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Abbexa/14-3-3 Eta (YWHAH) Antibody/100 µg/abx013880-100 µg
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Abbexa/14-3-3 Eta (YWHAH) Antibody/100 µg/abx013880-100 µg
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Abbexa
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Rabbit polyclonal antibody against 14-3-3 eta protein. Immunogen region is Internal.
Target14-3-3 eta
ClonalityPolyclonal
ReactivityHuman, Mouse, Rat
Tested ApplicationsELISA, WB, IF/ICC
HostRabbit
Recommended dilutionsWB: 1/500 - 1/3000, IF/ICC: 1/100 - 1/500, ELISA: 1/5000. Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
ConjugationUnconjugated
ImmunogenThe antiserum was produced against synthesized peptide derived from internal of human 14-3-3 eta.
IsotypeIgG
FormLiquid
PurificationPurified from rabbit antiserum by affinity chromatography using epitope-specific immunogen.
StorageAliquot and store at -20°C. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
UniProt Primary AC Q04917 (UniProt, ExPASy)
UniProt Entry Name1433F_HUMAN
KEGG hsa:7533
String 9606.ENSP00000248975
BufferPBS (without Mg2+ and Ca2+), pH 7.4, 150 mM NaCl, 0.02% sodium azide, 50% glycerol.
Concentration1 mg/ml
AvailabilityShipped within 5-10 working days.
NoteThis product is for research use only.
Research Articles on 14-3-3 Eta (YWHAH) Antibody

Abbexa是一家致力于为生命科学研究、药物研发及生物技术公司提供优质抗体、蛋白及检测试剂盒等产品的高科技生物技术公司。基于剑桥大学研发技术优势,Abbexa提供包括一抗二抗、纯化蛋白、ELISA试剂盒、各种酶类及其它多种试剂与研究工具的大量生命科学研究产品。

目前Abbexa的产品涵盖单克隆抗体多克隆抗体、纯化蛋白质及生物试剂,此外,为满足研发人员特殊的实验需要,Abbexa还提供抗体/多肽定制服务。严格的质控标准保证了Abbex产品的高性能,如您对产品不满意,Abbexa将直接提供退/换货服务


CLIAKits 化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA)

RNAInterferenceProducts RNA干扰试剂

RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-strandedRNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。基因沉默,主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类:TGS是指由于DNA修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录;PTGS是启动了细胞质内靶mRNA序列特异性的降解机制。有时转基因会同时导致TGS和PTGS。

由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,(长度超过三十的dsRNA会引起干扰素毒性)所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。

1.           RNAi抑制转座子活性

两方面的证据提示转座子活性的抑制与siRNA有关

①发现蠕虫mut-7基因参与RNAi并且与转座子的转座抑制有关;

②在果蝇中,参与RNAi的RNA解螺旋酶Spindle-E的突变将导致该基因引起的基因沉默的缺失,同时提高了反转录转座子活性。

2.           RNAi抵御病毒感染

在拟南芥中研究转基因引起基因沉默时发现,sgs2/sde1基因突变的拟南芥对病毒的侵染表现出高度的敏感性。

3.           RNAi参与异染色质的形成和维持

Hall等研究表明,着丝粒同源重复序列和RNAi组分一起正负调节着异染色质的形成并共同促使异染色质组装成核;Vople等在敲除裂殖酵母(S.pombe)的RNAi途径基因(如Argonaute、Dicer、RDRP)时发现异染色质转录得到的dsRNA可以在RNAi途径的参与下,加工成siRNA,siRNA募集异染色质蛋白1(HP1),然后靶向性引起相应异染色质区域的转基因沉默。

4.           RNAi参与机体的发育调控及生理代谢

RNAi只抑制转录后的基因,所以RNAi在生物体发育学研究中具有优势。Chuang等用RNAi技术进一步证实了AG、CLV3、AP1、PAN等已知功能基因在拟南芥花发育过程中的功能。在RNAi过程中形成的RISC复合物可根据不同情况分别利用siRNA或stRNA行使不同的功能,但最终均导致特定基因沉默。


IsotypeControl

同型对照

同型对照(IsotypeControl),使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。

同型对照

同型对照的主要目的是确定一抗的结合是特异性的,而不是非特异性的Fc受体或与其他蛋白的相互作用。还可以用来竞争性的结合抗体,与功能阻断抗体发挥同样的功能。

同型对照要与一抗的来源,Ig分型和标记完全一致。

如果一抗是多抗,可以用annormalserum(与一抗相同的正常血清)(mustbethesamespeciesasprimaryantibody)。Thiscontroliseasytoachieveandcanbeusedroutinelyinimmunohistochemicalstaining.这个可以咨询试剂商。同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照。由于荧光标记单抗的组来源不同,应选用相同来源的未标记单抗作为同型对照来调整背景染色。举个例子:比如检测一抗为单抗的mouseantiratCD11b,cloneOX-42purifiedIgG,那么它的isotype是mouseIgG2a,所以可以用purified(纯化的)mouseIgG2a来做OX-42的同型对照(IsotypeControl)。一般的的生物技术公司和国内的代理都有出售。

同型对照:是指与MoAb相同的、未免疫小鼠的免疫球蛋白亚类,若使用直接免疫荧光染色法,同型对照也应标记荧光色素,如IgG1FITC、IgG2a、PE等。主要考虑了细胞的自发荧光、FC受体介导的抗体结合和非特异性抗体结合等影响因素。此外,同型对照与MoAb所标记的荧光色素、浓度、F:P比值(标记的荧光色素与免疫球蛋白分子的比值)应该相同为最佳,这对准确设定阴性与阳性细胞的界标有重要意义,切忌使用与MoAb不相匹配的同型对照,最好为同一实验室、采用相同工艺或方法制备(如同一品牌)的产品。


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请教各位:在做细胞核内蛋白的表达时,选择内参是PCNA好还是TBP好?目前国内的那家公司的更可靠?谢谢!
免疫组化利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。
所以免疫组化在组织定位和定性上比较准确,但是在定量上不够准确。
western blot也是利用抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品,转移到固相载体上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应。
western blot因为有内参标定,所以在定量上要更加准确。但是在组织定位上不如免疫组化
我用过他们的抗体,他们主要做些信号转导方面的抗体和修饰性抗体,好像还帮人做抗体的定制,有些磷酸化的,其他的还有点,我没有注意,我以前做过ERK通路介导细胞凋亡的,买过他们的P-ERK和ERK一对,效果挺好的
内参一般都会用β-actin, GAPDH
当然跟物种有关。
当实验样品中只是核蛋白,而不是细胞总蛋白提取液时,可以用组蛋白H(Histone H),或者核纤层蛋白(nuclear lamina protein)等为核内参抗体。除了这些,其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B
以上信息来自。
很正常。内参有证明蛋白样品没问题。没有目的带原因很多。1.目的蛋白是否表达量很低,因为内参表达是很高的。2.抗体的选择是否有问题,有没有阳性对照?? 是一点都没有?还是能看到一点点?
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常用的actin,GAPDH内参抗体都是与人,动物有关。怎么没有微生物方面的内参抗体啊?
我要做酵母膜蛋白的westernblot,不知道选用何种内参抗体,有人作过吗?如能解惑,不甚感激。谢谢!
一直没做出来这个,目的条带倒是可以做出条带
请问有做GAPDH为内参的吗?一抗二抗的浓度时多少?最好是santacruz的抗体。多谢!
检测蛋白和内参分子量接近最好的办法就是更换内参
因为内参有好几种,分子量差别也比较大,更换分子量与检测蛋白差距更大的内参就可以避免这个问题
另外也可以先用一抗孵育显色和检测,再用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体,重新进行内参的抗体孵育显色检测。这样也可以将检测蛋白和内参显色在同一张膜上
如何选择内参抗体? 123
五味子1012021-08-11
我要做两个指标,检测这两个指标分别在大鼠和人肝癌细胞中的表达。
其中一个指标的一抗来源于兔,另一个一抗来源于鼠。前几天跟试剂公司联系购买内参抗体时,他们说内参抗体是根据目的蛋白的一抗来定的,要我买两个内参抗体和相应的二抗,这让我感到很纳闷。我想知道内参的选择是根据什么原则?
我觉得内参只是一个参照,内参抗体跟目的蛋白的一抗有直接联系吗?有没有可以通用于人肝癌细胞和大鼠肝癌细胞的内参抗体,能否帮忙推荐一个,谢谢.
在图书馆也没有找到这方面很详细和确切的论述,急切期盼您的指导!!!谢谢!!!
内参蛋白的表达量一般比较大,而且内参蛋白的抗体通常比较好用。你要杂的目的蛋白可能表达量要远小于内参蛋白,又可能是目的蛋白的抗体不好用。因此可以考虑浓缩你的蛋白样品(增加细胞量、减少裂解液等方法)、增加目的蛋白抗体浓度、更换目的蛋白抗体。另外,化学发光试剂也可以换用更好的,比如GE公司的,虽然价格贵,但是灵敏度要比国产的试剂高出很多,希望能够帮到你。
RT-PCRWestern blotELISA三者区别 PCR转录水平检测目基,非蛋白,转录翻译复杂程,基表达量与蛋白表达量定相关. WB能半定量,检测细胞膜蛋白,点ELISA做 ELISA用定量检测蛋白,说观察同浓度刺激物目蛋白影响 基翻译蛋白质, PCR检测基表达量绝定量相定量基翻译表达蛋白质复杂程能现基量蛋白质少或者相反甚至其情况所PCR基层面DNA或mRNA进行检测 Western Blot目前种结合内参蛋白质进行半定量Elisa定量检测某些蛋白、激素等 、目 虽两者都通抗原抗体反应蛋白质进行检测WB主要定性Elisa定性定量 WB所检测般抗原Elisa抗原抗体都检测 WB所检测抗原知道其量或否聚体、降解产物等句WB确定所用抗体与种蛋白起作用;Elisa能力锅端 二、模式 WB(抗原-抗体-二抗酶)模式进行检测;Elisa模式种(抗原-抗体-二抗酶)、(抗原-抗体-抗原酶)、(抗抗体-抗体-抗原酶)、(抗体-抗原-抗体酶)、(抗抗体-抗体-抗原-抗体酶)等等 三、抗体适用性 WB所适用抗般线性位点ELISA线性或构象型抗体都使用另意义讲WB做抗体线性位点构象型位点补充判定Elisa行 四、灵敏度 般Elisa灵敏度要远高于WB般酶标记物使用浓度或待检品稀释度看 五、操作性 WB处理量块胶版10-20品Elisa块96孔板处理96本设置复孔、照、梯度等提高检测信度 WB操作见非特异性条带膜本底差显色等等缺点Elisa表现要 六、商品化度 WB管都要自先做电泳Elisa熟商品化试剂盒要怕花钱检测要便快展开