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4adi/Anti-Mouse PiT1 (GLVR1) IgG #1, aff pure/100 ug/PIT11-A
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4adi/Anti-Mouse PiT1 (GLVR1) IgG #1, aff pure/100 ug/PIT11-A
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4adi
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PIT11-A
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Anti-Mouse PiT1 (GLVR1) IgG #1, aff pure

Antigen17-aa peptide of of mouse PiT-1/GLVR-1 (1) ; Designated (PIT11-P or control peptide) conjugated to KLH; epitope location ~ ~ within the 4th putative cytoplasmic domain
FormAffinity purified IgG
Product TypePrimary Antibodies
SpCrossreactivityThe PIT11-P peptide is 100% conserved in rat PiT-1/RPHO-1, 82% in human PiT-1.No significant sequence homology of PIT11-P is observed with PiT-2 orNaPi-Type I, -2, or IV transporters.Antibody crossreactivity in various species is not established
SpeciesReactivityMouse
SugApplicationsMost Antibodies are tested by ELISA and Western.Additional applications, such as IHC or IP may have been tested and will be listed in the product data sheets or published research papers using our products.Typically, antibodies are tested against the
SugNegativeControlNon-immune Rabbit IgG Cat# 20009-1
SugPositiveControlRecombinant or naturally purified proteins or cells of tissues expressing the protein under study can be used as positive controls for Western or IHC.Please review the ?General Information? tan under Product overview section.Control or blocking peptid
SugSecAntibodieshttp://4adi.com/commerce/ccc2480-secondary-antibodies-rabbit.htm
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product information Background H3K9me3 is a histone post-translational modification that is enriched in transcriptionally inactive regions. It is also important in cellular differentiation and maturation. P 查看更多>
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百度了一下,推荐了解了解:大肠杆菌gapA基因转录翻译的GAPDH蛋白的高度保守性,为制备大肠杆菌专用内参蛋白抗体提供可能,
测的是某种特定蛋白的量。或者是说测定某种蛋白是否存在于样品中,因为WB只能做半定量。
因为这个实验用到了抗体,抗体是特异识别某一种蛋白的,所以只要能检测到信号,说明样品中有该蛋白存在,如果有相应的对照,也能半定量说明该蛋白的量如何。
内参抗体种类很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Lamin B等,那么针对自己的实验,我们该如何选择呢?下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则:

一.样本种属来源:
首先要考虑的就是实验样本来源于什么物种。
1、哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na,K atpase等。

2、植物来源实验样本,则可以选择plantactin、Rubisco等。

3、其他来源样本研究较少,所以就应该参照文献报导,选择合适的蛋白作为内参。

二.目的蛋白分子量:
选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KD以上。比如目的蛋白分子量为45KD,此时不适宜选择β-actin作为内参,可以考虑选择GAPDH或者β-tubulin作为内参。

三.目的蛋白表达部位:
就一般的蛋白检测来说,β-actin、β-Tubulin抗体等就可以了,而针对于核蛋白的定量,特别是样本蛋白就是核蛋白时,选择恰当的核蛋白内参则更能体现内部参照的价值。常用的核内参抗体有Lamin A、Lamin B、Histone H3,除此之外,其它常见的核蛋白内参还有PCNA、K70、K80等,在一些文献报道中,Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。而对于膜蛋白检测,常用的内参抗体为Na,K ATPase。对于线粒体蛋白的检测,常用VDAC1和COX IV作为内参抗体。

以上几条原则只是针对通常情况,但是需要注意的问题是——内参的选择需要考虑实际的试验环境,比如某些细胞中,由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高,不适合做内参。比如在涉及细胞增殖相关试验中,c-Jun由于自身表达变化就不适合做内参;而在凋亡实验时,TBP、Lamin等也不适合作为内参。因此设计实验方案的时候应该考虑这些因素并查询相应文献,在实验过程中也应该注意如果内参表达出现异常,应考虑这方面因素。
请教各位,我买的CST的beta-actin(#3700)抗体,说明书上的图片只有一条特异性条带(见图),为什么我做的实际情况是有很多杂带,我做的是脑组织蛋白,这个是怎么回事?
actin
GAPDH
万能内参
主要看你的目标蛋白的分子量多大,“目标蛋白要与内参蛋白的分子量差异大!”
方便检测
核蛋白,有很多种,分子量不同
膜蛋白,有很多很多种,分子量不同
浆蛋白,有成千上万种,分子量不同。
具体实验,具体目的蛋白,具体的内参。
最近准备做WB,但是对抗体选择还是很困惑,作为生手我担心用单克隆抗体做不出条带(看网上写的多克隆的效价高),但是发现要买的一抗abcam 只有单克隆,那我的内参GAPDH 也要买单克隆抗体么? 谢谢!如果买单克隆的内参抗体国内的杭州至贤的产品 有用过的么? 谢谢!
内个,个人觉得比较价格还是很有说服力的,一分价钱一分货。
虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体,但是如果希望抗体特异性好点,能检测丰度低的蛋白,还是选Abcam吧,Santa有时候全凭人品了,内参抗体什么的还能凑活,其他的比较勉强。
一抗多稀释点试试
我觉得封闭这一步时间长短多少并不能减少背景…背景过深多半还是抗体浓度过大…不管一抗还是二抗过大都会使背景加深…一抗的浓度不一定是条带清晰就是最佳了…联系进一步优化一下

这个主要还是抗体的问题,WB最主要的还是要选择一个特异性较好的抗体,抗体是整个实验的重中之重
最近做western越来越讨厌手上的这支内参gapdh。效价低不说,还最多只能用两次!条带也不够亮,还有背景。看到坛子里有人用1:10000还能回收好多次,不禁心生羡慕。故求助下哪家的内参抗体比较好?原装分装国产进口都可以。谢谢!~
一直没做出来这个,目的条带倒是可以做出条带
请问有做GAPDH为内参的吗?一抗二抗的浓度时多少?最好是santacruz的抗体。多谢!
内个,个人觉得比较价格还是很有说服力的,一分价钱一分货。
虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体,但是如果希望抗体特异性好点,能检测丰度低的蛋白,还是选Abcam吧,Santa有时候全凭人品了,内参抗体什么的还能凑活,其他的比较勉强。
如何选择内参抗体? 123
五味子1012021-08-11
我要做两个指标,检测这两个指标分别在大鼠和人肝癌细胞中的表达。
其中一个指标的一抗来源于兔,另一个一抗来源于鼠。前几天跟试剂公司联系购买内参抗体时,他们说内参抗体是根据目的蛋白的一抗来定的,要我买两个内参抗体和相应的二抗,这让我感到很纳闷。我想知道内参的选择是根据什么原则?
我觉得内参只是一个参照,内参抗体跟目的蛋白的一抗有直接联系吗?有没有可以通用于人肝癌细胞和大鼠肝癌细胞的内参抗体,能否帮忙推荐一个,谢谢.
在图书馆也没有找到这方面很详细和确切的论述,急切期盼您的指导!!!谢谢!!!
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