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Mouse IgG2b ELISA Kit, 96 tests, Quantitative
| Form | Stds=5-100 ng/ml; Sample=100 ul; Sensitivity= 2 ng/ml; 105 min assay; Quantitative, Sandwich, 96 tests |
| KitContents | 1.Anti-Mouse IgG2b coated strip plate (8 wells x 12 strips) 63512.Mouse IgG2b Std. A (0 ng/ml), 0.220 ml63523.IgG Std B (25 ng/ml), 0.220 ml63534.IgG Std C (50 ng/ml), 0. 220 ml63545.IgG Std D (100 ng/ml), 0. 220 ml63556.IgG Std E (250 ng/ml), 0. 220 ml63567.IgG Std F (500 ng/ml), 0. 220 ml63578.IgG Std G (1000 ng/ml), 0. 220 ml63589.Sample Diluent (20X), 10 mlSD-20T10.Wash Buffer (100X), 10 mlWB-10011.100x Anti-mouse IgG2b-HRP Conjugate,0.12 ml 635912.TMB Substrate, 12 ml8009113.Stop solution, 12 ml8010114.Instruction ManualM-6350 |
| MSDS | TMB (substrate), H2SO4 (1% in a buffered stop solution), and Prolcin-300 (0.1% v/v in standards, sample diluent and HRP-conjugates |
| Product Type | Kit |
| Samples | Serum. Plasma, Culture medium and other fluids may be adapted |
| SpCrossreactivity | The antibodies used in this kit are specific for IgG2b with no significant reactivity to IgG1, 2a-3 or IgA, IgM, or IgE.Mouse IgG2a ELISA kit species crossreactivity was tested with the following animal serum at dilutions of 1:500: No significant crossreactivity was observed with Rat, Hamster, Guinea Pig, Rabbit, Human, Monkey, Goat, Sheep, FBS, Bovine, Pig, and Chicken serum IgG2a. |
| SpeciesReactivity | Mouse |
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2018-06-29
BSB 58951 EacdiCancer diagnosticsCancer diagnostics/Prolactin, 5 + control slides/BSB 5895/1 Ea 查看更多
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2021-07-22
武汉艾美捷科技有限公司最新产品宣传文章《GAPDH内参抗体-高性价GAPDH内参抗体比在此》。中国仪器网，致力打造仪器行业互动门户。 查看更多
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2021-08-06
Wako（和光纯药工业株式会社）在发布的Endotoxin Extracting Solution for LAL Test供应信息，浏览与Endotoxin Extracting Solution for LAL Test相关的产品或在搜索更多与Endotoxin Extracting Solution for LAL Test相关的内容。 查看更多
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2018-06-16
product information Background Beta-Actin is a conserved protein involved in cell motility, structure and integrity, tissue development and the development of organism. Actin is expressed at high 查看更多
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2021-09-09
上海研生实业有限公司所提供的Anti-β-Actin β-肌动蛋白抗体质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2018-06-02
product information Background GAPDH is a protein that has both glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase and nitrosylase functions, therefore it plays an important role in both glycolysis and 查看更多
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2021-08-16
货号：ALX-804-405-C100 查看更多
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2018-07-15
产品名称： Cutaneous T-cell Attracting Chemokine (CTACK) elisa 试剂盒 国内优质ELISA厂家 产品简介： Cutaneous T-cell Attracting Chemokine (CTACK) elisa 试剂盒 国内优质ELISA厂家 ELISA试剂盒 国产现货 SIXIN生产的优质ELISA试剂盒直供全国。http://www.aatbio.com.cn/elisa/ Cut 查看更多
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2021-08-14
广州华剑生物科技有限公司在发布的ActinomycinD 放线菌素D供应信息，浏览与ActinomycinD 放线菌素D相关的产品或在搜索更多与ActinomycinD 放线菌素D相关的内容。 查看更多
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2018-06-22
IT54211 x 96-well plategbiosciencesG-biosciencesGbiosciences/Immunotag™ Mouse Aimp1 ( Aminoacyl tRNA synthase complex-interacting multifunctional protein 1) ELISA/1 x 96-wel 查看更多
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《Abbkine常规二抗及标签和内参抗体2013》—艾美捷产品折页 查看更多
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2021-07-17
为了更好的方便客户使用，联科生物现推出40ul的小包装内参、标签抗体，全部现货供应。 为什么选择联科的内参、标签抗体： 查看更多
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Western Blot为什么必须要用内参 123
舆论小雪95筧2017-11-05
Western Blot为什么必须要用内参
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为WesternBlot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候WesternBlot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。所以，严谨的WesternBlot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时，借助参照体系很容易就可以查出问题所在，而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括分子量Marker（用来确定蛋白条带对应的分子量大小），空白载体对照（如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照），已知量标准产物的正对照；另外还有内参。可是由于经费限制或者偷懒的原因，国内的不少人做Western Blot往往省略参照，导致结果出现问题时无法分析结果――即便有结果也可能影响结果的分析。
内参是最容易被忽略的一项。我们知道，要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础。特别表达量不高时，上样量的差别就很可能影响结果的分析。所以你需要内参。
内参即是内部参照（InternalControl），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(HousekeepingProteins)，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。
在国外发表的文章中，Western Blotting实验结果须进行内参校正已成为一种惯例。但是，国内仍有不少科研人员在WesternBlotting实验中忽略了内参的使用，将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的各种样品间上样量等同的唯一方法。然而各种蛋白质浓度定量方法，都存在局限性，不能完全准确的确定各种样品的准确蛋白浓度。如UV法直接定量，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质，相对于比色法来说，操作简单，但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰；且敏感度低，要求蛋白的浓度较高。比色法测定蛋白浓度一般有BCA，Bradford，Lowry等几种方法。BCA法与Lowry法都容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。Bradford 法敏感度最高，且与一系列干扰Lowry，BCA反应的还原剂（如DTT，巯基乙醇）相容。但是对于去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。另外，蛋白质定量以后进行电泳时需要等量上样，此步骤也存在操作误差。在Western blotting实验时使用内参，即可简便地对定量和上样步骤产生的误差进行校正。
在WesternBlotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。
实验结果分析其实很简单：如果样品蛋白量有限，只够进行一次电泳转膜实验时，分别检测样品的内参量和目的蛋白量。将各样品目的蛋白量分别除以其内参含量，得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量，再用此数值进行样品间的比较和分析，得到目的蛋白含量在不同样品间的实际变化结果。如果样品量充分，可以先检测内参，观测样品间内参显色条带是否一致，根据差异大小调整各样品的上样量重新进行Western Blotting实验，至内参量一致为止；若内参一致，即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。这样虽然麻烦一点，但是可以保证结果更有说服力，更可信。毕竟我们的实验是一种严谨的工作。
附：在Western Blotting实验过程中使用内参的方法有：
一、 超级简便的标记内参使用法：只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常操作即可。
二、普通内参：当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测。然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。
三、当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开。然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。
【摘自网络】展开
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为WesternBlot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候WesternBlot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。所以，严谨的WesternBlot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时，借助参照体系很容易就可以查出问题所在，而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括分子量Marker（用来确定蛋白条带对应的分子量大小），空白载体对照（如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照），已知量标准产物的正对照；另外还有内参。可是由于经费限制或者偷懒的原因，国内的不少人做Western Blot往往省略参照，导致结果出现问题时无法分析结果――即便有结果也可能影响结果的分析。
内参是最容易被忽略的一项。我们知道，要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础。特别表达量不高时，上样量的差别就很可能影响结果的分析。所以你需要内参。
内参即是内部参照（InternalControl），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(HousekeepingProteins)，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。
在国外发表的文章中，Western Blotting实验结果须进行内参校正已成为一种惯例。但是，国内仍有不少科研人员在WesternBlotting实验中忽略了内参的使用，将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的各种样品间上样量等同的唯一方法。然而各种蛋白质浓度定量方法，都存在局限性，不能完全准确的确定各种样品的准确蛋白浓度。如UV法直接定量，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质，相对于比色法来说，操作简单，但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰；且敏感度低，要求蛋白的浓度较高。比色法测定蛋白浓度一般有BCA，Bradford，Lowry等几种方法。BCA法与Lowry法都容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。Bradford 法敏感度最高，且与一系列干扰Lowry，BCA反应的还原剂（如DTT，巯基乙醇）相容。但是对于去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。另外，蛋白质定量以后进行电泳时需要等量上样，此步骤也存在操作误差。在Western blotting实验时使用内参，即可简便地对定量和上样步骤产生的误差进行校正。
在WesternBlotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。
实验结果分析其实很简单：如果样品蛋白量有限，只够进行一次电泳转膜实验时，分别检测样品的内参量和目的蛋白量。将各样品目的蛋白量分别除以其内参含量，得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量，再用此数值进行样品间的比较和分析，得到目的蛋白含量在不同样品间的实际变化结果。如果样品量充分，可以先检测内参，观测样品间内参显色条带是否一致，根据差异大小调整各样品的上样量重新进行Western Blotting实验，至内参量一致为止；若内参一致，即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。这样虽然麻烦一点，但是可以保证结果更有说服力，更可信。毕竟我们的实验是一种严谨的工作。
附：在Western Blotting实验过程中使用内参的方法有：
一、 超级简便的标记内参使用法：只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常操作即可。
二、普通内参：当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测。然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。
三、当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开。然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。
【摘自网络】展开
Western Blot内参抗体选择原则 实验方法123
他曾像风一样自由2021-07-30
如何选择内参抗体 生物科学 123
wenshl20052021-08-04
免疫组化和 western blot 有什么区别 123
萝卜71054讯芭2021-08-10
免疫组化利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。
所以免疫组化在组织定位和定性上比较准确，但是在定量上不够准确。
western blot也是利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品，转移到固相载体上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应。
western blot因为有内参标定，所以在定量上要更加准确。但是在组织定位上不如免疫组化
所以免疫组化在组织定位和定性上比较准确，但是在定量上不够准确。
western blot也是利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品，转移到固相载体上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应。
western blot因为有内参标定，所以在定量上要更加准确。但是在组织定位上不如免疫组化
【求助】我的βactin出好多杂带~~怎么办? 经验共享 分析测试...123
Minniemori2021-08-02
HRP标记GAPDH内参抗体 AntiGAPDH Monoclonal AntibodyHRP阿...123
geanslion2021-07-27
客户订错了该产品，有需要得PM我。
线粒体内参抗体 123
大脸龙猫2021-08-07
各位大神，有谁做WB，选用球虫的GADPH作为内参？知道哪个公司有针对球虫内参的抗体？
【求助】GAPDH分子量 蛋白质和糖学论坛123
水月天abc2021-07-21
各位亲爱的同仁，大家做western是选择GAPDH内参时，都用什么公司的抗体啊？求推荐啊！样品来源是大鼠组织的，不好做~β-actin容易出好多条杂带~
【求助】内参抗体选择单克隆还是多克隆?wb新手迷茫中 蛋白质和...123
bearandpanda2012-12-11
最近准备做WB，但是对抗体选择还是很困惑，作为生手我担心用单克隆抗体做不出条带（看网上写的多克隆的效价高），但是发现要买的一抗abcam 只有单克隆，那我的内参GAPDH 也要买单克隆抗体么？ 谢谢！如果买单克隆的内参抗体国内的杭州至贤的产品 有用过的么？ 谢谢！
【求助】GAPDH做内参,请问有做出条带的条件(抗体浓度),多谢 蛋白质...123
cola98972021-08-09
western blot目的蛋白和内参分子量差距太大怎么办? 123
mu18C2017-09-28
检测蛋白和内参分子量接近最好的办法就是更换内参
因为内参有好几种，分子量差别也比较大，更换分子量与检测蛋白差距更大的内参就可以避免这个问题
另外也可以先用一抗孵育显色和检测，再用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参的抗体孵育显色检测。这样也可以将检测蛋白和内参显色在同一张膜上
因为内参有好几种，分子量差别也比较大，更换分子量与检测蛋白差距更大的内参就可以避免这个问题
另外也可以先用一抗孵育显色和检测，再用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参的抗体孵育显色检测。这样也可以将检测蛋白和内参显色在同一张膜上
如何选择内参抗体 第2 页 生物科学 学术科研互动社区123
☆镜音★Y1q2017-09-28
actin
GAPDH
万能内参
主要看你的目标蛋白的分子量多大，“目标蛋白要与内参蛋白的分子量差异大！”
方便检测
核蛋白，有很多种，分子量不同
膜蛋白，有很多很多种，分子量不同
浆蛋白，有成千上万种，分子量不同。
具体实验，具体目的蛋白，具体的内参。
GAPDH
万能内参
主要看你的目标蛋白的分子量多大，“目标蛋白要与内参蛋白的分子量差异大！”
方便检测
核蛋白，有很多种，分子量不同
膜蛋白，有很多很多种，分子量不同
浆蛋白，有成千上万种，分子量不同。
具体实验，具体目的蛋白，具体的内参。
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