GT-T551isaculturemediumideallysuitedforexpansionofhumanTlymphocytes(Tcells).Itissupplementedwithhumanalbumin(pharmaceuticalgrade),recombinanthumaninsulin,L-glutamine,andstreptomycin;noadditionalproteinsorgrowthfactorsareadded.Themediumcansupportstablegrowthinthepresenceorabsenceofserum.Anti-CD3/IL-2T-cellactivationcanalsobeperformedinthismedium(Wangetal.2013;Aietal.2014;Dodoetal.2014).
GT-T551isaculturemediumideallysuitedforexpansionofhumanTlymphocytes(Tcells).Itissupplementedwithhumanalbumin(pharmaceuticalgrade),recombinanthumaninsulin,L-glutamine,andstreptomycin;noadditionalproteinsorgrowthfactorsareadded.Themediumcansupportstablegrowthinthepresenceorabsenceofserum.Anti-CD3/IL-2T-cellactivationcanalsobeperformedinthismedium(Wangetal.2013;Aietal.2014;Dodoetal.2014).Whenusingthisactivationmethod,theadditionalpresenceofRetroNectinreagentenhancestheproliferationofTcells(Yuetal.2008;Ishikawaetal.2014;Hosoietal.2014;Sakamotoetal.2015;Lietal.2015)andresultsinanexpandedcellpopulationthatshowsahigherproportionofnaïveTcellsthananti-CD3antibodystimulationalone(Hosoietal.2014).
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虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体，但是如果希望抗体特异性好点，能检测丰度低的蛋白，还是选Abcam吧，Santa有时候全凭人品了，内参抗体什么的还能凑活，其他的比较勉强。
我觉得封闭这一步时间长短多少并不能减少背景…背景过深多半还是抗体浓度过大…不管一抗还是二抗过大都会使背景加深…一抗的浓度不一定是条带清晰就是最佳了…联系进一步优化一下
这个主要还是抗体的问题，WB最主要的还是要选择一个特异性较好的抗体，抗体是整个实验的重中之重
虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体，但是如果希望抗体特异性好点，能检测丰度低的蛋白，还是选Abcam吧，Santa有时候全凭人品了，内参抗体什么的还能凑活，其他的比较勉强。
以上信息来自。
因为这个实验用到了抗体，抗体是特异识别某一种蛋白的，所以只要能检测到信号，说明样品中有该蛋白存在，如果有相应的对照，也能半定量说明该蛋白的量如何。
