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IHCWORLD/Anti-14-3-3 Antibody (C-Terminus) IHC-plus LS-B7705/1/LS-B7705
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IHCWORLD/Anti-14-3-3 Antibody (C-Terminus) IHC-plus LS-B7705/1/LS-B7705
品牌 / 
IHCWORLD
货号 / 
LS-B7705
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  • Presentation: 10 mM HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 g per ml BSA and 50% glycerol.

  • Target Species: Rat

  • Host Species: Rabbit

  • Specificity: Specific for the ~29k 14-3-3 protein. Immunolabeling of the 14-3-3 protein band is completely blocked by pre-adsorption of the antibody with the C-terminal peptide that was used to generate the antibody

  • Reactivity: Xenopus, Chicken, Bovine, Mouse, Dog, Rat, Human

  • Usage: IHC-P (1:100), WB (1:1000)

  • Synonyms:

  • Concentration:

  • Volume: 50 µl

  • Immunogen: Peptide corresponding to amino acid residues from the C-terminal region of 14-3-3 protein, conjugated to keyhole limpet hemocyanin (KLH).
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    2021-08-02
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    一抗多稀释点试试
    我觉得封闭这一步时间长短多少并不能减少背景…背景过深多半还是抗体浓度过大…不管一抗还是二抗过大都会使背景加深…一抗的浓度不一定是条带清晰就是最佳了…联系进一步优化一下

    这个主要还是抗体的问题,WB最主要的还是要选择一个特异性较好的抗体,抗体是整个实验的重中之重
    内参抗体(Internal Control Antibody)是对内参蛋白进行检测,以校正蛋白定量过程中的实验误差以及验证转膜、显色等步骤是否正常!常用的内参包含 GAPDH、β-actin和β-tubulin;及线粒体内参COX IV和核内参HistoneH3和PCNA等
    内参抗体:
    Beta-Actin mAb (1C7) 细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01010 小鼠源单克隆
    Beta-Actin mAb (1C7) , HRP 细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01015 小鼠源单克隆,HRP偶联
    GAPDH mAb (2B5) 细胞总蛋白 36 kD Abbkine A01020 小鼠源单克隆
    GAPDH mAb (2B5) , HRP 细胞总蛋白 36 kD Abbkine A01025 小鼠源单克隆,HRP偶联
    Beta-Tubuline mAb (3G6) 细胞总蛋白 55 kD Abbkine A01030 小鼠源单克隆
    Plant Actin mAb (3T3) 植物细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01050 小鼠源单克隆
    PCNA mAb (1D7) 细胞核蛋白 28 kD Abbkine A01040 小鼠源单克隆
    COX IV mAb (14Y2) 细胞线粒体总蛋白 16 kD Abbkine A01060 小鼠源单克隆
    Histone H3 mAb (2D10) 细胞核蛋白 18 kD Abbkine A01070 小鼠源单克隆

    标签抗体(Tag Antibody)可用于检测各种商品化表达载体上的标签序列(如:Myc、Flag、His、GST、HA等),籍以分析目的蛋白的表达含量及其功能;

    标签抗体:
    Anti-Biotin Antibodies
    Anti-Dye Antibodies
    Anti-FITC Antibodies
    Anti-Fluorescent Protein Antibodies
    Anti-HRP Antibodies
    Beta Galatosidase Antibodies
    FLAG Tag Antibodies
    GST Tag Antibodies
    HA Tag Antibodies
    His Tag Antibodies
    Myc Tag Antibodies
    TAP Tag Antibodies
    V5 Tag Antibodies
    βActin 和GAPDH简介 123
    张凯6962021-07-25
    β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数。内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白。它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。常用的蛋白质内参有细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin和GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)等。因此β-Actin抗体、β-Tubulin抗体以及GAPDH抗体成为最常见的三个动物细胞内参抗体。
    β-Actin作为内参是得到了公认的,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞浆内,表达量非常丰富。Beta-actin由375个氨基酸组成,分子量大小为42-43kDa左右。
    β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照,也常被用于免疫染色观察细胞的微丝结构。在用作Western的参照时,Actin抗体和Tubulin抗体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同,这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜上实现同时检测目标蛋白和参照蛋白。向左转|向右转
    请教各位,我买的CST的beta-actin(#3700)抗体,说明书上的图片只有一条特异性条带(见图),为什么我做的实际情况是有很多杂带,我做的是脑组织蛋白,这个是怎么回事?
    测的是某种特定蛋白的量。或者是说测定某种蛋白是否存在于样品中,因为WB只能做半定量。
    因为这个实验用到了抗体,抗体是特异识别某一种蛋白的,所以只要能检测到信号,说明样品中有该蛋白存在,如果有相应的对照,也能半定量说明该蛋白的量如何。
    内个,个人觉得比较价格还是很有说服力的,一分价钱一分货。
    虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体,但是如果希望抗体特异性好点,能检测丰度低的蛋白,还是选Abcam吧,Santa有时候全凭人品了,内参抗体什么的还能凑活,其他的比较勉强。
    actin
    GAPDH
    万能内参
    主要看你的目标蛋白的分子量多大,“目标蛋白要与内参蛋白的分子量差异大!”
    方便检测
    核蛋白,有很多种,分子量不同
    膜蛋白,有很多很多种,分子量不同
    浆蛋白,有成千上万种,分子量不同。
    具体实验,具体目的蛋白,具体的内参。
    我用过他们的抗体,他们主要做些信号转导方面的抗体和修饰性抗体,好像还帮人做抗体的定制,有些磷酸化的,其他的还有点,我没有注意,我以前做过ERK通路介导细胞凋亡的,买过他们的P-ERK和ERK一对,效果挺好的
    客户订错了该产品,有需要得PM我。
    Western Blot内参选择 123
    逆枫军团_952017-09-28
    内参bate-actin或GAPDH多为单抗,来源于小鼠,
    一般可与大鼠、小鼠、人、兔均有交叉反应,即可作为上述任一来源蛋白的内参。
    Actin分子量为42kD,为肌动蛋白
    GAPDH分子量为36kD,为磷酸脱氢酶
    一直没做出来这个,目的条带倒是可以做出条带
    请问有做GAPDH为内参的吗?一抗二抗的浓度时多少?最好是santacruz的抗体。多谢!
    内参蛋白的表达量一般比较大,而且内参蛋白的抗体通常比较好用。你要杂的目的蛋白可能表达量要远小于内参蛋白,又可能是目的蛋白的抗体不好用。因此可以考虑浓缩你的蛋白样品(增加细胞量、减少裂解液等方法)、增加目的蛋白抗体浓度、更换目的蛋白抗体。另外,化学发光试剂也可以换用更好的,比如GE公司的,虽然价格贵,但是灵敏度要比国产的试剂高出很多,希望能够帮到你。