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RayBiotech/Human NANOG Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-NANOG-1
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RayBiotech/Human NANOG Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-NANOG-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
TFEH-NANOG-1
美元价:
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数    量:
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4000-520-616

Antigen Information

Accession Number:
  • Q9H9S0
Gene ID:
  • 79923
Gene Symbols:
  • NANOG
Protein Name & Synonyms:
Homeobox protein NANOG, Homeobox transcription factor Nanog (hNanog)
Target Species:
  • Human

Assay Format

Specificity:
The olionucleotide/antibody pair provided in this kit recognizes human NANOG in whole lysates and nuclear extracts.
Number of Targets Detected:
1
Species Detected:
  • Human
Compatible Sample Types:
  • Cell Lysates
  • Nuclear Extracts
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
Colorimetric
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Semi-Quantitative
Solid Support:
96-well Microplate

Product Specifications

Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Strip Microplate Kit

Introduction

Homeobox-containing transcription factor NANOG is essential in maintaining the pluripotent cells of the inner cell mass and in the derivation of embryonic stem cells (ESCs). Overexpression of NANOG is capable of maintaining the pluripotency and self-renewing characteristics of ESCs under what normally would be differentiation-inducing culture conditions. Concomitant with this essential function in pluripotent cell maintenance, expression of NANOG has restricted patterning in the inner cells of the morula, blastocyst, and epiblast during different developmental processes. Additionally, NANOG acts as a molecular gatekeeper to suppress or ensure differentiation in response to events in fluctuating environments and the presence of stimuli. NANOG has a single homeodomain that binds to DNA through the consensus sequence TAATGG. Coordinating with OCT4 and SOX2, NANOG regulates a large cohort of genes involved in pluripotency and development in later stages.

Product Features

  • Specific transcription factor-DNA binding assay
  • Perfect alternative to EMSA
  • Easy to perform in an ELISA format
  • Non-radioactive assay
  • High throughput (96-well plate format)
  • Assay can be completed within 5 hours

Application Notes

Kit Components
  • 96-well Strip Microplate pre-coated with DNA probes
  • DNA Binding Buffer
  • Positive Control Sample
  • Specific Competitor DNA probe
  • Non-specific Competitor DNA probe
  • Assay Reagent
  • DTT
  • Wash Buffer
  • Primary Antibody
  • HRP-conjugated Secondary Antibody
  • Antibody Diluent Buffer
  • TMB One-Step Substrate Reagent
  • Stop Solution
Other Materials Required
  • Distilled or deionized water
  • 100 ml and 1 liter graduated cylinders
  • Tubes to prepare sample dilutions
  • Absorbent paper
  • Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
  • Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
  • < li="">
  • Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm
Protocol Outline
  1. Prepare all reagents and samples as instructed in the manual.
  2. Add 100 µl of sample or positive control to each well.
  3. Incubate 2 h at RT or O/N at 4 °C.
  4. Add 100 µl of prepared primary antibody to each well.
  5. Incubate 1 h at RT.
  6. Add 100 µl of prepared HRP-secondary antibody to each well.
  7. Incubate 1 h at RT.
  8. Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
  9. Incubate 30 min at RT.
  10. Add 50 µl of Stop Solution to each well.
  11. Read at 450 nm immediately.

Typical Data

Figure 1Transcription factor activity assay of Nanog from nuclear extracts of P19 cells with the RayBio® Nanog TF-Activity Assay Kit.

Figure 2Transcription factor activity assay of Nanog from nuclear extracts of P19 cells with the specific competitor or non-specific competitor. The result shows specific binding of Nanog to the conserved DNA binding site.

Storage/Stability

Upon receipt, the positive control should be removed and stored at -20° or -80°C. The remainder of the kit can be stored for up to 6 months at 2-8°C from the date of shipment. Opened Microplate Wells or reagents may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C. Return unused wells to the pouch containing desiccant pack, reseal along entire edge. Note: The kit can be used within one year if the whole kit is stored at -20°C upon receipt. Avoid repeated freeze-thaw cycles.

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2021-08-07
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请问一下做流式需要的抗体那种比较好,有人说BiolegendeBioscience,santa,BD。求各位大神指教

免疫荧光是直接染色还是间接法?我觉得你是想用荧光标记的抗NGF/COX-2抗体来做直接染色,这样的话可以在流式上试试。但是一般免疫荧光是用间接法,这样的话荧光抗体只anti某个种属的抗体(视一抗而定),不是anti NGF或COX-2的,这样就不能用于流式了。
如果一个抗体可以用来“做western blot,免疫荧光,免疫共沉淀,ELISA”,我估计着是HRP或碱性磷酸酶或生物素之类标记的,然后需要再加荧光标记的二抗,这类抗体也是不能做流式用的。
我只用过流式的抗体来做免疫荧光(直接染色),效果还不错,但是反过来就没试过。
楼上两位还是要仔细看下产品说明书
可以啊,类似标记FITC和Biotin之类的。但就算是CD4和CD8这样这么常见的抗体,自行标记好,不仅使用的浓度需要比往常加倍,而且最后分群也没有公司的抗体好。 但唯一的好处就是,自行制作标记太省钱了,可能平时买一次公司的抗体钱用来自己做标记的话,估计这些自制抗体可以用到实验室关门了
format
英 [ˈfɔ:mæt]美 [ˈfɔ:rmæt]
n. (出版物的)版式;[自](数据安排的)形式;电视节目的总安排(或计划)
vt. 使格式化;安排…的格局;设计…的版面
vi. 设计一个版式
购买流式抗体需要注意哪些事情的?对于入门新生来说~~~
不一定能通用。你师姐用来做流式,是用直接标记,还是间接标记?如果是直接标记的话,那这个抗体一般不是FITC标记或者就是TRITC,PE之类的。如果恰好你的免疫组化,也是想用荧光素标记的抗体来直接标记,那就可以通用。如果你的免疫组化要用其它的标记的话,或者是间接标记的话,就有麻烦,因为荧光素的标记很可能会影响二抗和一抗的结合。
细胞先要固定,然后用去垢剂对细胞膜做通透处理,才能染色。网上很多protocol,可以参考一下
细胞分选宝典之流式分选123
灰哥哥冀捘少糙2017-11-29
抗体是加到细胞悬液当中的。根据细胞的情况,缓冲液也是不一样的。活细胞,固定的细胞差别都很大。抗体是不用事先稀释的,直接加入细胞悬液
BD流式抗体是行业翘楚。华雅思创生物可以买到。
细胞表面会有抗体的受体,这样就算没有抗体所要识别的特异性抗原,细胞也有可能会结合抗体,产生非特异性的信号。

血清内含有抗体,封闭的时候,选用同物种的血清,比如,使用小鼠单抗的话,就选用小鼠血清来进行封闭。这样,如果细胞表面有可以非特异性结合小鼠抗体的部位都会事先被结合,就不会再结合荧光标记的特异性抗体了。

菜鸟菜鸟菜鸟一个,想询问一下,我要做相同的指标,需要用流式细胞数及免疫组化检测,需要买不同类型的抗体

最近要开始做流式实验,感觉BD抗体有些贵,有人推荐蚂蚁淘的流式抗体,不知道有没有人用过,觉得怎么样?
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