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Ancell/anti-CD32/100 g/181-520
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Ancell/anti-CD32/100 g/181-520
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Ancell
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181-520
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Human CD32 exists in at least six isoforms originating from three different genes (Fc gamma RII A, B, and C) . The CD32 molecule is a low affinity receptor for immune complexed IgG and has signal-transducing capabilities involved with humoral and cell-mediated immune responses.

Isotype: Murine IgG1k

Immunogen: Human K562 tumor cells and L cells transfected with human Fc gamma RII

Specificity: Antibody 7.3 reacts with a domain 2 epitope of all CD32 isoforms (1). It exhibits preferential binding to Fc gRIIb (inhibitory) isoform transfectants(2, 5).

Functional Application: Intact and F(ab‘)2 7.3 antibody blocks immune complex binding (4). Incubation with anti-CD32 F(ab‘)2 inhibits Fibrocyte differentiation(6), and inhibits pro inflammatory cytokine secretion by SLE patient derived monocytes (7).

References:

1. Leukocyte Typing V (S.F. Schlossman, et al, eds.) Oxford University Press, Oxford (1995) p. 823-836.

2. Liu Y, L Pricop, et al. (2005) J Leukocyte Biol 77: 767-776 PMID:15703199

3. S. von Gunten, H.U. Simon, et al. (2006) Blood 108(13): 4255-425

4. Laborde EA, M Vulcano, et al. (2007) J Immunol 179(1): 673-681.

5. Ierino FL, P M Hogarth, et al. (1993) JImmunol 150(5):1794-1803.

6. Pilling D, NM Tucker, RH Gomer (2006) J Leuk Biol 79(6): 1242-1251.

7. Thanei S, M Trendelenburg (2016) J Immunology 196: 2063–2074. PMID: 26829984

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荧光素眼底血管制影是20世纪60年代兴起的眼科检查手段。利用荧光素钠做为制影剂畴前臂静脉快速注入,当荧光素钠随血流进入眼底血管时,通过一组滤色片的眼底摄影机,持续拍摄眼底血管外染料轮回时接收激发光线发射出的荧光形态,以察看视网膜动态轮回的过程,从而得以体会眼底血管的微细结... 查看更多>
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荧光抗体技术 123
柯嘀552021-07-28
荧光抗体技术荧光素操作过程为何要避光
免疫组化及特殊染色 是啥意思?123
玛丽隔壁URwj52018-02-18
是免疫组化。
免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体(或抗原)以化学的方法结合,将荧光标记抗体(或抗原)与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物,用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在,根据已 知的抗体(或抗原)即可推知另一个未知抗原(或抗体)的存在。直接免疫荧光法 直接免疫荧光法是利用荧光色素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合,以鉴定未知抗原。本法具有操作简单、时程短、特异性高的优点,但也 存在缺点如不能检查抗体,敏感性较差。(1)在标本上滴加荧光素标记抗体,放入湿盒中。37℃温育30min。 (2)PBS 冲洗后,再用PBS分三缸浸泡,每缸3min。(3)PBS浸泡1~2min,风干。(4)缓冲甘油封片。在荧光显微镜下观察。进行直接免疫荧光法时应注意:①温育时一定要将玻片放在湿盒中,以防液体蒸发。②用PBS浸泡时应不断振荡。2. 间接免疫荧光法 间接免疫荧光法以荧光素标记抗球蛋白抗体,抗体与相应抗原结合后,荧光标记的抗球蛋白抗体与已结合的抗体发生作用,从而推知抗原或抗体的 存在。间接荧光技术可以用已知的抗原检测未知的抗体,也可用已知的抗体测出未知抗原。现以检测流行性热病毒抗体(IgM)为例介绍如下:(1)将待测病人血清加至抗原片(流行性热病毒感染的Vero-E6细胞片)上,每个稀释 度加2孔,最后2孔加PBS做对照。将玻片放置湿盒中,37℃温育 60min。取出玻片,弃去反应液,用PBS洗涤5min,风干。(2)加入1∶40稀释的FITC标记的羊抗人IgM,37℃温育60min。取出玻片,按步骤2洗涤,风干。(3)PBS甘油封片,荧光显微镜下观察。阳性结果:在细胞膜及细胞质中可见颗粒状荧光颗粒,细胞核 呈红色。注意事项:温育时将玻片放在湿盒中,以防液体蒸发。选择低温、干燥、洁净的环境风干。
二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如western blot(通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),ELISA(以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号大大增强,提高了实验灵敏度。
二抗可以耦联有几种不同的标记,可以是酶,荧光素,或生物素。
荧光素
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荧光素(英语:Fluorescein,又称为荧光黄)是一种合成有机化合物,外观为暗橙色/红色粉末,可溶于乙醇,微溶于水。在蓝光或紫外线照射下,发出绿色荧光。在多种应用(如荧光抗体技术)中被广泛用作为荧光示踪物。桔黄色或淡黄红色至红色粉末,加热时成晶体,它的碱金属盐溶于水,荧光很强。用作沉淀滴定的吸附指示液。[1]
中文名
荧光素
英文名
Fluorescence
别称
荧光黄;荧光红;荧光橙;酸性黄73[2]
化学式
C20H12O5
分子量
334.31[1]
CAS登录号
2321-07-5
EINECS登录号
219-031-8
熔点
125-127℃[1]
水溶性
稍溶于水
外观
桔黄色或淡黄红色至红色粉末
应用
吸附指示液
安全性描述
S22-24/25-37/39-26-36/37/39-27[3]
危险性符号
Xi[3]
危险性描述
R43-36-36/37/38[3]
目录
1 基本信息
2 理化特性
3 毒理学数据
▪ 急性毒性
▪ 致突变性
4 编号系统
5 性状描述
6 用途说明
7 合成方法
8 贮藏方法

基本信息
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中文名:荧光素
英文名:Fluorescein
中文别名:荧光素;荧光红;荧光黄;荧光橙;酸性黄73;2-(6-羟基-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸
英文别名:Fluorescein;2-(6-Hydroxy-3-oxo-(3H)-xanthen-9-yl)benzoic acid;Acid Yellow 73

理化特性
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外观:桔黄色或淡黄红色至红色结晶性粉末。
气味:无气味
熔点/凝固点(℃):125-127℃(dec.)
沸点、初沸点、沸程(℃):620.8℃/760mmHg
溶解性:溶于丙酮、吡啶、热乙醇、甲醇、甲酸、碳酸碱和氢氧化碱溶液,并显亮绿色荧光;稍溶于水、醇、醚、苯、氯仿、乙酸、二甲苯、硝基苯,不溶于石油醚。[2]

毒理学数据
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急性毒性
大鼠腹腔LDLo: 600 mg/kg
小鼠静脉LC50:300 mg/kg
小鼠LCLo:600 mg/kg
兔子静脉LDLo;300 mg/kg
豚鼠LDLo;400 mg/kg。[4]

致突变性
DNA加合物检测系统:细菌—大肠杆菌:15umol/L

编号系统
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CAS号:2321-07-5
MDL号:MFCD00005050
EINECS号:219-031-8
RTECS号:LM5075000
BRN号:94324
PubChem号:24859566[4]

性状描述
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与碳酸钠(钾)、氢氧化钠(钾)等强碱反应生成荧光素钠(钾),易溶于水,并有强烈绿色荧光,荧光量子产率0.65(pH=7水溶液)。[1]

用途说明
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1.沉淀滴定的吸附指示剂:
配成0.1%的乙醇溶液,或用其钠盐配成1%的水溶液。用Ag+滴定Cl-、Br-、I-、SCN-、CN-、C2O42-、SO42-、CO32-等,在中性或弱碱性介质中,滴定终点颜色由黄绿变为玫瑰红色。[1]
2. 荧光素是发光物质的基质。使许多生物具有荧光的物质。它与ATP形成复合物(荧光素腺苷),然后再与荧光素酶(1uciferase)结合。氧化过程中激活的荧光素发光。整个反应用作活的生物的检出或对很低程度的细菌污染作定量分析。例如用荧光光度计计量。[4]
3.用作化学分析的指示剂、生物染色剂和化妆品着色剂。
4.防冻液重要的颜料,可使防冻液呈现出绿色荧光。

合成方法
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将间苯二酚加热至150℃,使之全部熔融,边搅拌边加入理论量的邻苯二甲酸酐,混匀并熔融后升温至185℃,保温半小时,然后慢慢加入适量新焙烧的无水氯化锌,当完全溶解后,逐渐升温至210~215℃,整个过程均需不停地搅拌,当反应液开始变稠时,停止搅拌,继续在此温度下加热至完全固化,研碎后得粉状粗品。将粉状粗品与稀盐酸混合加热煮沸,以浸出氯化锌和剩余的间苯二酚,抽滤后水洗、干燥,再用乙醇提取,晾干后即得红色固体荧光素。[4]

贮藏方法
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避免氧化物接触,保持容器密封,放入紧密的储藏器内,储存在阴凉,干燥的地方。[4]

细胞生物学技术
离心管和瓶 贝克曼库尔特123
情思如梦菃l2018-01-29
将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。向左转|向右转
荧光素标记抗体实验f/p值变
SPSS软件统计结管归析其析都看SIGSIG=significance意显著性面值统计P值P值0.01<P<0.05,则差异显著P<0.01,则差异极显著
F值差检验量整模型整体检验看拟合程没意义
t值每自变量(logistic归)逐检验看beta值β即归系数没意义
T数值表示归参数显著性检验值绝值于等于ta/2(n-k)(值表示根据置信水平自由度数值)拒绝原假设即认其解释变量变情况解释变量X解释变量Y影响显著
F值归程显著性检验表示模型解释变量与所解释变量间线性关系总体否显著做推断若F>Fa(k-1,n-k),则拒绝原假设即认列入模型各解释变量联合起解释变量显著影响反则显著影响
荧光素本品为诊断用药,是一种染料,对正常角膜等上皮不能染色,但能对损伤的角膜上皮染成绿色,从而可显示出角膜损伤、溃疡等病变。本品流经小血管时,能在紫外线或蓝色光激发下透过较薄的血管壁和黏膜呈现绿色荧光,从而显示小血管行经和形态等,据此可供眼底血管造影和循环时间测定。本品几乎不能透过血脑屏障,但在结核性脑膜炎时脑脊液内含量有所增加,肌内注射后测定脑脊液内本品含量有助于对结核性脑膜炎的诊断和鉴别诊断。供诊断眼角膜损伤、溃疡和异物,眼底血管造影和循环时间测定。也用于术中显示胆囊和胆管,以及结核性脑膜炎的辅助诊断等。"一滴8块钱!还要交检查费!"这是医院的价格规定的。不过说来也是比较贵,只要身体健康,钱财乃身外物。
在检查软组织肿瘤的时候需要做免疫组化,来确定病因。免疫组化介绍:免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。基本原理:抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先把组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法把抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究。分类:这些常用免疫组织化学方法的原理如下:
1. 免疫荧光细胞化学技术把已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量。2. 免疫酶细胞化学技术是目前免疫组织化学研究中最常用的技术.基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。3.免疫胶体金技术就是用胶体金标记一抗,二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性,定位或定量研究.由于胶体金的电子密度高,多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究。
免疫组化分类组合123
众神拜大婶7772021-08-01
免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。
这些常用免疫组织化学方法的原理如下:
1. 免疫荧光细胞化学技术
将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量.
2. 免疫酶细胞化学技术
是目前免疫组织化学研究中最常用的技术.基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究.
3. 免疫胶体金技术
就是用胶体金标记一抗,二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性,定位或定量研究.由于胶体金的电子密度高,多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究.向左转|向右转
免疫组化,是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
1、一般事项:有过敏或支气管哮喘史的患者使用本品时应特别注意。使用时应备有急救用品,包括静脉或肌肉注射用的0.1%肾上腺素、抗组胺药、皮质炎固醇注射液,静脉注射用的氨茶碱,以及供氧设施,以备注射荧光素钠后发生反应时用。患者须知:使用本品后皮肤会暂时发黄,尿液也呈鲜黄色。皮肤发黄可在6至12个小时后消退,尿液中荧光素在24至36小时后恢复正常。2、切勿※内注射。仅供眼科使用。静脉注射时应避免药液外渗,防止因荧光素溶液碱性高造成局部组织的严重损伤。荧光素溶液外渗可发生如下并发症:皮肤坏死脱落、浅层静脉炎、皮下肉芽肿、肘前区域的中毒性神经炎。因荧光素溶液外渗所致的并发症会引起手臂长达数小时的剧烈疼痛。如果出现明显的药液外渗情况,应及时停止注射。采取措施治疗损伤组织,解除疼痛。不要在注射器内与其他溶液或药物混合或稀释。已有极少数患者因过敏反应致死的报告。向左转|向右转
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