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eylabs
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Texas Red Conjugated Goat Affinity Purified Antibody to Human IgG, 2mL

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[[5µg,ABP-FP-WALAC]]Alleleustrious pmWasabi-alpha-actinin is a mammalian expression vector that encodes a fusion of human alpha-actinin (ACTN1) N-terminal to mWASABI. It can be a great tool for visualizing cytoskel 查看更多>
上海研生实业有限公司所提供的Anti-β-Actin  β-肌动蛋白抗体质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息! 查看更多>
2021-08-01
你有这些烦恼吗?!实验样品种属是果蝇、拟南芥、斑马鱼而找不到合适的内参抗体?要做线粒体蛋白或核蛋白等亚细胞组分而找不到对应的内参抗体?CMCTAG品牌提供覆盖各个模式生物以及不同亚细胞组分的内参抗体,让您的这些烦恼迎刃而解!我们的优势: 高效价(1:5000-1:1万),无条件退换货,零风险。 内参抗体、HRP标记内参抗体,HRP直标抗体可以无需孵育二抗,直接发光液显影,更方便。 胞浆蛋白内参抗体、核蛋白内参抗体、线粒体蛋白内参抗体... 查看更多>
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520470.5 mgbpsbioscienceBPS Bioscience Inc.Bpsbioscience/Histone H3, Full Length, Biotin-labeled, His-tag/52047/0.5 mg 查看更多>
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M10-127S10 µg​reliatechgmbhReceptor Ligand Technologies GmbHReliaTech/Mouse Prolactin/M10-127S/10 µg 查看更多>
product information Background GAPDH is a protein that has both glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase and nitrosylase functions, therefore it plays an important role in both glycolysis and 查看更多>
product information Background H3K9me3 is a histone post-translational modification that is enriched in transcriptionally inactive regions. It is also important in cellular differentiation and maturation. P 查看更多>
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我用过他们的抗体,他们主要做些信号转导方面的抗体和修饰性抗体,好像还帮人做抗体的定制,有些磷酸化的,其他的还有点,我没有注意,我以前做过ERK通路介导细胞凋亡的,买过他们的P-ERK和ERK一对,效果挺好的
Western Blot内参抗体选择原则 实验方法123
他曾像风一样自由2021-07-30
请问westernblot什么时候加内参的抗体呀?有内参的一抗二抗吗?
跑电泳后就要把胶切开吗?(把目和蛋白条带和内参条带分开)还是等转膜完成后,再将目的蛋白条带和内参跳海分开呢?
内参蛋白的表达量一般比较大,而且内参蛋白的抗体通常比较好用。你要杂的目的蛋白可能表达量要远小于内参蛋白,又可能是目的蛋白的抗体不好用。因此可以考虑浓缩你的蛋白样品(增加细胞量、减少裂解液等方法)、增加目的蛋白抗体浓度、更换目的蛋白抗体。另外,化学发光试剂也可以换用更好的,比如GE公司的,虽然价格贵,但是灵敏度要比国产的试剂高出很多,希望能够帮到你。
很正常。内参有证明蛋白样品没问题。没有目的带原因很多。1.目的蛋白是否表达量很低,因为内参表达是很高的。2.抗体的选择是否有问题,有没有阳性对照?? 是一点都没有?还是能看到一点点?
高保真生物技术有限公司~实验整体外包服务商~
请教各位,我买的CST的beta-actin(#3700)抗体,说明书上的图片只有一条特异性条带(见图),为什么我做的实际情况是有很多杂带,我做的是脑组织蛋白,这个是怎么回事?
客户订错了该产品,有需要得PM我。
请教各位:在做细胞核内蛋白的表达时,选择内参是PCNA好还是TBP好?目前国内的那家公司的更可靠?谢谢!
科研思路和方法作业123
若情初心2021-08-06
请教大鼠MCAO模型检测ZO-1免疫组化所用抗体,内参以及引物设计?
western内参GAPDH123
wqdwqdqdwqd2021-07-20
GAPDH可以作为胃癌临床样本组织westernblot的内参抗体吗?
内参抗体种类很多,比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、Lamin B等,那么针对自己的实验,我们该如何选择呢?下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则:

一.样本种属来源:
首先要考虑的就是实验样本来源于什么物种。
1、哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na,K atpase等。

2、植物来源实验样本,则可以选择plantactin、Rubisco等。

3、其他来源样本研究较少,所以就应该参照文献报导,选择合适的蛋白作为内参。

二.目的蛋白分子量:
选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KD以上。比如目的蛋白分子量为45KD,此时不适宜选择β-actin作为内参,可以考虑选择GAPDH或者β-tubulin作为内参。

三.目的蛋白表达部位:
就一般的蛋白检测来说,β-actin、β-Tubulin抗体等就可以了,而针对于核蛋白的定量,特别是样本蛋白就是核蛋白时,选择恰当的核蛋白内参则更能体现内部参照的价值。常用的核内参抗体有Lamin A、Lamin B、Histone H3,除此之外,其它常见的核蛋白内参还有PCNA、K70、K80等,在一些文献报道中,Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。而对于膜蛋白检测,常用的内参抗体为Na,K ATPase。对于线粒体蛋白的检测,常用VDAC1和COX IV作为内参抗体。

以上几条原则只是针对通常情况,但是需要注意的问题是——内参的选择需要考虑实际的试验环境,比如某些细胞中,由于组织缺氧、糖尿病等因素会导致GAPDH的表达增高,不适合做内参。比如在涉及细胞增殖相关试验中,c-Jun由于自身表达变化就不适合做内参;而在凋亡实验时,TBP、Lamin等也不适合作为内参。因此设计实验方案的时候应该考虑这些因素并查询相应文献,在实验过程中也应该注意如果内参表达出现异常,应考虑这方面因素。
免疫组化利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。
所以免疫组化在组织定位和定性上比较准确,但是在定量上不够准确。
western blot也是利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品,转移到固相载体上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应。
western blot因为有内参标定,所以在定量上要更加准确。但是在组织定位上不如免疫组化
βActin 和GAPDH简介 123
张凯6962021-07-25
β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数。内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白。它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。常用的蛋白质内参有细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin和GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)等。因此β-Actin抗体、β-Tubulin抗体以及GAPDH抗体成为最常见的三个动物细胞内参抗体。
β-Actin作为内参是得到了公认的,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞浆内,表达量非常丰富。Beta-actin由375个氨基酸组成,分子量大小为42-43kDa左右。
β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照,也常被用于免疫染色观察细胞的微丝结构。在用作Western的参照时,Actin抗体和Tubulin抗体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同,这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜上实现同时检测目标蛋白和参照蛋白。向左转|向右转
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