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实验室无油真空泵和油泵的差异及使用上的区别
来自 : mayitao
科研抗体单克隆抗体在检测中的应用
1畅单克隆抗体在荧光染色技术中的应用 不同细胞表达不同的表面标志,同一种细胞在不同时期也可表达不同的标志。以荧光素标记单克隆抗体并采用荧光流式细胞仪(FACS)技术是检测和分析细胞表面标志、分离不同细胞亚群zui、zui简捷的实验方法。如果采用FITC、PE、PerCP等多色荧光标记,可对细胞进行双色染色或多色染色。国际公认的CD系列单克隆抗体已达200多种,通过计数带有不同CD标志的细胞数,可了解血细胞及其亚群变化,可鉴定血细胞性疾病。
荧光素标记的单克隆抗体还可用于对生物活性分子细胞内示踪。核转录因子NF-κB在非转录状态时位于胞质内,当激活时可进入细胞核,调节相关基因的转录。采用荧光标记的特异性抗体可对NF-κB进行细胞内定位,从而了解细胞的状态。抑癌基因表达的p53蛋白与细胞周期调节及细胞凋亡有关,通常其在细胞内的半衰期很短,常规方法难以检测。当发生突变时,则半衰期延长,引起在细胞内聚集,采用荧光标记的特异性抗体,可检测细胞内p53蛋白聚集状况。
2畅单克隆抗体在放射免疫分析中的应用 1959年,Yalow等建立的放射免疫分析法(RIA),是超微量分析史上的一次突破。其原理是用放射性核素标记抗原(图22-5),与被测抗原竞争相应的抗体,核素标记的抗原抗体复合物越多,则被测抗原越少,反之亦然。McAb问世以来,因其可大批量生产,并且具有高度特异性和均一性,使放射免疫检测的实验结果准确度更高,重复性更好。在研究激素与内分泌疾病的关系、诊断内分泌疾病及评判治疗效果等方面具有重要意义。
单克隆抗体还应用于兴奋剂检测之中,如区分人体内的内源性促红细胞生成素(EPO)和摄入性EPO,必须采用高特异性的单克隆抗体予以鉴别。
3畅单克隆抗体在酶免疫分析中的应用 细胞因子在免疫调节过程中扮演重要角色,由辣根过氧化物酶标记的抗细胞因子单克隆抗体等试剂所建立的夹心ELISA方法,可检测人体体液中绝大部分微量存在的细胞因子,对评价细胞因子参与免疫调节和免疫病理过程具有重要意义。McAb还能用于微生物的鉴别,应用McAb不仅能鉴别不同的病原体,还能鉴别相同病原体不同的种、型、亚型以及不同生活周期的抗原性变化。流感病毒经常发生变异,由此引起反复流行。单克隆抗体可分辨流感病毒微小变异,对流感快速诊断,流行预测和疫苗的制备具有重要意义。
3畅单克隆抗体在酶免疫分析中的应用 细胞因子在免疫调节过程中扮演重要角色,由辣根过氧化物酶标记的抗细胞因子单克隆抗体等试剂所建立的夹心ELISA方法,可检测人体体液中绝大部分微量存在的细胞因子,对评价细胞因子参与免疫调节和免疫病理过程具有重要意义。McAb还能用于微生物的鉴别,应用McAb不仅能鉴别不同的病原体,还能鉴别相同病原体不同的种、型、亚型以及不同生活周期的抗原性变化。流感病毒经常发生变异,由此引起反复流行。单克隆抗体可分辨流感病毒微小变异,对流感快速诊断,流行预测和疫苗的制备具有重要意义。
4畅单克隆抗体在定位检测中的应用 放射性核素99mTc等标记单克隆抗体,通过静脉、腹腔或腰椎穿刺等方式进入机体后,可特异性地与靶抗原结合,显示抗原分子和组织细胞的机能状态。这种检测方法称为功能显像,又称为放射免疫显像(radioimmunoimaging,RⅡ)。RⅡ可进行肿瘤的分类和鉴别诊断,可确定肿瘤的原发病灶及转移部位,并可确定肿瘤大小。RⅡ还可用于心肌坏死病灶的定位测定、血栓的定位测定以及炎症病灶的探测。
4畅单克隆抗体在定位检测中的应用 放射性核素99mTc等标记单克隆抗体,通过静脉、腹腔或腰椎穿刺等方式进入机体后,可特异性地与靶抗原结合,显示抗原分子和组织细胞的机能状态。这种检测方法称为功能显像,又称为放射免疫显像(radioimmunoimaging,RⅡ)。RⅡ可进行肿瘤的分类和鉴别诊断,可确定肿瘤的原发病灶及转移部位,并可确定肿瘤大小。RⅡ还可用于心肌坏死病灶的定位测定、血栓的定位测定以及炎症病灶的探测。
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