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NEB/Luna® Universal Probe qPCR Master Mix/M3004S/200 rxn (2 x 1 ml)
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Description:
Rapid,sensitiveandpreciseprobe-basedqPCRdetectionandquantitationoftargetDNAandCDNAsequences.
Probe-basedquantitativePCR(qPCR)usesreal-timefluorescencereleasedupon5´→3´exonucleasecleavageofaquenched,target-specificprobetomeasureDNAamplificationateachcycleofaPCR.Atapointwherethefluorescencesignalissignificantlydetectableoverthebackgroundfluorescence,aquantificationcycleorCqvaluecanbedetermined.Cqvaluescanbeusedtoevaluaterelativetargetabundancebetweentwoormoresamplesortocalculateabsolutetargetquantitiesinreferencetoanappropriatestandardcurve,derivedfromaseriesofknowndilutions.
TheNEBLunaUniversalProbeqPCRMasterMixisa2Xreactionmixoptimizedforreal-timeqPCRdetectionandquantitationoftargetDNAsequencesusinghydrolysisprobes.ItcontainsHotStartTaqDNAPolymeraseandhasbeenformulatedwithauniquepassivereferencedyethatiscompatIBLeacrossavarietyofinstrumentplatforms(includingthosethatrequireahighorlowROXreferencesignal).ItalsofeaturesdUTPforcarryoverpreventionandanon-fluorescent,visibledyetomonitorreactionsetup.ThisdyedoesnotspectrallyoverlapfluorophorescommonlyusedforqPCRandwillnotinterferewithreal-timedetection.
Themastermixformulationissuppliedat2XconcentrationandcontainsallPCRcomponentsrequiredforamplificationandquantitationofDNAexceptprimers/probesandDNAtemplate.GenomicDNAorcDNAofinterestcanbequantitatedwithLunaqPCRandexistingaswellascommercialqPCRassayprimer/probesequencescanbeused.
LearnmoreaboutourcomprehensiveqPCR/RT-qPCRtestingand“dotsinboxes”datavisualization
Notes:
AssayDesignTheuseofqPCRprimerdesignsoftware(e.g.,Primer3)maximizesthelikelihoodofamplificationsuccesswhileminimizingnonspecificamplificationandprimerdimers.TargetswithbalancedGC/ATcontent(40–60%)tendtoamplifyefficiently.Wherepossible,entersufficientsequencearoundtheareaofinteresttopermitrobustprimerdesignandusesearchcriteriathatpermitcross-referenceagainstrelevantsequencedatabases(toavoidpotentialoff-targetamplification).ForcDNAtargets,itisadvisabletodesignprimersacrossknownsplicingsitesinordertopreventamplificationfromgenomicDNA.Conversely,primersdesignedtotargetintronicregionscanensureamplificationexclusivelyfromgenomicDNA.PrimerandProbeConcentrationFormosttargets,afinalconcentrationof400nMforeachprimerwillprovideoptimumperformance.Ifneeded,primerconcentrationscanbeoptimizedbetween200–900nM.Probeshouldbeincludedat200nMforbestresults.Probeconcentrationcanbeoptimizedintherangeof100–500nMifoptimizationofperformanceortargetfluorescencelevelisdesired.MultiplexingTodetectorquantitatemultipletargetsinthesameLunareaction,selectdifferentfluorophorescorrespondingtoseparatedetectionchannelsofthereal-timeinstrument.Include400nMofforwardandreverseprimerand200nMprobeforeachtargettobedetectedinthereaction,andadjustconcentrationsifnecessarybasedonperformance(primer200–900nM,probe100–500nM).WhenloADIngqPCRprotocolontothereal-timeinstrument,besuretoselecttheappropriateopticalchannels,assomeinstrumentshaveasinglechannelrecordingmodethatwouldpreventmultiplexdatacollectionandanalysis.ForROX-dependentinstruments,avoidROX-labeledprobes.Thefunctionalityoftheprimerandprobesetsshouldbetestedindividuallybeforeattemptingamultiplexreaction.Whendeterminingwhichfluorophorestoincludeinamultiplexreaction,besuretochoosecompatiblereporterdyesandquenchersthathavewellseparatedfluorescencespectraorexhibitminimaloverlap.AmpliconLengthToensuresuccessfulandconsistentqPCRresults,itisimportanttomaximizePCRefficiency.AnimportantaspectofthisisthedesignofshortPCRamplicons(typically70–200bp).Someoptimizationmayberequired(includingtheuseoflongerextensiontimes),fortargetsthatexceedthatrange.TemplatePreparationandConcentrationLunaqPCRiscompatiblewithDNAsamplespreparedthroughtypicalnucleicacidpurificationmethods.PreparedDNAshouldbestoredinanEDTA-containingbuffer(e.g.,1XTE)forlong-termstability,anddilutionsshouldbefreshlypreparedforaqPCRexperimentbydilutionintoeitherTEorwater.Generally,ausefulconcentrationofstandardandunknownmaterialwillbeintherangeof106copiesto1copy.ForgDNAsamplesfromlargegenomes(e.g.,human,mouse)arangeof50ng–1pgofgDNAistypical.Forsmallgenomes,adjustasnecessaryusing106 –1copyinputasanapproximaterange.Notethatforsinglecopydilutions,somesampleswillcontainmultiplecopiesandsomewillhavenone,asdefinedbythePoissondistribution.ForcDNA,usetheproductofareactioncontaining1μg–0.1pgstartingRNA.cDNAdoesnotneedtobepurifiedbeforeadditiontotheLunareactionbutshouldbedilutedatleast1:10intotheqPCR.ROXReferenceDyeSomereal-timeinstrumentsrecommendtheuseofapassivereferencedye(typicallyROX)toovercomewell-to-wellvariationsthatcouldbecausedbybubbles,smalldifferencesinvolume,andautofluorescencefromdustorparticulatesinthereaction.TheLunaUniversalProbeqPCRMasterMixisformulatedwithauniversalreferencedyethatiscompatiblewithavarietyofqPCRinstrumenttypes,includingthosethatusenopassivereferencenormalizationandthosethatusealoworhighconcentrationofpassivereferencedye(ROX).Therefore,noadditionalcomponentsarerequiredtoensurecompatibilitywiththeseinstruments.CarryoverContaminationPreventionqPCRisanextremelysensitivemethod,andcontaminationinnewqPCRassayswithproductsfrompreviousamplificationreactionscancauseavarietyofissuessuchasfalsepositiveresultsandadecreaseinsensitivity.Thebestwaytopreventthis“carryover”contaminationistopracticegoodlaboratoryproceduresandavoidopeningthereactionvesselpostamplification.However,toaccommodatesituationswhereadditionalanti-contaminationmeasuresaredesired,theLunaUniversalProbeqPCRMasterMixcontainsamixtureofdUTP/dTTPthatresultsintheincorporationofdUintotheDNAproductduringamplification.PretreatmentofqPCRexperimentswithuracilDNAglycosylase(UDG)willeliminatepreviously-amplifieduracil-containingproductsbyexcisingtheuracilbasetoproduceanon-amplifiableDNAproduct.TheuseofaThermolabileUDGisimportant,ascompleteinactivationoftheUDGisrequiredtopreventdestructionofnewlysynthesizedqPCRproducts.Toenablecarryoverprevention,0.025units/μlAntarcticThermolabileUDG(NEB#M0372)shouldbeaddedtothereactionmix.Tomaximizeeliminationofcontaminatingproducts,setuptheqPCRexperimentsatroomtemperatureorincludea10minuteincubationstepat25°Cbeforetheinitialdenaturationstep.ReactionSetupandCyclingConditionsDuetothehotstartnatureofthepolymerase,itisnotnecessarytopreheatthethermocyclerpriortouseorsetupreactionsonice.For96-wellplates,werecommendafinalreactionvolumeof20μl.For384-wellplates,afinalreactionvolumeof10μlisrecommended.Whenprogramminginstrumentcyclingconditions,ensureaplatereadisincludedattheendoftheextensionstep,andadenaturation(melt)curveaftercyclingiscompletetoanalyzeproductspecificity.Amplificationfor40cyclesissufficientformostapplications,butforverylowinputsamples45cyclesmaybeused.蚂蚁淘电商平台
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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蚂蚁淘的价格是真实透明的，并且具有很大的价格优势，不需要繁杂的询价比价； 报价单与合同可以直接在线生成或打印；就像在京东购物一样， 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购，订单详情会告诉您所有进程。
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上海宾智生物科技有限公司在发布的13543 Histone H4 Polyclonal Antibody 组蛋白H4多克隆抗体供应信息，浏览与13543 Histone H4 Polyclonal Antibody 组蛋白H4多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与13543 Histone H4 Polyclonal Antibody 组蛋白H4多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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2021-08-25
艾美捷科技有限公司在发布的神经源性分化蛋白6 多克隆抗体|NDF6 Polyclonal Antibody供应信息，浏览与神经源性分化蛋白6 多克隆抗体|NDF6 Polyclonal Antibody相关的产品或在搜索更多与神经源性分化蛋白6 多克隆抗体|NDF6 Polyclonal Antibody相关的内容。 查看更多
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2021-08-28
GCN5PolyclonalAntibody(100ug),GCN5多克隆抗体(100ug)是由上海西宝生物科技有限公司代理或销售的Epigentek品牌的试剂，产品来源于美国。上海西宝生物科技有限公司是中国最权威的GCN5PolyclonalAntibody(100ug),GCN5多克隆抗体(100ug)试剂销售服务商之一，在上海等地方销售GCN5PolyclonalAntibody(100ug),GCN5多克隆抗体(100ug)试剂已经多年。生物在线为您提供众 查看更多
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2021-07-22
抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆... 查看更多
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2021-09-21
武汉云克隆诊断试剂研究所有限公司在发布的血管紧张素转化酶(ACE)多克隆抗体供应信息，浏览与血管紧张素转化酶(ACE)多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与血管紧张素转化酶(ACE)多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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上海武昊生物科技有限公司在发布的巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)多克隆抗体(人的一抗)/武昊生物/wuhaobio供应信息，浏览与巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)多克隆抗体(人的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的产品或在搜索更多与巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)多克隆抗体(人的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的内容。 查看更多
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拓普生物拥有经验丰富的免疫学技术团队，标准化的操作流程；规范化的动物基地，能够向广大用户提供价廉物美，品质一流的抗体产品和技术服务。1. 免疫4 查看更多
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2021-09-02
上海武昊生物科技有限公司在发布的类胰蛋白酶(TPS)多克隆抗体(小鼠的一抗)/武昊生物/wuhaobio供应信息，浏览与类胰蛋白酶(TPS)多克隆抗体(小鼠的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的产品或在搜索更多与类胰蛋白酶(TPS)多克隆抗体(小鼠的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的内容。 查看更多
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2021-08-23
上海嵘崴达实业有限公司在发布的人E-cadherin蛋白的亲和纯化的多克隆抗体供应信息，浏览与人E-cadherin蛋白的亲和纯化的多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与人E-cadherin蛋白的亲和纯化的多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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HDAC10PolyclonalAntibody(100ug),HDAC10多克隆抗体(100ug)是由上海西宝生物科技有限公司代理或销售的Epigentek品牌的试剂，产品来源于美国。上海西宝生物科技有限公司是中国最权威的HDAC10PolyclonalAntibody(100ug),HDAC10多克隆抗体(100ug)试剂销售服务商之一，在上海等地方销售HDAC10PolyclonalAntibody(100ug),HDAC10多克隆抗体(100ug)试剂已经 查看更多
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2021-07-31
武汉云克隆诊断试剂研究所有限公司在发布的血管生成素1(ANGPT1)多克隆抗体供应信息，浏览与血管生成素1(ANGPT1)多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与血管生成素1(ANGPT1)多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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2017-09-27
上海泽叶生物科技有限公司在发布的血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体供应信息，浏览与血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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推荐下国内靠谱的抗体公司 制剂技术讨论版论坛123
2017-11-04
现在，国内做抗体的公司是比较多的，有些公司名为抗体制备公司，他们接到后在外包给有实力的做，一定要看清楚。其中美国的ABclonal的还不错，要是用重组蛋白作为免疫原，最重要的是抗原区域的设 计，他们中文名字叫什么爱博泰克，记不清了。
AKT2多克隆抗体应该切取哪个分子量大小的条带呢?_问答详情_多...123
淡忘回忆的石头2016-10-07
蛋白表达纯化及抗体制备求推荐公司 生物科学 学术...123
sss_7372021-07-22
Bioss～博奥森～
三聚氰胺多克隆抗体的制备、分离纯化及ELISA方法的...123
埑擸鄕2017-11-04
需要
制备抗体都需要进行纯化处理
制备抗体都需要进行纯化处理
医学细胞生物学第4章免疫球蛋白 123
ytfscxl2021-07-29
【求助】用小鼠制备多克隆抗体 动植物与海洋生物论坛123
wangbo01052015-04-28
兔单克隆抗体 123
最后一次HVVLE2021-08-05
单抗制备难度大，使用时候容易受到目标蛋白降解的影响。
多抗，稀释度更大，特异性相对较差，容易出现多条带。
兔的单克隆抗体和鼠的单克隆抗体在使用上不会有什么区别。
用来很多抗体，许多时候觉得单抗多抗也未必是理论上那样的。单抗做不好的也有，多抗条带唯一且清晰的也有。
而且很多蛋白的抗体未必有那么多的选择。
多抗，稀释度更大，特异性相对较差，容易出现多条带。
兔的单克隆抗体和鼠的单克隆抗体在使用上不会有什么区别。
用来很多抗体，许多时候觉得单抗多抗也未必是理论上那样的。单抗做不好的也有，多抗条带唯一且清晰的也有。
而且很多蛋白的抗体未必有那么多的选择。
求助动物多克隆抗体血清时有少量溶血。 免疫学讨论版论坛123
asholic2021-07-24
用老鼠制多克隆抗体时一般选什么品种的小鼠_问答详情_多克隆抗体...123
4297abc2021-08-09
老鼠每年可怀胎多达八次，每胎可诞幼鼠四至七只。繁殖小鼠成熟早，繁殖力强，寿命1～3年。新生仔鼠周身无毛，通体肉红，两眼不睁，两耳粘贴在皮肤上。一周开始爬行，12天睁眼。除了人类以外，老鼠是哺乳类中繁殖最迅速且最成功的。以经常在人类生活地区活动的一种家鼠以为例：每年可怀胎多达八次，每胎可诞幼鼠四至七只。除了消耗或污染食物外，老鼠性喜磨牙，故因老鼠咬而遭破坏的包装材料或建筑设备颇为可观，据统计美国有四分之一原因不明的火灾，可能是由老鼠咬损电线所引起。
单克隆抗体和多克隆抗体的区别 123
世界大不同10182021-08-02
“生物导弹”是 免 疫导向药物的形象称呼， 它 由单克隆抗体与药物、酶或放射性同位素 配 合而成，因带有单克隆抗体而能自动导向，在生物体内与特定目标细胞或组织结合，并由其携带的药物产生治疗作用。“生物导弹”是对单克隆抗体的一种形象化说法，因为 它 能象导弹那样准确地击中目标，而且 它 是用生物工程方法制造的（其本身当然是生物物质），所带杀伤物是一些生物物质，主要命中的目标也是生物物质，叫做生物导弹才是真正名符其实的。虽说抗体 免 疫是特异性的，那只是指这种抗体 免 疫 专 一地针对一种疾病。例如，种过牛痘 就 有了抵抗天花的 免 疫力，对于别的疾病则还是不起作用。而从另一方 面 说，事实 上 产生的抗体有着多种多样不同类型、不同亲合力和不同的生 理 功能。抗原 上 那部分可以引起机体产生抗体的分子结构，叫做抗原决定簇。一个抗原 上 可以有好几个不同的抗原决定簇，因而使机体产生好几种不同的抗体，最终产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群 就 是一个纯系，纯系的英文为Clone，音译 就 是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合， 就 象导弹精确地命中目标一样。另一方 面 ，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。
与多克隆抗体相比,单克隆抗体的优点是A.稳定性好B.与抗原的结合力...123
宇智波丂2017-09-28
根据不同应用领域的要求,正确的选择和应用.
1.单克隆抗体的优点：
（1）杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断的生产高特异性、高均一性的抗体.
（2）可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体.
（3）由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等.
（4）由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗.
2.单克隆抗体的局限性：
(1）单克隆抗体固定的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围.由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成.
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体.
(3）制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高.
1.单克隆抗体的优点：
（1）杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断的生产高特异性、高均一性的抗体.
（2）可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体.
（3）由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等.
（4）由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗.
2.单克隆抗体的局限性：
(1）单克隆抗体固定的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围.由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成.
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体.
(3）制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高.
什么是多克隆抗体?与单克隆抗体有哪些区别? 安必奇生物123
moleca822017-11-04
所谓混合单克隆抗体就是只含一个单细胞核混合其他氨基酸物质的克隆细胞产生的。
说得简单点就是，细胞核是原封不动的，没有重组过，而细胞核外的东西是很多别的细胞中提取出来的并组合起来的。这样的混合体淋巴细胞产生的抗体具有很强的嵌合能力，针对性比一般的抗体强，但是它的来源没变，所以称之为混合单克隆抗体
说得简单点就是，细胞核是原封不动的，没有重组过，而细胞核外的东西是很多别的细胞中提取出来的并组合起来的。这样的混合体淋巴细胞产生的抗体具有很强的嵌合能力，针对性比一般的抗体强，但是它的来源没变，所以称之为混合单克隆抗体
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