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PTEN (Phospho-Ser370) AntibodyPDF
Catalog Number:
E011062-2Amount:
100μg/100μlForm of Antibody:
Rabbit IgG in phosphate buffered saline (without Mg2+ and Ca2+), pH 7.4, 150mM NaCl, 0.02% sodium azide and 50% glycerol.Storage/Stability:
Store at -20℃/1 yearImmunogen:
The antiserum was produced against synthesized phosphopeptide derived from human PTEN around the phosphorylation site of serine 370 (D-V-SP-D-N).Purification:
The antibody was affinity-purified from rabbit antiserum by affinity-chromatography using epitope-specific phosphopeptide. The antibody against non-phosphopeptide was removed by chromatogramphy using non-phosphopeptide corresponding to the phosphorylation site.Specificity/Sensitivity:
PTEN (phospho-Ser370) antibody detects endogenous levels of PTEN only when phosphorylated at serine 370.Reactivity:
Human, Mouse, RatApplications:
WB: 1:500~1:1000 IHC: 1:50~1:100Swiss-Prot No.:
P60484References:
Al-Khouri AM, et al. (2005). J Biol Chem.280 (42):35195-35202.Miller SJ, et al. (2002). FEBS Lett. 528(1-3): 145-153.Torres J, et al. (2001). J Biol Chem.276 (2): 993-998.Vazquez F, et al. (2000). Mol Cell Biol.20 (14): 5010-5018.P-Peptide - +Immunohistochemical analysis of paraffin- embedded human breast carcinoma tissue using PTEN (phospho-Ser370) antibody (E011062).
Western blot analysis of extracts from HeLa cells using PTEN (phospho-Ser370) antibody (E011062).
Price:
225$Research Area:
Autophagy antibody Cancer Cardiovascular Cell Biology Epigenetics & Nuclear Signaling Developmental Biologys Immunology Drug Discovery Products Metabolism Neuroscience Signal Transduction Stem Cells
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2018-06-28
product information Background Actin is a highly conserved protein and an essential component of cell cytoskeleton and plays an important role in cytoplasmic streaming, cell shape determination, cell divisi 查看更多
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2018-06-29
BSB 58951 EacdiCancer diagnosticsCancer diagnostics/Prolactin, 5 + control slides/BSB 5895/1 Ea 查看更多
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2019-07-14
南京恩晶生物科技有限公司在发布的恩晶生物抗体买一送三（内参抗体，二抗和积分）供应信息，浏览与恩晶生物抗体买一送三（内参抗体，二抗和积分）相关的产品或在搜索更多与恩晶生物抗体买一送三（内参抗体，二抗和积分）相关的内容。 查看更多
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广州威佳科技有限公司在发布的Rat Prolactin (PRL) ELISA供应信息，浏览与Rat Prolactin (PRL) ELISA相关的产品或在搜索更多与Rat Prolactin (PRL) ELISA相关的内容。 查看更多
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2021-08-28
常州贝源鑫生物科技有限公司在发布的纯化微管蛋白（Tubulin）供应信息，浏览与纯化微管蛋白（Tubulin）相关的产品或在搜索更多与纯化微管蛋白（Tubulin）相关的内容。 查看更多
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2021-08-26
上海研生实业有限公司所提供的Anti-Bim（Bcl-2 interacting mediator of cell death）质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2018-07-15
产品词：AB 1116 Prolactinaaltobioreagents AB 1116 Prolactin，aaltobioreagents报价。中国试剂网提供aaltobioreagents报价等实验试剂、实验耗材、实验仪器及实验技术服务。欢迎来电订购AB 1116 Prolactin产品，咨询报价。http://www.aatbio.com.cn/goodsid/fenleisan/3200091_aaltobioreagent 查看更多
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2018-05-28
IRWBE0351mgiraInnovative ResearchInnovative Research/Rabbit Actin/IRWBE035/1mg 查看更多
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[[100μg, ABP-MAB-BL002]]Recognizes native and denatured forms of β-Actin (~42kDa)Product Description Download/Print: 查看更多
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2018-06-26
LVP446-R1 EagentargetGentargetGentarget/RFP-Actin (Puro) fusion lentiviral particles/LVP446-R/1 Ea 查看更多
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2018-05-27
上海冰晴生物科技有限公司在发布的anti-Histone H3(tri methyl K79) Mouse Monoclonal antibody(3A8)供应信息，浏览与anti-Histone H3(tri methyl K79) Mouse Monoclonal antibody(3A8)相关的产品或在搜索更多与anti-Histone H3(tri methyl K79) Mouse Monoclonal antibody(3A8)相关的内容。 查看更多
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Western Blot为什么必须要用内参 123
舆论小雪95筧2017-11-05
Western Blot为什么必须要用内参
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为WesternBlot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候WesternBlot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。所以，严谨的WesternBlot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时，借助参照体系很容易就可以查出问题所在，而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括分子量Marker（用来确定蛋白条带对应的分子量大小），空白载体对照（如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照），已知量标准产物的正对照；另外还有内参。可是由于经费限制或者偷懒的原因，国内的不少人做Western Blot往往省略参照，导致结果出现问题时无法分析结果――即便有结果也可能影响结果的分析。
内参是最容易被忽略的一项。我们知道，要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础。特别表达量不高时，上样量的差别就很可能影响结果的分析。所以你需要内参。
内参即是内部参照（InternalControl），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(HousekeepingProteins)，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。
在国外发表的文章中，Western Blotting实验结果须进行内参校正已成为一种惯例。但是，国内仍有不少科研人员在WesternBlotting实验中忽略了内参的使用，将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的各种样品间上样量等同的唯一方法。然而各种蛋白质浓度定量方法，都存在局限性，不能完全准确的确定各种样品的准确蛋白浓度。如UV法直接定量，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质，相对于比色法来说，操作简单，但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰；且敏感度低，要求蛋白的浓度较高。比色法测定蛋白浓度一般有BCA，Bradford，Lowry等几种方法。BCA法与Lowry法都容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。Bradford 法敏感度最高，且与一系列干扰Lowry，BCA反应的还原剂（如DTT，巯基乙醇）相容。但是对于去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。另外，蛋白质定量以后进行电泳时需要等量上样，此步骤也存在操作误差。在Western blotting实验时使用内参，即可简便地对定量和上样步骤产生的误差进行校正。
在WesternBlotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。
实验结果分析其实很简单：如果样品蛋白量有限，只够进行一次电泳转膜实验时，分别检测样品的内参量和目的蛋白量。将各样品目的蛋白量分别除以其内参含量，得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量，再用此数值进行样品间的比较和分析，得到目的蛋白含量在不同样品间的实际变化结果。如果样品量充分，可以先检测内参，观测样品间内参显色条带是否一致，根据差异大小调整各样品的上样量重新进行Western Blotting实验，至内参量一致为止；若内参一致，即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。这样虽然麻烦一点，但是可以保证结果更有说服力，更可信。毕竟我们的实验是一种严谨的工作。
附：在Western Blotting实验过程中使用内参的方法有：
一、 超级简便的标记内参使用法：只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常操作即可。
二、普通内参：当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测。然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。
三、当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开。然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。
【摘自网络】展开
要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。因为WesternBlot操作相对简单方便，既可以定性分析表达产物，同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然，顺利的时候WesternBlot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物，确实是有一定的不确定性的。所以，严谨的WesternBlot实验设计中要求有良好的参照体系，对实验结果分析是非常有用。特别是当实验出现问题时，借助参照体系很容易就可以查出问题所在，而不必抓耳挠腮怨天尤人。良好的参照体系通常包括分子量Marker（用来确定蛋白条带对应的分子量大小），空白载体对照（如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照），已知量标准产物的正对照；另外还有内参。可是由于经费限制或者偷懒的原因，国内的不少人做Western Blot往往省略参照，导致结果出现问题时无法分析结果――即便有结果也可能影响结果的分析。
内参是最容易被忽略的一项。我们知道，要用Western Blot比较不同条件下或者不同组织中，目的蛋白表达量的相对多少，前提条件是等量的细胞上样，才有比较的基础。特别表达量不高时，上样量的差别就很可能影响结果的分析。所以你需要内参。
内参即是内部参照（InternalControl），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(HousekeepingProteins)，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中，除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等步骤以外，还需要进行内参的检测，以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。
在国外发表的文章中，Western Blotting实验结果须进行内参校正已成为一种惯例。但是，国内仍有不少科研人员在WesternBlotting实验中忽略了内参的使用，将蛋白浓度测定作为规范需相互比较的各种样品间上样量等同的唯一方法。然而各种蛋白质浓度定量方法，都存在局限性，不能完全准确的确定各种样品的准确蛋白浓度。如UV法直接定量，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质，相对于比色法来说，操作简单，但是容易受到平行物质的干扰，如DNA的干扰；且敏感度低，要求蛋白的浓度较高。比色法测定蛋白浓度一般有BCA，Bradford，Lowry等几种方法。BCA法与Lowry法都容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。Bradford 法敏感度最高，且与一系列干扰Lowry，BCA反应的还原剂（如DTT，巯基乙醇）相容。但是对于去污剂依然是敏感的，其最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。另外，蛋白质定量以后进行电泳时需要等量上样，此步骤也存在操作误差。在Western blotting实验时使用内参，即可简便地对定量和上样步骤产生的误差进行校正。
在WesternBlotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差，这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。
实验结果分析其实很简单：如果样品蛋白量有限，只够进行一次电泳转膜实验时，分别检测样品的内参量和目的蛋白量。将各样品目的蛋白量分别除以其内参含量，得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量，再用此数值进行样品间的比较和分析，得到目的蛋白含量在不同样品间的实际变化结果。如果样品量充分，可以先检测内参，观测样品间内参显色条带是否一致，根据差异大小调整各样品的上样量重新进行Western Blotting实验，至内参量一致为止；若内参一致，即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。这样虽然麻烦一点，但是可以保证结果更有说服力，更可信。毕竟我们的实验是一种严谨的工作。
附：在Western Blotting实验过程中使用内参的方法有：
一、 超级简便的标记内参使用法：只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常操作即可。
二、普通内参：当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测。然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。
三、当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开。然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育，二抗温育以及显色。
【摘自网络】展开
western blotting到底是测某种蛋白的量的还是细胞内总蛋白的量啊?...123
一抹纯粹wx2017-09-28
测的是某种特定蛋白的量。或者是说测定某种蛋白是否存在于样品中，因为WB只能做半定量。
因为这个实验用到了抗体，抗体是特异识别某一种蛋白的，所以只要能检测到信号，说明样品中有该蛋白存在，如果有相应的对照，也能半定量说明该蛋白的量如何。
因为这个实验用到了抗体，抗体是特异识别某一种蛋白的，所以只要能检测到信号，说明样品中有该蛋白存在，如果有相应的对照，也能半定量说明该蛋白的量如何。
【新手福利】初识 外泌体 七 123
科研大人xiu2021-08-05
有用过Abbkine抗体帮忙回答一下哦
【求助】我的βactin出好多杂带~~怎么办? 经验共享 分析测试...123
Minniemori2021-08-02
wb内参可以跑出来,目的基因条带却没有123
晋友灵2017-11-05
很正常。内参有证明蛋白样品没问题。没有目的带原因很多。1.目的蛋白是否表达量很低，因为内参表达是很高的。2.抗体的选择是否有问题，有没有阳性对照？？ 是一点都没有？还是能看到一点点？
高保真生物技术有限公司~实验整体外包服务商~
高保真生物技术有限公司~实验整体外包服务商~
...我的一抗是小鼠来源的,二抗是山羊抗小鼠的;针对内参βactin的...123
丁香学人2021-07-24
【求助】wb目的蛋白和内参(betaactin)都没有曝出... 经验共享 ...123
云水木石2021-07-23
请教各位：在做细胞核内蛋白的表达时，选择内参是PCNA好还是TBP好？目前国内的那家公司的更可靠？谢谢！
Western Blot内参抗体选择原则 Elabscience123
flying_122021-08-03
用大肠杆菌跑western用什么做内参 蛋白质和糖学技术讨论版...123
SE0000002842021-07-28
百度了一下，推荐了解了解：大肠杆菌gapA基因转录翻译的GAPDH蛋白的高度保守性,为制备大肠杆菌专用内参蛋白抗体提供可能,
线粒体内参抗体 123
大脸龙猫2021-08-07
各位大神，有谁做WB，选用球虫的GADPH作为内参？知道哪个公司有针对球虫内参的抗体？
Western Blot内参抗体选择原则 实验方法123
他曾像风一样自由2021-07-30
如何选择内参抗体? 123
五味子1012021-08-11
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