
After fusing your protein of interest to one to the dimerization tags provided with iDimerize Homodimerization Systems (DmrB) or iDimerize Heterodimerization Systems (DmrA and DmrC), you may wish to monitor the protein's expression by SDS-PAGE followed by Western blot. These sensitive antibodies give a clean band on a Western blot. The DmrA and DmrB antibodies are monoclonal mouse antibodies, and the anti-DmrC antibody is polyclonal, derived from rabbit.
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血清内含有抗体,封闭的时候,选用同物种的血清,比如,使用小鼠单抗的话,就选用小鼠血清来进行封闭。这样,如果细胞表面有可以非特异性结合小鼠抗体的部位都会事先被结合,就不会再结合荧光标记的特异性抗体了。
如果一个抗体可以用来“做western blot,免疫荧光,免疫共沉淀,ELISA”,我估计着是HRP或碱性磷酸酶或生物素之类标记的,然后需要再加荧光标记的二抗,这类抗体也是不能做流式用的。
我只用过流式的抗体来做免疫荧光(直接染色),效果还不错,但是反过来就没试过。
能用的条件:1.分子的小鼠和人差异小,2.小鼠细胞本身不含有鼠抗体的结合受体;
不能用的条件:1.分子种属间差异大,2.采用的小鼠细胞株表面有鼠抗体的结合受体。
推荐尽量采用抗鼠的抗体,义翘神州兔单抗技术做出来的FCM抗体不少,可以到官网搜一下看看。

