Human gluPlasminogen (affinity form I)_价格厂家供应商_四川...
免疫荧光技术（Immunofluorescencetechnique）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。
一、实验材料
1.细胞样品
2.试剂、试剂盒： 多聚甲醛；70%甲醇；丙酮；PBS；Triton；BSA；DAPI染液；DABCO；Tris；甘油
3.仪器、耗材：玻片
二、实验步骤
细胞爬片免疫荧光实验步骤
第一天：
1.在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；
2.用4%的多聚甲醛固定爬片15min，PBS浸洗玻片3次，每次3min；
3.0.5%TritonX-100(PBS配制)室温通透20min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）；
4.PBS浸洗玻片3次，每次3min，吸水纸吸干PBS，在玻片上滴加正常山羊血清，室温封闭30min；
5.吸水纸吸掉封闭液，不洗，每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒，4℃孵育过夜；
第二天：
6.加荧光二抗：PBST浸洗爬片3次，每次3min，吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗，湿盒中20-37℃孵育1h，PBST浸洗切片3次，每次3min；注意：从加荧光二抗起，后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。
7.复染核：滴加DAPI避光孵育5min，对标本进行染核，PBST5min×4次洗去多余的DAPI；
8.用吸水纸吸干爬片上的液体，用含抗荧光淬灭剂的封片液封片，然后在荧光显微镜下观察采集图像。
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2021-07-18
阅读（350）
▍
相关分类
▍
相关文章
美国NIH最新进展:已标准化生产出临床级即用型干细胞_双环铂专栏_新浪...
用什么试剂盒提取大豆油中的dna
药物对动物腹腔巨噬细胞的影响实验 实验方法
电气设备防潮措施
FMC猎头关于FMC
BECKMAN COULTER 品牌介绍及代理商/经销商名单 丁香 ...
...western做蛋白定量。用普通的胶能做出来吗?需要用做胶试剂盒吗...
加强病理质量控制 提高病理诊断质量
Immundiagnostik IHC、WB、IP、ELISA抗体北京诺博莱德 ...
辣根过氧化物酶HRP标记IgG组份的单克隆小鼠抗山羊IgG二抗,与轻链...
杨洪全 Shanghai Normal University
Human gluPlasminogen (affinity form I)_价格厂家供应商_四川...
