DESCRIPTION
Special Serum Diluting Buffer is PBS-0.09% sodium azide with 10% adult bovine serum added. Adult bovine serum is used in this diluting buffer instead of BSA because some vaccines used in canine, feline and porcine species contain bovine serum components which cause antibodies to be made that may give a high background fluorescence on IFA. Adding bovine serum to the diluent increases the globulin fraction sufficiently to block any antibody that might react with residual bovine globulin on the cells on the substrate slide, and thus reduce the background fluorescence. Formerly catalog number 210-94-SB
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SeparoporeAMP亲和层析凝胶4B(冻干粉)AMP-Sepharose4B(Lyophilized)(20182005-2)是由苏州达麦迪生物医学科技有限公司代理或销售的Separopore品牌的试剂,产品来源于美国。苏州达麦迪生物医学科技有限公司是中国最权威的SeparoporeAMP亲和层析凝胶4B(冻干粉)AMP-Sepharose4B(Lyophilized)(20182005-2)试剂销售服务商之一,在其它等地方销售SeparoporeAMP亲和层析凝胶4B(冻干粉)
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Phycoerythrin(R-PE)(Lyophilized powder)藻红蛋白冻干粉二、产品简介藻红蛋白是从红藻中分离纯化的,能发出强烈的荧光,具有很好的吸光性能和很高的量子产率,在可见光谱区有很宽的激发及发射范围。用常规的标记方法可以很方便地将其与生物素、亲和素和各种单克隆抗体结合起来制成荧光探针,用于荧光显微检测、荧光免疫测定、双色或多色荧光分析、癌细胞表面抗原检测、流式细胞荧光测定等抗体荧光标记以及活体成像应用等诊断及生物...
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上海瑞楚生物科技有限公司在发布的实验试剂 卡介苗免疫佐剂 结核杆菌冻干粉 卡介苗佐剂 50mg供应信息,浏览与实验试剂 卡介苗免疫佐剂 结核杆菌冻干粉 卡介苗佐剂 50mg相关的产品或在搜索更多与实验试剂 卡介苗免疫佐剂 结核杆菌冻干粉 卡介苗佐剂 50mg相关的内容。
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牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种白蛋白在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性。
牛血清白蛋白(BSA)用途:
1、 在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,减轻不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的。
2 、ELISA中也常常用到,比如封闭液,样本稀释液,酶结合物稀释液都可以用BSA。
3、生化研究,遗传工程和药物研究。
胎牛血清(fbs)是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
胎牛血清(FBS)的作用:
1、提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5、起酸碱度缓冲液作用。
6、提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。展开
要看你山羊抗体的交叉反应效果。BSA的效果。
一般用BSA。
病情描述(发病时间、主要症状等):封闭
抗体的检验单帮忙看看。AB
血清-CD3+78.5AB血清-CD4+52.8AB血清-CD8+25.3患血清-CD3+69.9患血清-CD4+46.4患血清-CD8+21.6CD3-BE8.6CD4-BE6.3CD8-BE3.7想得到怎样的帮助:请问这个数值正常吗?AB...
封闭用驴
血清,不要太贵的,进口的那些实在是太贵,一两千,但是现在又急用,哪里有现货啊??做免疫荧光,一般的驴血清行不?还是必须要封闭驴血清。急啊!请大家告知!
都说是封闭,羊
血清究竟封闭的是什么(
抗原?)那接下来加
一抗怎么又能反应结合?不是封闭了吗?
在免疫组化中用二抗同源的非免疫动物血清进行封闭的目的是为了减少非特异性结合.你所检测的标本是鼠的,如果你再用鼠的血清进行封闭的话,那么这个血清中就可能含有你所检测的目的蛋白,然后一抗就与之结合,干扰实验结果.而如果你用羊的血清进行封闭的话,那就起不到封闭的目的了,就是说就算这个封闭血清与一些非特异位点结合了,但是因为它是羊的,所以二抗同样会和它结合,进而出现假阳性的结果!所以最好用二抗同源的正常动物血清封闭
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.
2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟
3.PBS洗净:3min*3
4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS
5.PBS洗净:2*5min
6.羊血清封闭:37度,20分钟
7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时
8.4度 PBS洗净,3min*5次
9.二抗 37度小于一小时
1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同?
参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的。
2、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?
参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:
(1)选取一抗时要来源于两种不同的动物,我用的是来源于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti-rat-Tex-Red(红)。
(2)我的做法是两种一抗(CHI抗体)同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索,我感觉一抗4度孵育过夜比较好,背景比较清晰。
(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片,阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG,荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。
(4)封闭血清与二抗来源动物一致,我用的是10%的正常donkey血清。
(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。
3、问:本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光,二抗为FITC标记,想请教各位大侠:
(1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
(2)封片时是否用甘油缓冲液即可,还是用甘油和0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液等量混合封片?
(3)免疫酶染色中的3%过氧化氢及2N盐酸是否还需要用?
参考见解:
(1)你的二抗是用FITC标记的,为避免荧光分解,分装及荧光显微镜观察时均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液,后者能使玻片透明;
(3)关于免疫酶染色,如果是用过氧化物酶做标记,就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶;2N盐酸需要使用,目的是使DNA变性,让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合。
4、问:做间接法免疫荧光染色,如何设置对照?
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照,看是否非特异性染色。
(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化,这个对照必须有,目的是看自发荧光,脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
(2)阴性对照:标本直接滴加二抗,呈阴性反应。
(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清,以PBS冲洗后,在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体,应呈阴性反应。
5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色,结果用激光共聚焦显微镜看很好:有阳性信号,阴性对照组也没有荧光,但是拿到荧光显微镜下看,我的阴性对照组一片绿,像非特异性染色,到底哪个结果才是真实的呢?
参考见解:激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多,出现上述现象首先要排除荧光显微镜的问题,如是不是紫外灯泡寿命到期了或者别的原因,荧光显微镜没有问题,那就以共聚焦显微镜的结果为主。展开
我们做的是:5%猪血清(顺便说一下,有时是不可以用牛血清封闭的,比如用bsa免疫的动物血清的检测)in PBST,37度一个小时即可。实验室整个就是这样做的,没有出现什么问题。本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
做封闭的时候是不应该加AB型血清的。做封闭的目的就是用非特异性的抗体和蛋白质结合掉细胞上那些可以和抗体非特异性结合的位点。
血清的目的就是因为含有白蛋白和抗体,所以一举两得。不过不应该用AB型。这是人的血清。流式检测一般都是使用小鼠单克隆抗体,所以封闭的血清也应该是用种的小鼠血清。