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Hot-Taq polymerase5u/㎕, 50u/㎕
- Chemically modified Taq DNA polymerase
- Automatic hot-start PCR enzyme
- Convenience of reactions set up at room temperature
- The highest specificity of PCR amplification
- Enzyme for real-time PCR and multiplex PCR
- Enzyme for high [GC] target amplification
Products
| Cat.No. | Product | Feature | Size |
|---|---|---|---|
| BHT5 | Hot-Taq polymerase | 5 u/㎕ | Custom |
| BHT50 | Hot-Taq polymerase | 50 u/㎕ | Custom |
- Description
- Data
- Specification
- Documents
Hot-Taq polymerase is a chemically-modified form of purified Taq DNA polymerase and quite suitable for high-specific hot-start PCR, real-time PCR and multiplex PCR. The 10x reaction buffer supplied together contains pH-buffering agent, salts, magnesium, and dNTPs.
Application
- Hot-start PCR
- Multiplex PCR
- Real-time PCR
- High specific and sensitive PCR
- Amplification of complex DNA and cDNA
- PCR for molecular diagnostics
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2021-09-03
上海研生实业有限公司所提供的Anti-TGF-β1/FITC 荧光素标记TGF-β1抗体IgG（标记抗体）质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2018-06-06
nanocs pierce pllabs 活动产品 研选 大图 列表 Fluoresceinamine Isomer I是荧光素分子的合成原料。 品牌:medchemexpress(MCE) | 技术资料:0 篇 美国... 查看更多
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2018-04-17
上海研生实业有限公司所提供的Anti-CD133 antigen/RBITC 红色荧光素罗丹明（RBITC）标记CD133抗体质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2018-04-20
上海研生实业有限公司所提供的Anti-Dnmt1/FITC 荧光素标记DNA甲基转移酶1抗体IgG质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2021-09-02
上海研生实业有限公司所提供的Anti-TGF-β1/FITC 荧光素标记TGF-β1抗体IgG（标记抗体）质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2021-07-16
荧光素（英语：Fluorescein，又称为荧光黄）是一种合成有机化合物，外观为暗橙色/红色粉末，可溶于乙醇，微溶于水。在蓝光或紫外线照射下，发出绿色荧光。在多种应用（如荧光抗体技术）中被广泛用作为荧光示踪物。桔黄色或淡黄红色至红色粉末，加热时成晶体，它的碱金属盐溶于水，荧光很强。... 查看更多
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2021-07-18
上海研生实业有限公司所提供的Anti-Bcl-2 protein/FITC 荧光素标记 Bcl-2 蛋白抗体IgG质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2018-04-12
上海研生实业有限公司所提供的Anti-ADM R/FITC 荧光素标记肾上腺髓质素受体抗体IgG质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2021-07-22
上海研生实业有限公司所提供的Anti-HSP-70/FITC 荧光素标记HSP-70蛋白抗体IgG质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2021-07-20
上海研生实业有限公司所提供的Anti-CD44/FITC 荧光素标记CD44抗体IgG质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2018-06-12
Catalog Number: 30005-1 (100 assays) 30005-2 ( 1000 assays) Contact Information Address: Biotium, Inc. 3159 Corporate Place Hayward, CA 9454... 查看更多
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2021-08-03
上海研生实业有限公司所提供的Anti-Adipo R1/FITC 荧光素标记脂联素受体-1蛋白抗体IgG质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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美国全球首例老虎新冠病毒阳性,家猫成隐忧?美国政府与OraSure合作...123
张起灵14302021-07-25
cd133，sox2荧光抗体所标记的荧光素是什么
CD133抗原为5次跨膜( 5_transmembrane, 5_TM )糖蛋白。
CD133抗原可被3种CD133抗体识别：克隆AC133、293C3和AC141。AC133直接与CD133/1糖基化抗原表位结合，可用于从外周血、骨髓、脐带血及其它组织中分析和分选CD133+细胞。
多数情况下CD133/1和CD133/2识别同种细胞，只是有表达强度的差别，但是在骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）和某些急性髓性白血病中发现CD133/1和CD133/2表达不同，或者正常表达强度紊乱。
CD133抗原为5次跨膜( 5_transmembrane, 5_TM )糖蛋白。
CD133抗原可被3种CD133抗体识别：克隆AC133、293C3和AC141。AC133直接与CD133/1糖基化抗原表位结合，可用于从外周血、骨髓、脐带血及其它组织中分析和分选CD133+细胞。
多数情况下CD133/1和CD133/2识别同种细胞，只是有表达强度的差别，但是在骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome，MDS）和某些急性髓性白血病中发现CD133/1和CD133/2表达不同，或者正常表达强度紊乱。
荧光素FITC标记抗体的方法 实验方法123
恶灵退散OF30D2018-01-14
免疫荧光技术是将荧光素如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)与相应抗体（或抗原）以化学的方法结合，将荧光标记抗体（或抗原）与标本中相应的抗原结合形成荧光标记的抗体- 抗原复合物，用荧光显微镜观察。在镜下见到有荧光存在即推断有抗原抗体复合物的存在，根据已 知的抗体（或抗原）即可推知另一个未知抗原（或抗体）的存在。直接免疫荧光法 直接免疫荧光法是利用荧光色素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合，以鉴定未知抗原。本法具有操作简单、时程短、特异性高的优点，但也 存在缺点如不能检查抗体，敏感性较差。（1）在标本上滴加荧光素标记抗体，放入湿盒中。37℃温育30min。 （2）PBS 冲洗后，再用PBS分三缸浸泡，每缸3min。（3）PBS浸泡1～2min，风干。（4）缓冲甘油封片。在荧光显微镜下观察。进行直接免疫荧光法时应注意：①温育时一定要将玻片放在湿盒中，以防液体蒸发。②用PBS浸泡时应不断振荡。2. 间接免疫荧光法 间接免疫荧光法以荧光素标记抗球蛋白抗体，抗体与相应抗原结合后，荧光标记的抗球蛋白抗体与已结合的抗体发生作用，从而推知抗原或抗体的 存在。间接荧光技术可以用已知的抗原检测未知的抗体，也可用已知的抗体测出未知抗原。现以检测流行性热病毒抗体（IgM）为例介绍如下：（1）将待测病人血清加至抗原片（流行性热病毒感染的Vero-E6细胞片）上，每个稀释 度加2孔，最后2孔加PBS做对照。将玻片放置湿盒中，37℃温育 60min。取出玻片，弃去反应液，用PBS洗涤5min，风干。（2）加入1∶40稀释的FITC标记的羊抗人IgM，37℃温育60min。取出玻片，按步骤2洗涤，风干。（3）PBS甘油封片，荧光显微镜下观察。阳性结果：在细胞膜及细胞质中可见颗粒状荧光颗粒，细胞核 呈红色。注意事项：温育时将玻片放在湿盒中，以防液体蒸发。选择低温、干燥、洁净的环境风干。
病理报告中免疫组化是什么意思123
amdf735902018-01-29
免疫组化是一种检查方法，免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
思路迪招聘小分子项目总监职位城际分类123
血狺CHyy2021-08-05
本数据来源于百度地图，最终结果以百度地图最新数据为准。以下是几种常用的免疫学技术：1．免疫荧光技术免疫荧光技术是利用荧光素标记的抗体（或抗原）检测组织、细胞或血清中的相应抗原（或抗体）的方法.由于荧光抗体具有安全、灵敏的特点,因此已广泛应用在免疫荧光检测和流式细胞计数领域.根据荧光素标记的方式不同,可分为直标荧光抗体和间标荧光抗体.间标荧光抗体中一抗并不直接连接荧光素,而是先将一抗结合到蛋白,然后带有荧光素的二抗再结合至一抗.通过二抗的结合,能将信号进行放大,因此能在一定程度上提高检测的灵敏度,但是随之带来的高背景也降低了检测的特异性.近年来,随着荧光素和荧光检测技术的不断进步,荧光检测的灵敏度已经接近同位素检测的水平,直接标记的荧光抗体逐渐取代间接标记抗体.这些标记了荧光素的抗体直接结合至抗原,大大提高了检测的特异性,使检测的结果更加准确可靠.荧光检测技术的发展,使得免疫荧光技术在传染病诊断上有广泛的用途,如在细菌、病毒、螺旋体感染的疾病,检查IgM抗体,做为近期接触抗原的标志.利用单克隆荧光直接标记抗体鉴定淋巴细胞的亚类.通过流式细胞仪,针对细胞表面不同抗原,可以同时使用多种不同的荧光抗体,对同一细胞进行多标记染色.
2．放射免疫检测放射免疫检测技术是目前灵敏度最高的检测技术,利用放射性同素标记抗原（或抗体）,与相应抗体（或抗原）结合后,通过测定抗原抗体结合物的放射性检测结果.放射性同位素具有pg级的灵敏度,且利用反复曝光的方法可对痕量物质进行定量检测.但放射性同位素对人体的损伤也限制了该方法的使用.
3．酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫检测是目前应用最广泛的免疫检测方法.该方法是将二抗标记上酶,抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的作用结合起来,根据酶作用底物后的显色颜色变化来判断试验结果,其敏感度可达ng水平.常见用于标记的酶有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶（AP）等.由于酶联免疫法无需特殊的仪器,检测简单,因此被广泛应用于疾病检测.常用的方法有间接法、夹心法以及BAS－ELISA.间接法是先将待测的蛋白抱被在孔板内,然后依次加入一抗、标记了酶的二抗和底物显色,通过仪器（例如酶标仪）定量检测抗原.这种方法操作简单但由于高背景而特异性较差.目前已逐渐被夹心法取代.夹心法利用二种一抗对目标抗原进行捕获和固定,在确保灵敏度的同时大大提高了反应的特异性.近年来,抗原的定量检测技术也不断推陈出新.近年来,在夹心法ELISA的基础上,开发了多抗原检测试剂盒,能同时检测微量液相样本中多个抗原含量.这项技术的应用大大缩短了诊断的时间,提高诊断的可靠性和及时性.
4．免疫金胶体技术胶体金技术经过30多年的发展到现在已日趋成熟,该方法是将二抗标记上胶体金颗粒,利用抗原抗体间的特异性反应,最终将胶体金标记的二抗吸附于渗滤膜上,此方法简单,快速,广泛应用于临床筛查.
2．放射免疫检测放射免疫检测技术是目前灵敏度最高的检测技术,利用放射性同素标记抗原（或抗体）,与相应抗体（或抗原）结合后,通过测定抗原抗体结合物的放射性检测结果.放射性同位素具有pg级的灵敏度,且利用反复曝光的方法可对痕量物质进行定量检测.但放射性同位素对人体的损伤也限制了该方法的使用.
3．酶联免疫吸附试验（ELISA）酶联免疫检测是目前应用最广泛的免疫检测方法.该方法是将二抗标记上酶,抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的作用结合起来,根据酶作用底物后的显色颜色变化来判断试验结果,其敏感度可达ng水平.常见用于标记的酶有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶（AP）等.由于酶联免疫法无需特殊的仪器,检测简单,因此被广泛应用于疾病检测.常用的方法有间接法、夹心法以及BAS－ELISA.间接法是先将待测的蛋白抱被在孔板内,然后依次加入一抗、标记了酶的二抗和底物显色,通过仪器（例如酶标仪）定量检测抗原.这种方法操作简单但由于高背景而特异性较差.目前已逐渐被夹心法取代.夹心法利用二种一抗对目标抗原进行捕获和固定,在确保灵敏度的同时大大提高了反应的特异性.近年来,抗原的定量检测技术也不断推陈出新.近年来,在夹心法ELISA的基础上,开发了多抗原检测试剂盒,能同时检测微量液相样本中多个抗原含量.这项技术的应用大大缩短了诊断的时间,提高诊断的可靠性和及时性.
4．免疫金胶体技术胶体金技术经过30多年的发展到现在已日趋成熟,该方法是将二抗标记上胶体金颗粒,利用抗原抗体间的特异性反应,最终将胶体金标记的二抗吸附于渗滤膜上,此方法简单,快速,广泛应用于临床筛查.
HRPStreptavidin(辣根过氧化物酶标记链霉亲和素)品牌:bersee博尔西中国...123
dksfmt2021-07-21
二抗：二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体，上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛，如western blot（通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质），ELISA（以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质，尤其是相应的抗原或抗体），免疫组织化学（检测组织中的特异性抗原），免疫细胞化学（通过免疫学方法检测细胞的抗原组成），流式细胞术（通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞）及免疫沉淀（通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原）。二抗针对某一特定物种（如小鼠）的所有抗体均具有特异性，因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记，大大节省了时间和费用；此外，一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子，从而使信号大大增强，提高了实验灵敏度。
二抗可以耦联有几种不同的标记，可以是酶，荧光素，或生物素。
二抗可以耦联有几种不同的标记，可以是酶，荧光素，或生物素。
荧光素钠与荧光素的区别是一样的吗123
cczkcbhzfq2021-07-29
荧光素
编辑
荧光素（英语：Fluorescein，又称为荧光黄）是一种合成有机化合物，外观为暗橙色/红色粉末，可溶于乙醇，微溶于水。在蓝光或紫外线照射下，发出绿色荧光。在多种应用（如荧光抗体技术）中被广泛用作为荧光示踪物。桔黄色或淡黄红色至红色粉末，加热时成晶体，它的碱金属盐溶于水，荧光很强。用作沉淀滴定的吸附指示液。[1]
中文名
荧光素
英文名
Fluorescence
别称
荧光黄；荧光红；荧光橙；酸性黄73[2]
化学式
C20H12O5
分子量
334.31[1]
CAS登录号
2321-07-5
EINECS登录号
219-031-8
熔点
125-127℃[1]
水溶性
稍溶于水
外观
桔黄色或淡黄红色至红色粉末
应用
吸附指示液
安全性描述
S22-24/25-37/39-26-36/37/39-27[3]
危险性符号
Xi[3]
危险性描述
R43-36-36/37/38[3]
目录
1 基本信息
2 理化特性
3 毒理学数据
▪ 急性毒性
▪ 致突变性
4 编号系统
5 性状描述
6 用途说明
7 合成方法
8 贮藏方法
基本信息
编辑
中文名：荧光素
英文名：Fluorescein
中文别名：荧光素；荧光红；荧光黄；荧光橙；酸性黄73；2-(6-羟基-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸
英文别名：Fluorescein;2-(6-Hydroxy-3-oxo-(3H)-xanthen-9-yl)benzoic acid;Acid Yellow 73
理化特性
编辑
外观：桔黄色或淡黄红色至红色结晶性粉末。
气味：无气味
熔点/凝固点(℃)：125-127℃(dec.)
沸点、初沸点、沸程(℃)：620.8℃/760mmHg
溶解性：溶于丙酮、吡啶、热乙醇、甲醇、甲酸、碳酸碱和氢氧化碱溶液，并显亮绿色荧光；稍溶于水、醇、醚、苯、氯仿、乙酸、二甲苯、硝基苯，不溶于石油醚。[2]
毒理学数据
编辑
急性毒性
大鼠腹腔LDLo： 600 mg/kg
小鼠静脉LC50：300 mg/kg
小鼠LCLo：600 mg/kg
兔子静脉LDLo;300 mg/kg
豚鼠LDLo;400 mg/kg。[4]
致突变性
DNA加合物检测系统：细菌—大肠杆菌：15umol/L
编号系统
编辑
CAS号：2321-07-5
MDL号：MFCD00005050
EINECS号：219-031-8
RTECS号：LM5075000
BRN号：94324
PubChem号：24859566[4]
性状描述
编辑
与碳酸钠（钾）、氢氧化钠（钾）等强碱反应生成荧光素钠（钾），易溶于水，并有强烈绿色荧光，荧光量子产率0.65（pH=7水溶液）。[1]
用途说明
编辑
1.沉淀滴定的吸附指示剂：
配成0.1%的乙醇溶液，或用其钠盐配成1%的水溶液。用Ag+滴定Cl-、Br-、I-、SCN-、CN-、C2O42-、SO42-、CO32-等，在中性或弱碱性介质中，滴定终点颜色由黄绿变为玫瑰红色。[1]
2. 荧光素是发光物质的基质。使许多生物具有荧光的物质。它与ATP形成复合物（荧光素腺苷），然后再与荧光素酶(1uciferase)结合。氧化过程中激活的荧光素发光。整个反应用作活的生物的检出或对很低程度的细菌污染作定量分析。例如用荧光光度计计量。[4]
3.用作化学分析的指示剂、生物染色剂和化妆品着色剂。
4.防冻液重要的颜料，可使防冻液呈现出绿色荧光。
合成方法
编辑
将间苯二酚加热至150℃，使之全部熔融，边搅拌边加入理论量的邻苯二甲酸酐，混匀并熔融后升温至185℃，保温半小时，然后慢慢加入适量新焙烧的无水氯化锌，当完全溶解后，逐渐升温至210～215℃，整个过程均需不停地搅拌，当反应液开始变稠时，停止搅拌，继续在此温度下加热至完全固化，研碎后得粉状粗品。将粉状粗品与稀盐酸混合加热煮沸，以浸出氯化锌和剩余的间苯二酚，抽滤后水洗、干燥，再用乙醇提取，晾干后即得红色固体荧光素。[4]
贮藏方法
编辑
避免氧化物接触，保持容器密封，放入紧密的储藏器内，储存在阴凉，干燥的地方。[4]
细胞生物学技术
编辑
荧光素（英语：Fluorescein，又称为荧光黄）是一种合成有机化合物，外观为暗橙色/红色粉末，可溶于乙醇，微溶于水。在蓝光或紫外线照射下，发出绿色荧光。在多种应用（如荧光抗体技术）中被广泛用作为荧光示踪物。桔黄色或淡黄红色至红色粉末，加热时成晶体，它的碱金属盐溶于水，荧光很强。用作沉淀滴定的吸附指示液。[1]
中文名
荧光素
英文名
Fluorescence
别称
荧光黄；荧光红；荧光橙；酸性黄73[2]
化学式
C20H12O5
分子量
334.31[1]
CAS登录号
2321-07-5
EINECS登录号
219-031-8
熔点
125-127℃[1]
水溶性
稍溶于水
外观
桔黄色或淡黄红色至红色粉末
应用
吸附指示液
安全性描述
S22-24/25-37/39-26-36/37/39-27[3]
危险性符号
Xi[3]
危险性描述
R43-36-36/37/38[3]
目录
1 基本信息
2 理化特性
3 毒理学数据
▪ 急性毒性
▪ 致突变性
4 编号系统
5 性状描述
6 用途说明
7 合成方法
8 贮藏方法
基本信息
编辑
中文名：荧光素
英文名：Fluorescein
中文别名：荧光素；荧光红；荧光黄；荧光橙；酸性黄73；2-(6-羟基-3-氧代-3H-呫吨-9-基)苯甲酸
英文别名：Fluorescein;2-(6-Hydroxy-3-oxo-(3H)-xanthen-9-yl)benzoic acid;Acid Yellow 73
理化特性
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外观：桔黄色或淡黄红色至红色结晶性粉末。
气味：无气味
熔点/凝固点(℃)：125-127℃(dec.)
沸点、初沸点、沸程(℃)：620.8℃/760mmHg
溶解性：溶于丙酮、吡啶、热乙醇、甲醇、甲酸、碳酸碱和氢氧化碱溶液，并显亮绿色荧光；稍溶于水、醇、醚、苯、氯仿、乙酸、二甲苯、硝基苯，不溶于石油醚。[2]
毒理学数据
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急性毒性
大鼠腹腔LDLo： 600 mg/kg
小鼠静脉LC50：300 mg/kg
小鼠LCLo：600 mg/kg
兔子静脉LDLo;300 mg/kg
豚鼠LDLo;400 mg/kg。[4]
致突变性
DNA加合物检测系统：细菌—大肠杆菌：15umol/L
编号系统
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CAS号：2321-07-5
MDL号：MFCD00005050
EINECS号：219-031-8
RTECS号：LM5075000
BRN号：94324
PubChem号：24859566[4]
性状描述
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与碳酸钠（钾）、氢氧化钠（钾）等强碱反应生成荧光素钠（钾），易溶于水，并有强烈绿色荧光，荧光量子产率0.65（pH=7水溶液）。[1]
用途说明
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1.沉淀滴定的吸附指示剂：
配成0.1%的乙醇溶液，或用其钠盐配成1%的水溶液。用Ag+滴定Cl-、Br-、I-、SCN-、CN-、C2O42-、SO42-、CO32-等，在中性或弱碱性介质中，滴定终点颜色由黄绿变为玫瑰红色。[1]
2. 荧光素是发光物质的基质。使许多生物具有荧光的物质。它与ATP形成复合物（荧光素腺苷），然后再与荧光素酶(1uciferase)结合。氧化过程中激活的荧光素发光。整个反应用作活的生物的检出或对很低程度的细菌污染作定量分析。例如用荧光光度计计量。[4]
3.用作化学分析的指示剂、生物染色剂和化妆品着色剂。
4.防冻液重要的颜料，可使防冻液呈现出绿色荧光。
合成方法
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将间苯二酚加热至150℃，使之全部熔融，边搅拌边加入理论量的邻苯二甲酸酐，混匀并熔融后升温至185℃，保温半小时，然后慢慢加入适量新焙烧的无水氯化锌，当完全溶解后，逐渐升温至210～215℃，整个过程均需不停地搅拌，当反应液开始变稠时，停止搅拌，继续在此温度下加热至完全固化，研碎后得粉状粗品。将粉状粗品与稀盐酸混合加热煮沸，以浸出氯化锌和剩余的间苯二酚，抽滤后水洗、干燥，再用乙醇提取，晾干后即得红色固体荧光素。[4]
贮藏方法
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避免氧化物接触，保持容器密封，放入紧密的储藏器内，储存在阴凉，干燥的地方。[4]
细胞生物学技术
免疫组化LCA+,S100+,Mela_有问必答_123
腐姐控百合4582021-08-07
病情分析：免疫组化，是应用免疫学基本原理――抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术
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病理报告里的免疫组化是什么意思?123
2018-02-26
免疫组化，是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
阴囊常见疾病的超声诊断ppt课件 道客巴巴123
灰机hm2018-02-19
免疫组化是什么？是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
攻略:免疫荧光实验方法中需要注意的环节 实验方法123
萝莉控小宣7312018-02-21
1、冰冻切片制备：建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。2、组织切片固定：切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定5-10min，尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和适当保存。3、血清封闭：为防止内源性非特异性蛋白抗原的结合，需要在一抗孵育前先用血清（与二抗来源一致）封闭，减弱背景着色。血清封闭的时间是可以调整的，一般10-30min。4、一抗孵育条件：在免疫组化反应中最重要，包括孵育时间和抗体浓度。一抗孵育温度有几种：4℃、室温、37℃，其中4℃效果最佳；孵育时间：这与温度、抗体浓度有关，一般37℃1-2h，而4℃过宿和从冰箱拿出后37℃复温45min。具体条件还要摸索。5、二抗孵育条件：二抗一般室温或37℃立即观察，若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃30min-1h，具体时间需要摸索，而浓度一般有工作液，若是浓缩液还要摸索浓度，切记要避光反应。但在免疫荧光中我们一般先把二抗浓度和孵育时间先定下，然后去摸索一抗浓度和孵育时间。最后，荧光素标记的二抗随着保存时间的延长，可能后有大量的游离荧光素残留，需要注意配制时小包装和并进行适当的离心。6、复染：目的是形成细胞轮廓，从而更好地对目标蛋白进行定位。一般常用DAPI复染。7、封片：为了长期保存，我们一般用缓冲甘油等封片，此外还有专门的抗荧光萃灭封片液。避免产生气泡，方法是直接在载玻片组织上滴一滴封片液，然后一手拿住盖片某一拐角，而另一手拿对面的那个拐角，接近封片液近端的拐角先降低，直至接触到液体时为止；当发现液体接触面在不断弥散时，则可以缓慢降低另一拐角，这样一般不会产生气泡。8、切片清洗：为了防止一抗、二抗等试剂残留而引起非特异性染色，所以适当地加强清洗（延长时间和增多次数）尤为重要，我一般在一抗孵育前的清洗是3min*3次，而一抗孵育后的清洗均为5次*5min。注意：单独冲洗，防止交叉反应造成污染。温柔冲洗，防止切片的脱落。我喜欢用浸洗方式；冲洗的时间要足够，才能彻底洗去结合的物质。PBS的pH和离子强度的使用和要求。这方面我有惨痛教训，当时我买的抗体稀释液偏酸，结果背景一片黄（未见特异性染色），建议pH在7.4-7.6浓度是0.01M。（中性及弱碱性条件（pH7-8）有利于免疫复合物的形成，而酸性条件则有利于分解；低离子强度有利于免疫复合物的形成，而高离子强度则有利于分解）9、拍照：有条件的话最好立即拍照，若不能及时拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和湿度。使用荧光显微镜注意严格按照荧光显微镜出厂说明书要求进行操作，不要随意改变程序；应在暗室中进行检查；防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜；检查时间每次以1~2h为宜，超过90min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱；标本受紫外线照射3~5min后，荧光也明显减弱或褪色；激发光长时间的照射，会发生荧光的衰减和淬灭现象；所以最多不得超过2~3h；荧光显微镜光源寿命有限，标本应集中检查，以节省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再启用时，须待灯光充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。关闭汞灯至少在开启15-30分钟后；标本染色后立即观察，因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延缓荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发；使用的玻片等载体，都必须厚度均匀，无明显的自发荧光，如果使用油镜，还必须保证镜油为无荧光镜油；电源最好装稳压器，否则电压不稳不仅会降低汞灯的寿命，也会影响镜检的效果。
异硫氰酸荧光素在荧光领域的应用123
云天啊IW642018-01-14
用来做荧光染料免疫荧光法 免疫荧光法的基本原理是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体.常用的荧光素有①异硫氰酸荧光素（fluorecein isothiocyante,FITC）,为黄色、橙黄色或褐黄色结晶粉末,有两种异构体,易溶于水和酒精等溶剂.分子量为389,最大吸收光谱为490～495,最大发射光谱为520～530urn,呈现明亮的黄绿色荧光,是最常用的标记抗体的荧光素.②四甲基异氰酸罗达明（tetrametrylrhodarnine isothiocyante,TRITC）是一种紫红色粉末,较稳定,是罗达明（rhodamine）的衍生物.最大吸收光谱550urn,最大发射光谱620urn呈橙红色荧光,与FITC发射的黄绿色荧光对比鲜明,常用于双标记染色. 按照抗原抗体反应的结合步聚,免疫荧光法可分为以下三种. 1．直接法 用荧光素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合,以检查出相应的抗原成分. 2．间接法 先用特异性抗体与相应的抗原结合,洗去未结合的抗体,再用荧光素标记的抗特异性抗体（间接荧光抗体）与特异性抗体相结合,形成抗原一特异性抗体一间接荧光抗体的复合物.在此复合物上带有比直接法更多的荧光抗体,所以,此法较直接法灵敏. 3．补体法 用特异性的抗体和补体的混合液与标本上的抗原反应,补体就结合在抗原抗体复合物上,再用抗补体的荧光抗体与之相结合,就形成了抗原一抗体一补体一抗补体荧光抗体的复合物.荧光显微镜下所见到的发出荧光的部分即是抗原所在的部位.补体法具有敏感性强的优势,同时适用于各种不同种属来源的特异性抗体的标记显示,在各种不同种属动物抗体的检测上为最常用的技术方法
荧光抗体技术 123
柯嘀552021-07-28
荧光抗体技术荧光素操作过程为何要避光
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