检测A蛋白的western,首先要选择可以检测A蛋白的抗体,看其应用范围,要选择能做western的,因为有的检测A蛋白的抗体,可能是做荧光的或者是做免疫组化的等等。其次要确定你做western的样本种属,如果你检测的样本是大鼠的,那么你的一抗的反应种属当中,要包括大鼠。第三要根据你的一抗来源选择你的二抗,比如你的一抗选的是小鼠来源的抗体,你的二抗就要选择XX抗小鼠的,如果你的一抗选的是兔源性的抗体,二抗就选择XX抗兔的。
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