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NEB/Luna® Universal Probe qPCR Master Mix/M3004S/200 rxn (2 x 1 ml)
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Description:
Rapid,sensitiveandpreciseprobe-basedqPCRdetectionandquantitationoftargetDNAandCDNAsequences.
Probe-basedquantitativePCR(qPCR)usesreal-timefluorescencereleasedupon5´→3´exonucleasecleavageofaquenched,target-specificprobetomeasureDNAamplificationateachcycleofaPCR.Atapointwherethefluorescencesignalissignificantlydetectableoverthebackgroundfluorescence,aquantificationcycleorCqvaluecanbedetermined.Cqvaluescanbeusedtoevaluaterelativetargetabundancebetweentwoormoresamplesortocalculateabsolutetargetquantitiesinreferencetoanappropriatestandardcurve,derivedfromaseriesofknowndilutions.
TheNEBLunaUniversalProbeqPCRMasterMixisa2Xreactionmixoptimizedforreal-timeqPCRdetectionandquantitationoftargetDNAsequencesusinghydrolysisprobes.ItcontainsHotStartTaqDNAPolymeraseandhasbeenformulatedwithauniquepassivereferencedyethatiscompatIBLeacrossavarietyofinstrumentplatforms(includingthosethatrequireahighorlowROXreferencesignal).ItalsofeaturesdUTPforcarryoverpreventionandanon-fluorescent,visibledyetomonitorreactionsetup.ThisdyedoesnotspectrallyoverlapfluorophorescommonlyusedforqPCRandwillnotinterferewithreal-timedetection.
Themastermixformulationissuppliedat2XconcentrationandcontainsallPCRcomponentsrequiredforamplificationandquantitationofDNAexceptprimers/probesandDNAtemplate.GenomicDNAorcDNAofinterestcanbequantitatedwithLunaqPCRandexistingaswellascommercialqPCRassayprimer/probesequencescanbeused.
LearnmoreaboutourcomprehensiveqPCR/RT-qPCRtestingand“dotsinboxes”datavisualization
Notes:
AssayDesignTheuseofqPCRprimerdesignsoftware(e.g.,Primer3)maximizesthelikelihoodofamplificationsuccesswhileminimizingnonspecificamplificationandprimerdimers.TargetswithbalancedGC/ATcontent(40–60%)tendtoamplifyefficiently.Wherepossible,entersufficientsequencearoundtheareaofinteresttopermitrobustprimerdesignandusesearchcriteriathatpermitcross-referenceagainstrelevantsequencedatabases(toavoidpotentialoff-targetamplification).ForcDNAtargets,itisadvisabletodesignprimersacrossknownsplicingsitesinordertopreventamplificationfromgenomicDNA.Conversely,primersdesignedtotargetintronicregionscanensureamplificationexclusivelyfromgenomicDNA.PrimerandProbeConcentrationFormosttargets,afinalconcentrationof400nMforeachprimerwillprovideoptimumperformance.Ifneeded,primerconcentrationscanbeoptimizedbetween200–900nM.Probeshouldbeincludedat200nMforbestresults.Probeconcentrationcanbeoptimizedintherangeof100–500nMifoptimizationofperformanceortargetfluorescencelevelisdesired.MultiplexingTodetectorquantitatemultipletargetsinthesameLunareaction,selectdifferentfluorophorescorrespondingtoseparatedetectionchannelsofthereal-timeinstrument.Include400nMofforwardandreverseprimerand200nMprobeforeachtargettobedetectedinthereaction,andadjustconcentrationsifnecessarybasedonperformance(primer200–900nM,probe100–500nM).WhenloADIngqPCRprotocolontothereal-timeinstrument,besuretoselecttheappropriateopticalchannels,assomeinstrumentshaveasinglechannelrecordingmodethatwouldpreventmultiplexdatacollectionandanalysis.ForROX-dependentinstruments,avoidROX-labeledprobes.Thefunctionalityoftheprimerandprobesetsshouldbetestedindividuallybeforeattemptingamultiplexreaction.Whendeterminingwhichfluorophorestoincludeinamultiplexreaction,besuretochoosecompatiblereporterdyesandquenchersthathavewellseparatedfluorescencespectraorexhibitminimaloverlap.AmpliconLengthToensuresuccessfulandconsistentqPCRresults,itisimportanttomaximizePCRefficiency.AnimportantaspectofthisisthedesignofshortPCRamplicons(typically70–200bp).Someoptimizationmayberequired(includingtheuseoflongerextensiontimes),fortargetsthatexceedthatrange.TemplatePreparationandConcentrationLunaqPCRiscompatiblewithDNAsamplespreparedthroughtypicalnucleicacidpurificationmethods.PreparedDNAshouldbestoredinanEDTA-containingbuffer(e.g.,1XTE)forlong-termstability,anddilutionsshouldbefreshlypreparedforaqPCRexperimentbydilutionintoeitherTEorwater.Generally,ausefulconcentrationofstandardandunknownmaterialwillbeintherangeof106copiesto1copy.ForgDNAsamplesfromlargegenomes(e.g.,human,mouse)arangeof50ng–1pgofgDNAistypical.Forsmallgenomes,adjustasnecessaryusing106 –1copyinputasanapproximaterange.Notethatforsinglecopydilutions,somesampleswillcontainmultiplecopiesandsomewillhavenone,asdefinedbythePoissondistribution.ForcDNA,usetheproductofareactioncontaining1μg–0.1pgstartingRNA.cDNAdoesnotneedtobepurifiedbeforeadditiontotheLunareactionbutshouldbedilutedatleast1:10intotheqPCR.ROXReferenceDyeSomereal-timeinstrumentsrecommendtheuseofapassivereferencedye(typicallyROX)toovercomewell-to-wellvariationsthatcouldbecausedbybubbles,smalldifferencesinvolume,andautofluorescencefromdustorparticulatesinthereaction.TheLunaUniversalProbeqPCRMasterMixisformulatedwithauniversalreferencedyethatiscompatiblewithavarietyofqPCRinstrumenttypes,includingthosethatusenopassivereferencenormalizationandthosethatusealoworhighconcentrationofpassivereferencedye(ROX).Therefore,noadditionalcomponentsarerequiredtoensurecompatibilitywiththeseinstruments.CarryoverContaminationPreventionqPCRisanextremelysensitivemethod,andcontaminationinnewqPCRassayswithproductsfrompreviousamplificationreactionscancauseavarietyofissuessuchasfalsepositiveresultsandadecreaseinsensitivity.Thebestwaytopreventthis“carryover”contaminationistopracticegoodlaboratoryproceduresandavoidopeningthereactionvesselpostamplification.However,toaccommodatesituationswhereadditionalanti-contaminationmeasuresaredesired,theLunaUniversalProbeqPCRMasterMixcontainsamixtureofdUTP/dTTPthatresultsintheincorporationofdUintotheDNAproductduringamplification.PretreatmentofqPCRexperimentswithuracilDNAglycosylase(UDG)willeliminatepreviously-amplifieduracil-containingproductsbyexcisingtheuracilbasetoproduceanon-amplifiableDNAproduct.TheuseofaThermolabileUDGisimportant,ascompleteinactivationoftheUDGisrequiredtopreventdestructionofnewlysynthesizedqPCRproducts.Toenablecarryoverprevention,0.025units/μlAntarcticThermolabileUDG(NEB#M0372)shouldbeaddedtothereactionmix.Tomaximizeeliminationofcontaminatingproducts,setuptheqPCRexperimentsatroomtemperatureorincludea10minuteincubationstepat25°Cbeforetheinitialdenaturationstep.ReactionSetupandCyclingConditionsDuetothehotstartnatureofthepolymerase,itisnotnecessarytopreheatthethermocyclerpriortouseorsetupreactionsonice.For96-wellplates,werecommendafinalreactionvolumeof20μl.For384-wellplates,afinalreactionvolumeof10μlisrecommended.Whenprogramminginstrumentcyclingconditions,ensureaplatereadisincludedattheendoftheextensionstep,andadenaturation(melt)curveaftercyclingiscompletetoanalyzeproductspecificity.Amplificationfor40cyclesissufficientformostapplications,butforverylowinputsamples45cyclesmaybeused.蚂蚁淘电商平台
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2018-12-26
Buffers:- 2X buffer10 ml 0.5 M imidazol, pH 6.60.21 g LiCl1.25 ml 1 M MgCl21.0 ml 0.1 M EGTA, pH 6.6--> Bring volume up to 50 ml with distilled water.- dilu 查看更多
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2017-09-27
上海泽叶生物科技有限公司在发布的血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体供应信息，浏览与血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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2018-06-20
一般标记抗体的激发波长和发射波长是多少 查看更多
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2017-10-02
【产品说明】:点击:G蛋白偶联受体MAS相关蛋白 多克隆抗体查看更详细产品说明,更多应用、储存、价格、货期等信息请致电400-6800-868垂询Abbkine中国区域授权总代理... 查看更多
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2021-08-28
GCN5PolyclonalAntibody(100ug),GCN5多克隆抗体(100ug)是由上海西宝生物科技有限公司代理或销售的Epigentek品牌的试剂，产品来源于美国。上海西宝生物科技有限公司是中国最权威的GCN5PolyclonalAntibody(100ug),GCN5多克隆抗体(100ug)试剂销售服务商之一，在上海等地方销售GCN5PolyclonalAntibody(100ug),GCN5多克隆抗体(100ug)试剂已经多年。生物在线为您提供众 查看更多
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2021-08-07
威斯腾生物在发布的Itraq标记定量(Western-blot实验服务、蛋白纯化、多肽合成、单克隆抗体制备、多克隆抗体制备、蛋白双向电泳实验服务、质谱分析、原核蛋白表达、真核蛋白表达、iTRAQ定量蛋白质组学、SILAC蛋白组学等) 威斯腾生物，让科研更简单！供应信息，浏览与Itraq标记定量(Western-blot实验服务、蛋白纯化、多肽合成、单克隆抗体制备、多克隆抗体制备、蛋白双向电泳实验服务、质谱分析、原核蛋白表达、真核蛋白表达、iTRAQ定量蛋白质组学、SILAC蛋白组学等) 查看更多
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2021-09-20
武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司在发布的COX4多克隆抗体供应信息，浏览与COX4多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与COX4多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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2021-09-01
上海武昊生物科技有限公司在发布的丙氨酸乙醛酸转氨酶2(AGXT2)多克隆抗体(大鼠的一抗)/武昊生物/wuhaobio供应信息，浏览与丙氨酸乙醛酸转氨酶2(AGXT2)多克隆抗体(大鼠的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的产品或在搜索更多与丙氨酸乙醛酸转氨酶2(AGXT2)多克隆抗体(大鼠的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的内容。 查看更多
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2021-07-15
我们的理念： 纳米颗粒标记小分子抗原技术，更好地展示抗原位点，提高免疫效果 蛋白、多肽分别免疫，提高抗体开发成功率 只提供满足客户实际应用要求的抗体 我们的优势： 现有员工60余人，其中博士5人，均拥有抗体开发10年以上经验 在小分子抗原标记、纳米颗粒制备等领域做出卓越的成果 我们的能力覆盖了从基因到抗体、再到Assay建立，再到成熟的试剂盒 2013年保证型多抗促销活动（截止6月30号）... 查看更多
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2018-12-26
Reagents:Bacterial strainE. coli N4830/pJW10LB amp media50 µg/ml ampicillinHigh salt bufferfor 1 L50 mM KH2PO4 6.8 g150 mM KCl 11.18 g50 mM sodium pyroph 查看更多
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2017-09-27
武汉巴菲尔生物技术服务有限公司在发布的RFWD3多克隆抗体供应信息，浏览与RFWD3多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与RFWD3多克隆抗体相关的内容。 查看更多
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拓普生物拥有经验丰富的免疫学技术团队，标准化的操作流程；规范化的动物基地，能够向广大用户提供价廉物美，品质一流的抗体产品和技术服务。1. 免疫4 查看更多
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求助动物多克隆抗体血清时有少量溶血。 免疫学讨论版论坛123
asholic2021-07-24
单克隆一定好吗?选择单克隆抗体还是多克隆抗体?|产品技术|上海...123
木恋晓丶UFT2021-07-28
这个没有硬性规定，要根据实验情况而定。如果有文献参考，也可以先用发表的方法。
一般来说多克隆的阳性率高一些，但出现假阳性的比例也高一些。
一般来说多克隆的阳性率高一些，但出现假阳性的比例也高一些。
用老鼠制多克隆抗体时一般选什么品种的小鼠_问答详情_多克隆抗体...123
4297abc2021-08-09
老鼠每年可怀胎多达八次，每胎可诞幼鼠四至七只。繁殖小鼠成熟早，繁殖力强，寿命1～3年。新生仔鼠周身无毛，通体肉红，两眼不睁，两耳粘贴在皮肤上。一周开始爬行，12天睁眼。除了人类以外，老鼠是哺乳类中繁殖最迅速且最成功的。以经常在人类生活地区活动的一种家鼠以为例：每年可怀胎多达八次，每胎可诞幼鼠四至七只。除了消耗或污染食物外，老鼠性喜磨牙，故因老鼠咬而遭破坏的包装材料或建筑设备颇为可观，据统计美国有四分之一原因不明的火灾，可能是由老鼠咬损电线所引起。
三聚氰胺多克隆抗体的制备、分离纯化及ELISA方法的...123
埑擸鄕2017-11-04
需要
制备抗体都需要进行纯化处理
制备抗体都需要进行纯化处理
USP5多克隆抗体(泛素特异性蛋白酶5)123
2017-09-28
多克隆抗体的概念抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外，同样一类抗原决定簇，也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。
【求助】用小鼠制备多克隆抗体 动植物与海洋生物论坛123
wangbo01052015-04-28
【求助】杂带123
彼岸花开dx2021-08-13
单克隆抗体和多克隆抗体的区别 123
世界大不同10182021-08-02
“生物导弹”是 免 疫导向药物的形象称呼， 它 由单克隆抗体与药物、酶或放射性同位素 配 合而成，因带有单克隆抗体而能自动导向，在生物体内与特定目标细胞或组织结合，并由其携带的药物产生治疗作用。“生物导弹”是对单克隆抗体的一种形象化说法，因为 它 能象导弹那样准确地击中目标，而且 它 是用生物工程方法制造的（其本身当然是生物物质），所带杀伤物是一些生物物质，主要命中的目标也是生物物质，叫做生物导弹才是真正名符其实的。虽说抗体 免 疫是特异性的，那只是指这种抗体 免 疫 专 一地针对一种疾病。例如，种过牛痘 就 有了抵抗天花的 免 疫力，对于别的疾病则还是不起作用。而从另一方 面 说，事实 上 产生的抗体有着多种多样不同类型、不同亲合力和不同的生 理 功能。抗原 上 那部分可以引起机体产生抗体的分子结构，叫做抗原决定簇。一个抗原 上 可以有好几个不同的抗原决定簇，因而使机体产生好几种不同的抗体，最终产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群 就 是一个纯系，纯系的英文为Clone，音译 就 是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合， 就 象导弹精确地命中目标一样。另一方 面 ，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。
[辅助检查]第二节 多克隆抗体的制备及鉴定 医学免疫学实验技术 天...123
不想等待1432021-08-10
抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于治疗，制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体，要求的效价不一。鉴定效价的方法很多，包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验9ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法，以资比较。如制备抗抗体的效价，一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
抗体的特异性鉴定 抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高，它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线，计算各自的结合率，求出各自在 IC50时的浓度，并按下列公式计算交叉反应率。 如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管，而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时，表示 这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为 0，即该血清的特异性较好。
抗体的亲和力 是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小、抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键、疏水键、侧链相反电荷基因的库仑力、范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示，K的单位是L/mol，通常K的范围在 108 ～1010 /mol，也有多达 1014 /mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选，确定抗体的用途，验证抗体的均一性等均有重要意义。向左转|向右转
抗体的特异性鉴定 抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高，它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线，计算各自的结合率，求出各自在 IC50时的浓度，并按下列公式计算交叉反应率。 如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管，而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时，表示 这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为 0，即该血清的特异性较好。
抗体的亲和力 是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小、抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键、疏水键、侧链相反电荷基因的库仑力、范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示，K的单位是L/mol，通常K的范围在 108 ～1010 /mol，也有多达 1014 /mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选，确定抗体的用途，验证抗体的均一性等均有重要意义。向左转|向右转
国内哪家抗体定制公司好? 123
2021-08-07
多克隆抗体存在于免疫动物的血清中，可通过直接分离血清获得。金开瑞的多克隆抗体制备平台，以抗体平台为核心建立了一系列技术平台和动物养殖基地，可以提供包括兔、小鼠、大鼠、豚鼠等多个系统的多克隆抗体 制备，供您自由选择属于您的需求！
抗体制备服务抗体生产单/多抗定制@钟鼎生物公司123
2017-11-04
哎最近实验真多！最重要的是这个我来负责找！累人！求助各位大大！
羊抗鼠IgG多克隆抗体是什么意思 微思作业本123
潇237322021-08-15
鼠IGG对于羊来说是异物,所以当羊接触鼠IGG就会产生相应的抗体,称为羊抗鼠IgG抗体.
又由于自然存在的抗原大都存在多个抗原表位,会刺激机体产生多种针对同一抗原的不同抗原表位相应的不同抗体.
又由于自然存在的抗原大都存在多个抗原表位,会刺激机体产生多种针对同一抗原的不同抗原表位相应的不同抗体.
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