Abcore是一家生物技术公司，在全球范围内提供定制的多克隆抗体服务，并代表北美的欧洲小型生物技术公司。抗体服务在南加州的美国农业部许可的设施进行。Abcore公司总部设在加利福尼亚州圣迭戈，是生命科学发现和创新的中心。Abcoreisabiotechcompanythatprovidescustompolyclonalantibodyservicesworldwide;andrepresentssmallEuropeanbiotechcompaniesinNorthAmerica.AntibodyservicesareperformedinSouthernCaliforniaatUSDAlicensedfacilities.HeadquarteredinSanDiego,CA,Abcoreisatthecenteroflifesciencediscoveryandinnovation.
多克隆抗体定制服务|实验技术服务——pCzn1质粒+ArcticExpress宿主菌低温表达体系。我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧，承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信，我们提供原始的表达菌株和克隆质粒，客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。产品品牌： Abcore测序实验流程：A:(Cat.No.LA001)多肽→多克隆抗体多肽合成：纯度>75%，10mg，长度>15个氨基酸多肽与KLH偶联(2-3mg)抗体生产周期为12-15周，包括2只兔子，4次免疫亲和层析纯化抗血清终产品：2-3mg多肽；1-2ml免疫前血清；2-5mg纯化后的抗体；ELISA检测结果（>1:32,000）B:(Cat.No.LA002)基因→多克隆抗体基因扩增、载体构建、大肠杆菌系统蛋白表达免疫，亲和层析纯化抗血清抗体生产周期为14-17周终产品：质粒（带有目的基因）；1mg蛋白；1-2ml免疫前血清；2-5mg纯化后的抗体；ELISA检测结果（>1:32,000）C:(Cat.No.LA003)酸化多肽→多克隆抗体多肽合成酸化多肽：纯度>95%，10mg，长度>15个氨基酸非酸化多肽：纯度>75%，10mg，长度>15个氨基酸酸化多肽与KLH或BSA偶联（2-3mg）非酸化多肽与BSA偶联抗体制备周期13-16周，包括2只兔子，4次免疫亲和层析纯化抗血清，去除非酸化抗体、纯化酸化特异性抗体终产品：免疫前血清收集；2-3mg多肽（未修饰肽和酸化修饰多肽）；2-5mg***酸化特异性抗体；ELISA检测结果（效价>1:32,000）D:(Cat.No.LA004)Western检测保证多克隆抗体制备终产品：2-3mg多肽；1-2ml免疫前血清；2-5mg纯化后的抗体；ELISA检测结果>1:32,000；Western检测（1：200）以保证抗体来自其中一条多肽.目录号 价格/元 不同的路线 免疫前IP001 4500 客户提供抗原 1周IP002 5000 客户提供E.coli高表达质粒1-高表达蛋白位于包涵体。 2周IP003 5000 客户提供E.coli高表达质粒2-带有His-tag高表达蛋白位于上清。 2周IP004 6000 客户提供表达克隆模扳：例如全长基因克隆，CDNA或者genomicDNA。 3周IP005 6000 全合成219bp表达序列，引进E.coli优化表达公式，专门针对不易获得高表达的蛋白。 3周IP006 7000 多肽设计，合成，交联到载体蛋白作为抗原
当机体受到抗原刺激后，可产生抗体。抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇，各抗原分子具有许多抗原决定簇。因此，由它免疫动物所产生的抗血清实际上是多种抗体的混合物。一分子蛋白质激素的表面存在多个不同的抗原决定簇，可同B淋巴细胞表面的相应受体结合。一个B淋巴细胞表面只能和一个抗原决定簇结合。一个静止的B细胞与抗原决定簇结合后即被活化并增殖和分化为一群合成和分泌抗相应抗原决定簇抗体的浆细胞，这一群细胞称为一个克隆。用经典动物免疫法得到的抗血清中含有多种由不同克隆产生的、抗不同抗原决定簇的抗体，称为PCAb。自身免疫性内分泌疾病患者血清中存在的抗某一自身抗原例如甲状腺过氧化物酶等的抗体，也可具有多克隆性质，也可称为多克隆抗体。UMO1(UBL1;MIM601912)是一种类似于泛素的蛋白质，可以与其他蛋白质共价结合。SENP2是一组酶，它将新合成的SUMO1加工成可结合的形式，并催化对含苏素的物种的分解。SENP6是SUMO/sentrin特异性蛋白酶，其功能是从缀合蛋白中去除SUMO。SENP6已经被证明是去SUMO化配体激活的转录因子成员，称为类视黄醇X受体a。RXRa的转录活性受SUMO化的调节。研究人员已经证明SENP6优于SUMO2/3缀合物而不是SUMO1缀合物。Senp6core多克隆抗体（SUMO1sentrin特异性蛋白酶6）浓度为1mg/ml，缓冲=0.01MTBS(pH7.4)，1%的BSA，0.03%的丙二醇和50%的甘油。Senp6core多克隆抗体（SUMO1sentrin特异性蛋白酶6）免疫原为KLH共轭合成肽，由人类的SENP2衍生而来。预测的分子量68kDa。短期储存在4℃，长期储存在-20℃(避免重复冷冻/解冻循环)。Senp6core多克隆抗体（SUMO1sentrin特异性蛋白酶6）用于WB时稀释浓度为1：500-2000=1：500-1000，免疫组化实验时稀释浓度为1：100-500。
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β-Actin作为内参是得到了公认的，这是针对大多数组织和细胞来说的，它广泛分布于细胞浆内，表达量非常丰富。Beta-actin由375个氨基酸组成，分子量大小为42-43kDa左右。
β-actin的蛋白水平通常不会发生改变，因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照，也常被用于免疫染色观察细胞的微丝结构。在用作Western的参照时，Actin抗体和Tubulin抗体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同，这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜上实现同时检测目标蛋白和参照蛋白。向左转|向右转
虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体，但是如果希望抗体特异性好点，能检测丰度低的蛋白，还是选Abcam吧，Santa有时候全凭人品了，内参抗体什么的还能凑活，其他的比较勉强。
虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体，但是如果希望抗体特异性好点，能检测丰度低的蛋白，还是选Abcam吧，Santa有时候全凭人品了，内参抗体什么的还能凑活，其他的比较勉强。
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为WesternBlot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候WesternBlot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。所以，严谨的WesternBlot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时，借助参照体系很容易就可以查出问题所在，而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括分子量Marker（用来确定蛋白条带对应的分子量大小），空白载体对照（如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照），已知量标准产物的正对照；另外还有内参。可是由于经费限制或者偷懒的原因，国内的不少人做Western Blot往往省略参照，导致结果出现问题时无法分析结果――即便有结果也可能影响结果的分析。
内参是最容易被忽略的一项。我们知道，要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础。特别表达量不高时，上样量的差别就很可能影响结果的分析。所以你需要内参。
内参即是内部参照（InternalControl），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(HousekeepingProteins)，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。
在国外发表的文章中，Western Blotting实验结果须进行内参校正已成为一种惯例。但是，国内仍有不少科研人员在WesternBlotting实验中忽略了内参的使用，将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的各种样品间上样量等同的唯一方法。然而各种蛋白质浓度定量方法，都存在局限性，不能完全准确的确定各种样品的准确蛋白浓度。如UV法直接定量，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质，相对于比色法来说，操作简单，但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰；且敏感度低，要求蛋白的浓度较高。比色法测定蛋白浓度一般有BCA，Bradford，Lowry等几种方法。BCA法与Lowry法都容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。Bradford 法敏感度最高，且与一系列干扰Lowry，BCA反应的还原剂（如DTT，巯基乙醇）相容。但是对于去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。另外，蛋白质定量以后进行电泳时需要等量上样，此步骤也存在操作误差。在Western blotting实验时使用内参，即可简便地对定量和上样步骤产生的误差进行校正。
在WesternBlotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。
实验结果分析其实很简单：如果样品蛋白量有限，只够进行一次电泳转膜实验时，分别检测样品的内参量和目的蛋白量。将各样品目的蛋白量分别除以其内参含量，得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量，再用此数值进行样品间的比较和分析，得到目的蛋白含量在不同样品间的实际变化结果。如果样品量充分，可以先检测内参，观测样品间内参显色条带是否一致，根据差异大小调整各样品的上样量重新进行Western Blotting实验，至内参量一致为止；若内参一致，即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。这样虽然麻烦一点，但是可以保证结果更有说服力，更可信。毕竟我们的实验是一种严谨的工作。
附：在Western Blotting实验过程中使用内参的方法有：
一、 超级简便的标记内参使用法：只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常操作即可。
二、普通内参：当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测。然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。
三、当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开。然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。
【摘自网络】展开
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因为内参有好几种，分子量差别也比较大，更换分子量与检测蛋白差距更大的内参就可以避免这个问题
另外也可以先用一抗孵育显色和检测，再用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参的抗体孵育显色检测。这样也可以将检测蛋白和内参显色在同一张膜上
