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Virusys/HSV-1 gG Monoclonal Antibody - ViruSelect/1kit/H1A020-100
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Virusys/HSV-1 gG Monoclonal Antibody - ViruSelect/1kit/H1A020-100
品牌 / 
Virusys
货号 / 
H1A020-100
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4000-520-616
Target ProteinHSV-1 gG Envelope Protein
Target Protein Also Known AsgG-1, pUs4
Clone Designation7F5
Species/Isotype Mouse IgG2a(k)
PurityAffinity Purified, > 95% IgG by SDS-PAGE
Supplied inPhosphate Buffered Saline pH 7.4 (no azide)
Protein Concentration1.0 mg/ml
Fill Volume103 µl
Immunofluorescence Titer1+ @ 1:25,600
ELISA Titer0.100 @ >1:102,400
Western Blot Titer> 1:80,000
Reference / Additional ReadingJ. Virol. Methods (1986), 14:111
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牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 kDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为Blocking agent。... 查看更多>
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在正常孕妇的血清中,存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性IgG抗体,它可抑制淋巴细胞反应(MLR),封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用,防止辅助T细胞识别胎儿抗原的抑制物,并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子(MIF),故称其为封... 查看更多>
品牌:Jackson ¥600 上海翊圣生物科技有限公司 品 13年 免疫组化封闭液 ...荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)... 查看更多>
2021-09-11
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做封闭的时候是不应该加AB型血清的。做封闭的目的就是用非特异性的抗体和蛋白质结合掉细胞上那些可以和抗体非特异性结合的位点。
血清的目的就是因为含有白蛋白和抗体,所以一举两得。不过不应该用AB型。这是人的血清。流式检测一般都是使用小鼠单克隆抗体,所以封闭的血清也应该是用种的小鼠血清。
ELISA实验的原理似乎很简单,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗涤和封闭。然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果做得不太好,也有可能毁了整个实验。在实验结束时,我们是否能获得有意义的信息,这在很大程度上取决于结果的信噪比。背景噪音会影响您对结果的判断。如何降低ELISA的背景,下面有一些tips。洗涤很重要
洗涤步骤看似很无聊,其实很重要,因为如果未结合的材料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。如有必要,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,而您怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。封闭更关键
封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高,怀疑封闭不充分,那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰,那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
最常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定,在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用,因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度(正常浓度为0.01-0.1%),它会降低特异结合,产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液,后者可协助洗涤过程中的封闭。蛋白封闭液则有所不同,是永久的。它们与开放位点结合并封闭,同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白(BSA)、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过,它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。
抗体浓度须优化我们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤,但是如果试剂稍有不同,则可能需要优化抗体的量。记住,非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。
我们做的是:5%猪血清(顺便说一下,有时是不可以用牛血清封闭的,比如用bsa免疫的动物血清的检测)in PBST,37度一个小时即可。实验室整个就是这样做的,没有出现什么问题。本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
如果是单标兔抗羊跟驴抗羊无所谓,只是注意封闭血清跟二抗来源相同就行。但如果是双标,就要考虑到二抗种属问题了
病情描述(发病时间、主要症状等):封闭抗体的检验单帮忙看看。AB血清-CD3+78.5AB血清-CD4+52.8AB血清-CD8+25.3患血清-CD3+69.9患血清-CD4+46.4患血清-CD8+21.6CD3-BE8.6CD4-BE6.3CD8-BE3.7想得到怎样的帮助:请问这个数值正常吗?AB...
封闭是血清与非特异性位点结合,以消除非特异性染色,提高目的蛋白的准确性和降低背景。并非所有的免疫组化都由山羊血清封闭,因为一般二抗是羊抗X,所以采用山羊血清,其与使用二抗来源有关。
你也可以搜索【牧羊人】或者【牧羊人论坛】多和其他养羊朋友一起交流养羊体会和疑难解答哦。

目前是最好的养羊技术交流平台。
那里有一个版块叫做【有问必答】的,一般只要描述清楚的问题,都能够得到论坛羊友的解答。
如果是关于 羊病问题,最好是把羊的大小、品种、平时喂什么料、体温排泄变化等详细说明。如果能够搭配清晰的图片说明更好了。
对于高级用户 还能提供实地学习机会哦
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍。5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍。6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,PBS洗三遍。7,最好用DAPI染核,然后直接照荧光片。8,蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周。
这个就看你的技术实力了.有些商品化的产品保质期9个月.实验最长可以放一年.那个应该是加了一些稳定剂的.
如果你自己用,所用的配方什么的都是书本上的,而且封闭后将孔封好,估计可以放上一个月左右.
并且不同的方法,包被的蛋白不一样,稳定性也不一样.抗体相对来说会更稳定些.如果是一些虽的蛋白,那就难说,一个月都不一定
拿你查看免疫组化试剂盒说明书,
针对这个应该有详细的解说的
估计是膜没封闭好,或者是多抗稀释倍数太低
在免疫组化中用二抗同源的非免疫动物血清进行封闭的目的是为了减少非特异性结合.你所检测的标本是鼠的,如果你再用鼠的血清进行封闭的话,那么这个血清中就可能含有你所检测的目的蛋白,然后一抗就与之结合,干扰实验结果.而如果你用羊的血清进行封闭的话,那就起不到封闭的目的了,就是说就算这个封闭血清与一些非特异位点结合了,但是因为它是羊的,所以二抗同样会和它结合,进而出现假阳性的结果!所以最好用二抗同源的正常动物血清封闭