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美首次“功能性治愈”艾滋病婴儿

作者：陈丹来源：中国科技网

今日视点

美国约翰·霍普金斯儿童中心、密西西比大学医学中心和麻省大学医学院的研究人员3月3日在第20届逆转录病毒和机会性感染大会上报告说，他们首次实现了对一名感染艾滋病病毒（HIV）婴儿的“功能性治愈”。这项成果将有助于为根治儿童艾滋病病毒感染铺平道路。

“功能性治愈”艾滋病婴儿

据物理学家组织网报道，这名婴儿的母亲是位艾滋病病毒感染者，在他出生30小时后，医生便对其实施了抗逆转录病毒联合治疗。一系列测试表明，婴儿血液中的病毒在逐步减少，在他出生29天之后，病毒降低到了无法检测的水平。治疗一直持续到该婴儿18个月大时停止。10个月后，多次对其进行标准的血液检测，均没有发现血液中存在艾滋病病毒。HIV特异性抗体这一标准的HIV感染临床指标的测试结果也始终为负。

研究人员说，这名婴儿现在被视为“功能性治愈”，也就是说，无需终身用药，其体内的HIV感染已被完全控制，且标准的临床测试无法检测到血液中的HIV复制。但“功能性治愈”患者体内仍有少量病毒，可通过超灵敏方法识别出来，而与之相对而言的“根本性治愈”，则是指患者体内病毒已完全清除。

研究人员认为，可能是由于及时采用了抗病毒治疗，制止了病毒宿主的形成，该婴儿才得以治愈。病毒宿主指的是一种休眠细胞，其在大多数艾滋病患者停止治疗后短短数周内会再度引发感染，极难对付。

及早治疗是关键目前，为防止高风险新生儿感染HIV病毒，通常会对其施以为时6周的预防性剂量的多种抗病毒药物联合治疗；而一旦确诊感染，则改用治疗性剂量。但研究人员说，此次的特殊病例可能会改变目前的做法，因为它凸显了在极早期采用抗逆转录病毒疗法的治疗潜力。

“立即对新生儿采取抗病毒疗法，防止病毒的藏身之地在第一时间形成，由此可以帮助婴儿清除病毒，实现（对感染的）长期控制，而无需终身接受治疗。”该报告的主要作者、约翰·霍普金斯儿童中心的病毒学家德博拉·佩尔绍德说。

专家表示，不需要治疗、具有天然抑制艾滋病病毒的能力是极为罕见的，只在不到0.5%的成人艾滋病毒感染者身上观察到，他们被称为“精英控制者”，其免疫系统能抑制病毒的复制，使病毒数量保持在临床检测不到的水平。HIV专家一直在寻求一种方法，希望将所有的艾滋病患者转化为“精英控制者”，而这项最新成果有望改变局面。

“大规模地完全根除病毒是我们的长期目标，但就目前而言，这仍是遥不可及的，而对高风险新生儿实施积极、及时、准确、有针对性的抗病毒疗法，可能是我们实现功能性治愈的最佳机会。”麻省大学医学院免疫学家凯瑟琳·卢苏里亚加说。

研究人员同时提醒，他们还缺乏足够的数据，尚不能建议改变目前的做法，用治疗性剂量取代预防性剂量对高风险新生儿实施治疗，不过，这名“功能性治愈”婴儿的例子为开展原理验证研究提供了理论基础。

佩尔绍德说：“下一步是要证实，这究竟是对极早期抗逆转录病毒治疗的一个极不寻常的反应，还是一种同样可适用于其他高风险新生儿的方法。”

凤凰网：华北制药重组人源抗狂犬病毒抗体成功售价降三分之二
2012-07-20
狂犬病，以100%的病死率令人谈之色变。如今，随着华北制药重组人源抗狂犬病毒抗体的研制成功，狂犬病的高发状况将得到有效缓解。

基因序列全部来源于人，依靠基因重组技术生产，抗体注入人体后有效降低排异反应，达到应急预防目的，弥补了被狗咬伤与注射狂犬疫苗后产生主动性抗体之间时段无抗体的空白。由世界500强企业冀中能源[15.08
-2.46%股吧
研报]集团旗下华北制药抗体药物研制国家重点实验室主导，我国第一个拥有自主知识产权的重组人源抗狂犬病毒抗体，已经获得国家药监局临床批文并顺利进入临床研究阶段。

“基因重组人源抗体这一**性的技术突破，将使成功防治病毒性和细菌性感染疾病成为可能。”冀中能源集团董事长、党委书记，华北制药集团董事长、党委书记王社平颇感自豪地讲到：“我们科技创新正由投入驱动向创新驱动转变，正以自主研发的技术平台体系，为华药产业升级、迈向高端提供重要科技支撑和强有力推动。”

从人血清到重组人源抗体消除人体免疫系统的排异反应，最大限度地提高药效，用药量仅为原来的千分之一重组人源抗体一直是我国抗体技术攻关的主要方向。目前，就狂犬病而言，常用的抗狂犬病毒抗体是来源于人血的抗狂犬病毒血清，从人血浆中提取制备，不但存在异源蛋白的免疫反应，而且市场供应量受血浆来源限制，并具有潜在血源污染等问题，严重影响了狂犬病的防治需求。而重组人源抗体的基因序列全部来源于人体，可以最大程度消除人体免疫系统对异源性蛋白的排异反应。根据狂犬病控制联盟和美国疾病控制与预防中心报告，全球每年因狂犬病死亡的人数高达5.5万人，即平均每10分钟有1人死于狂犬病。我国属于狂犬病的高发国家之一，近十年来每年病例数在2000-3000例，仅次于印度，居世界第二。按照标准的免疫程序(五针)注射狂犬疫苗后，80%的人群在14天左右才能产生足够量的抗体抵制狂犬病毒的侵袭，还有20%左右的人群即便打过疫苗也无法产生抗体。据悉，在主动免疫抗体产生的空当，病毒会以每小时5毫米的速度向中枢神经转移，一旦进入脑部就会最终致人发病死亡，这对于头面部、颈部或手部多处被狗咬伤的严重病人及儿童更具有杀伤力。因此，在人体没有建立起自身抗体防御系统之前，寻找到一种能马上起效且作用强大的被动性外源抗体，阻断狂犬病毒感染尤显得尤为重要。但是，由于血源来源量的限制，目前市场上抗狂犬病毒免疫球蛋白药物不能大量生产，不足50万人份的市场供应量，远远不能满足每年800万人份的需求。而且使用这种抗体，以一个60公斤的成年人计算，一次注射至少要1500元，价格比较昂贵。这些制约因素，使重组人源抗体的研发显得更为迫切。华北制药从2003年进入重组人源抗体研究领域到如今重组人源抗狂犬病毒抗体的成功研制，打破了少数国家的封锁和垄断，使我国在这一技术上达到国际领先水平。“重组人源抗体基因序列全部来源于人，就像给抗体装上了一把****，很容易获取人体的信任，与病毒主动结合，诱导我们的免疫系统把这些外来侵略者杀掉。”华北制药抗体药物研制国家重点实验室主任高健尽可能浅显地解释这项新技术：重组人源抗体的结构和人自身的抗体结构一模一样，从而能消除人体免疫系统的排异反应，最大限度地提高药效。“原来需要注射1g血源抗狂犬病免疫球蛋白，现在1mg重组人源抗狂犬病毒抗体就已足够，剂量是原来的千分之一。”

生产老百姓用得起的抗体售价可降低三分之二，带来上亿元效益“我们要生产中国老百姓都用得起的抗体”。高健称，狂犬抗体用重组方式生产将不再需要从人血中提取，从而解决了血源来源稀少的问题，价格也大幅度降低，使大批量生产成为可能。“可别小看这小小一支药，投产后初期产量预计100万人份，每人份售价即使按血源免疫球蛋白制品售价三分之一计算，每年就将给华药带来上亿元实实在在的效益。”华北制药新药研发公司总经理段宝玲说，我们希望通过重组人源抗狂犬病毒抗体的研制带动华药产业升级。技术虽然得到突破，但生产工艺一直受制于人。“如今我们在新型生物反应器技术研发上已有很大进展，正在代替过去的细胞转瓶生产工艺。”高健解释，以前疫苗生产过程中需要集中许多小转瓶培养细胞，而现在，一个50升的反应器就可以替代上千个转瓶的工作量，不仅提高了产品质量的均一性，而且能大幅提高生产能力，降低综合成本。“该技术已在多个疫苗产品的生产中进行了应用试验，成熟后可以实现国产化替代，为新抗体的大批量生产提供保障。”“重组人源抗狂犬病毒抗体的研发成功，将打开一个更广阔的产业空间，可以促进其他蛋白药物的研制及后续新抗体药物的研发。”高健透露，重组全人源抗体技术的突破将为病毒感染类疾病提供**性的治疗手段。“这有利于引领国内生物制药的技术升级与改造，实现我国在抗体药物开发技术领域的跨越式发展，改变我国生物技术药物低水平重复的局面。”创新没有终点，目前在华药抗体药物研制国家重点实验室，识别病毒能力更强的狂犬病毒抗体第二代产品正在紧张地研发中。

(凤凰网2012年7月20日）

在单克隆抗体制备过程中，多种抗体都是针对同一个抗原的，应该都能识别的啊，阳性是指识别达到一定的量吗，还是其他的抗体一点都不能识别了？

过期了最好不好用，方便的话可以和效期内的比较一下，效果不影响还是可以用的，华雅干细胞biogems流式抗体品质齐全，可进一步查询；

我按照以下步骤操作：测定P选择素1、静脉血枸橼酸钠抗凝2管各5l，一管+IgG1PE5L+CD41APC5L另一管+CD62PE5l+CD41APC5l放暗室处20min，+0.5mlPBS流式检验可是测得结果非常低（比如同型对照是0.8，测定管就只有0.9左右）注：用的是冠心病患者的血标本并...

内个，个人觉得比较价格还是很有说服力的，一分价钱一分货。
虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体，但是如果希望抗体特异性好点，能检测丰度低的蛋白，还是选Abcam吧，Santa有时候全凭人品了，内参抗体什么的还能凑活，其他的比较勉强。

抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。一般而言，抗体按靶位点不同主要分为单克隆抗体和多克隆抗体 ，由多个B淋巴细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体 。

抗原有两个基本特性，即抗原性和免疫原性。有抗原性的物质不一定有免疫原性，所以由此引出半抗原和完全全抗原，半抗原必须经过经过一定的改造（偶联蛋白载体BSA，OVA或者HSA等大分子物质）方能成为完全。一般而言完全抗原分子量越大（大于10KDa），结构越复杂引起免疫反应的能力也就越强。
抗体就是能与特异性抗原结合的免疫球蛋白，抗体一般分为多克隆抗体和单克隆抗体，多克隆抗体能与抗原的多个表位结合。本篇主要讲述兔来源的多克隆抗体的生产步骤

多抗一般制备流程：完全抗原的准备→兔子的免疫→ 效价检测和终放→抗体亲和纯化→抗体的浓缩和保存。

最近打算做CoIP，但是有一个蛋白没有抗体，实验室想制备一个。不知道对于CoIP来说，多克隆抗体行吗？还是要单克隆抗体？

这个荧光燃料不一样，他们相应的激发光和发射光波长有区别，华雅干细胞含有biogems所有流式抗体，类型丰富，需要相关产品可以进一步访问；

标签抗体，别名为抗原表位，又称抗原决定簇，是抗原分子中决定抗原特异性的特殊区域或基团，是与抗体特异性结合的结构或序列。向左转|向右转

RT-PCRWestern blotELISA三者区别 PCR转录水平检测目基,非蛋白,转录翻译复杂程,基表达量与蛋白表达量定相关. WB能半定量,检测细胞膜蛋白,点ELISA做 ELISA用定量检测蛋白,说观察同浓度刺激物目蛋白影响 基翻译蛋白质, PCR检测基表达量绝定量相定量基翻译表达蛋白质复杂程能现基量蛋白质少或者相反甚至其情况所PCR基层面DNA或mRNA进行检测 Western Blot目前种结合内参蛋白质进行半定量Elisa定量检测某些蛋白、激素等 、目 虽两者都通抗原抗体反应蛋白质进行检测WB主要定性Elisa定性定量 WB所检测般抗原Elisa抗原抗体都检测 WB所检测抗原知道其量或否聚体、降解产物等句WB确定所用抗体与种蛋白起作用；Elisa能力锅端 二、模式 WB（抗原-抗体-二抗酶）模式进行检测；Elisa模式种（抗原-抗体-二抗酶）、（抗原-抗体-抗原酶）、（抗抗体-抗体-抗原酶）、（抗体-抗原-抗体酶）、（抗抗体-抗体-抗原-抗体酶）等等 三、抗体适用性 WB所适用抗般线性位点ELISA线性或构象型抗体都使用另意义讲WB做抗体线性位点构象型位点补充判定Elisa行 四、灵敏度 般Elisa灵敏度要远高于WB般酶标记物使用浓度或待检品稀释度看 五、操作性 WB处理量块胶版10-20品Elisa块96孔板处理96本设置复孔、照、梯度等提高检测信度 WB操作见非特异性条带膜本底差显色等等缺点Elisa表现要 六、商品化度 WB管都要自先做电泳Elisa熟商品化试剂盒要怕花钱检测要便快展开

当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H)，或者核纤层蛋白(nuclear lamina protein)等为核内参抗体。除了这些，其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B
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