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ALPCO/25-OH Free Vitamin D ELISA/96 Wells/38-KAPF1991
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Catalog #38-KAPF1991SpeciesHumanRegulatory StatusResearch Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.Product DistributionAvailable WorldwideRange0-40 pg/mLSensitivity1.9 pg/mLSizes96 WellsSample TypesSerumIncubation Time2 hrIncubation Time2 hr 40 minSample Size10µLInstructions for UseClick here to viewSafety Data SheetClick here to view - Additional Information
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Nearly all circulating 25-OH Vitamin D in serum is bound to Vitamin D Binding Protein (88%) and Albumin (12%). Vitamin D Binding Protein (DBP) is a major component of serum, with a concentration of 250-400 mg/L of serum. Only a small portion, about 2%, of the Vitamin D binding sites of DBP is occupied. A very small fraction, approximately 0.04% of the 25(OH)Vitamin D, circulates in the free, non-protein bound form (1). The concentration of DBP is not constant and can be influenced by factors including obesity (2) pregnancy (3), the use of oral contraceptives (4) and liver disease (5). Variations in the concentration of DBP in serum will affect the unbound fraction 25-OH Vitamin D. For thyroid and steroid hormones it has been shown that their in vivo physiological activity correlates better with the free, non-protein bound fraction, than with the total concentration of the hormone in plasma. In such conditions the measurement of the concentration of the free circulating hormone provides more physiologically relevant information. This notion is known as the “free hormone hypothesis” (6). Particularly in situations in which the level of binding proteins is elevated or decreased, the measurement of total circulating hormone may lead to a wrong diagnosis. The bioavailability of 25-OH Vitamin D may be more complex, since it is a precursor that is metabolized in the kidney to the active 1,25(OH)2 Vitamin D. However, literature data suggest a role for the measurement of free 25-OH Vitamin D (7-10). The 25-OH Free Vitamin D ELISA makes it possible to measure the concentration of freely circulating 25-OH Free Vitamin D ELISA in serum.
References
Kane et al (2013) Vitamin D3 effects on lipids differ in statin and nonstatin treated humans: superiority of free 25-OH D levels in detecting relationships. J ClinEndocrinMetab. 98(11):4400-9.
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Request a QuoteCatalog Number38-25DHU-E01Sensitivity: 2.8 ng/mLRange: 10-180 ng/mLSample Types: SerumSample Size(s):50 µL- Add to Compare
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Rat 25-OH Vitamin D ELISARequest a QuoteCatalog Number38-25DRT-E01Sensitivity: 2.81 ng/mlRange: 5.3-133.0 ng/mlSample Types: SerumSample Size(s):50 µL- Add to Compare
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2021-08-13
厦门研科生物技术有限公司在发布的 驴免疫球蛋白IgG冻干粉(100g) -Donkey IgG powder ≥ 97% purity, 100gm供应信息，浏览与 驴免疫球蛋白IgG冻干粉(100g) -Donkey IgG powder ≥ 97% purity, 100gm相关的产品或在搜索更多与 驴免疫球蛋白IgG冻干粉(100g) -Donkey IgG powder ≥ 97% purity, 100gm相关的内容。 查看更多
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2021-09-08
上海瑞楚生物科技有限公司在发布的实验试剂 卡介苗免疫佐剂 结核杆菌冻干粉 卡介苗佐剂 50mg供应信息，浏览与实验试剂 卡介苗免疫佐剂 结核杆菌冻干粉 卡介苗佐剂 50mg相关的产品或在搜索更多与实验试剂 卡介苗免疫佐剂 结核杆菌冻干粉 卡介苗佐剂 50mg相关的内容。 查看更多
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Separopore蛋白A交联琼脂糖凝胶4B-CL（冻干粉）ProteinA-Separopore(Agarose)4B-CL(Lyophilized)(20181028-1)是由苏州达麦迪生物医学科技有限公司代理或销售的Separopore品牌的试剂，产品来源于美国。苏州达麦迪生物医学科技有限公司是中国最权威的Separopore蛋白A交联琼脂糖凝胶4B-CL（冻干粉）ProteinA-Separopore(Agarose)4B-CL(Lyophilized)(20181028- 查看更多
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2021-09-23
盘古基因生物工程（南京）股份有限公司在发布的bFGF冻干粉供应信息，浏览与bFGF冻干粉相关的产品或在搜索更多与bFGF冻干粉相关的内容。 查看更多
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2021-09-21
询价 Biomatik 酶联免疫试剂盒,用于磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1,可溶的 ELISA Kit for Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)(EKU06594) 询价详细... 查看更多
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2021-08-27
中科晨宇（北京）贸易有限公司在发布的大鼠IgG（冻干粉）供应信息，浏览与大鼠IgG（冻干粉）相关的产品或在搜索更多与大鼠IgG（冻干粉）相关的内容。 查看更多
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2021-08-16
免疫组化中的血清封闭原理封闭血清没有也不应该和样品发生反应，应该是说，血清把没有包被 (coating)到的地方通通填满，以防止一抗乱吸附，所以封闭可以用二抗同物种血清，也可用 BSA 或 Gelatin，就是不能使用一抗同物种血清，因为里面含有同物种抗体，肯定会被二抗辨识。先加一抗后再封闭的话，一抗就会结合到固相表面上，这种结合力是非特异性的疏水作用力，这种作用力是比较强的，经过处理的固相表面如硝酸纤维膜，酶标板对蛋白的吸附力更强，你 查看更多
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2021-09-06
在正常孕妇的血清中，存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性IgG抗体，它可抑制淋巴细胞反应（MLR），封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用，防止辅助T细胞识别胎儿抗原的抑制物，并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子（MIF），故称其为封... 查看更多
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2021-08-31
青岛捷世康生物科技有限公司在发布的血清封闭剂,50ml供应信息，浏览与血清封闭剂,50ml相关的产品或在搜索更多与血清封闭剂,50ml相关的内容。 查看更多
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2021-09-15
2014-12-15 · 常见的封闭剂包括脱脂奶粉、牛血清白蛋白BSA、动物血清和Fab片段单链二抗。因为奶粉中可能存在天然的生物素、碱性磷酸酶，不适合用于磷酸化蛋白检测的封闭以及使用生物素和碱性磷酸酶系统的检测实验。另外，脱脂奶粉中可能含有牛IgG，能够与抗牛、山羊、绵羊、马等二抗有较强的交叉反应 ... 查看更多
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2021-09-09
中科晨宇（北京）贸易有限公司在发布的猪IgG（冻干粉）供应信息，浏览与猪IgG（冻干粉）相关的产品或在搜索更多与猪IgG（冻干粉）相关的内容。 查看更多
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2021-08-17
厦门慧嘉生物科技有限公司在发布的 绵羊免疫球蛋白IgG冻干粉(100g) -Sheep IgG powder ≥ 97% purity, 100gm供应信息，浏览与 绵羊免疫球蛋白IgG冻干粉(100g) -Sheep IgG powder ≥ 97% purity, 100gm相关的产品或在搜索更多与 绵羊免疫球蛋白IgG冻干粉(100g) -Sheep IgG powder ≥ 97% purity, 100gm相关的内容。 查看更多
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求免疫荧光DHE染色具体步骤和细胞流式的具体步骤_问答详情_...123
夏暖10086sky2018-02-03
细胞免疫荧光的详细操作步骤1，取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心。2，4%多聚甲醛固定20分钟，PBS洗三遍。3，0.2%TritonX100通透10分钟，PBS洗三遍。4，与二抗相同宿主的血清封闭30分钟，PBS洗三遍。5.，一抗4度湿盒内过夜，也可37度2小时，感觉前者效果好，PBS洗三遍。6，二抗室温2小时，或者37度1半小时，PBS洗三遍。7，最好用DAPI染核，然后直接照荧光片。8，蒸馏水洗掉PBS，甘油封片，指甲油封片子的四周。
免疫组化中的血清封闭原理 实验方法123
林子哥902018-01-14
封闭是血清与非特异性位点结合，以消除非特异性染色，提高目的蛋白的准确性和降低背景。并非所有的免疫组化都由山羊血清封闭，因为一般二抗是羊抗X，所以采用山羊血清，其与使用二抗来源有关。
请问抗滋养层细胞膜抗体是什么?_寻医问药网_xywy.com123
hhcogo2018-01-14
抗滋养层细胞膜抗体检测意义，在于合体滋养层浆膜上有可被母体识别的抗原系统，它们的存在影响着孕妇与胎儿之间的免疫平衡，研究表明在不明原因流产的妇女血清中，抗滋养层细胞膜抗体比正常孕妇明显增高，种抗体的增高与流产之间有着密切联系。其机制可能与封闭抗体的减少有关。 合体滋养层细胞的表面不表达HLA，但存在一种独特的抗原，称滋养层抗原(TA)。由于该抗原的抗血清能与淋巴细胞发生交叉反应，故命名为滋养层淋巴细胞交叉反应抗原(trophoblast-lymphocyte cross reaction antiˉgen，TLX)。TLX(实为抗TA的血清蛋白)在功能上能诱导母体产生封闭抗体。该抗体可与TA结合，使其不能刺激母体形成免疫反应过程。
AMTEC_五金零部件 密封件 其他附件_深圳德普瑞工控工程 ...123
悄悄的俺走了2021-07-28
估计是膜没封闭好，或者是多抗稀释倍数太低
一抗孵育时间 搜索123
椃棜L2018-02-10
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.
2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟
3.PBS洗净:3min*3
4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS
5.PBS洗净:2*5min
6.羊血清封闭：37度，20分钟
7.一抗，4度过夜，一般要大于18小时或者37度 1-2小时
8.4度 PBS洗净，3min*5次
9.二抗 37度小于一小时
2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟
3.PBS洗净:3min*3
4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS
5.PBS洗净:2*5min
6.羊血清封闭：37度，20分钟
7.一抗，4度过夜，一般要大于18小时或者37度 1-2小时
8.4度 PBS洗净，3min*5次
9.二抗 37度小于一小时
细胞培养时要用无血清培养基,为何还要加FBS 细胞技术讨论版...123
n1e247J2018-02-05
牛血清白蛋白（BSA），又称第五组分，是牛血清中的一种白蛋白在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，能减轻有些不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性。
牛血清白蛋白（BSA）用途：
1、 在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，减轻不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的。
2 、ELISA中也常常用到，比如封闭液，样本稀释液，酶结合物稀释液都可以用BSA。
3、生化研究，遗传工程和药物研究。
胎牛血清（fbs）是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
胎牛血清(FBS)的作用：
1、提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。
2、提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5、起酸碱度缓冲液作用。
6、提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。展开
牛血清白蛋白（BSA）用途：
1、 在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，减轻不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的。
2 、ELISA中也常常用到，比如封闭液，样本稀释液，酶结合物稀释液都可以用BSA。
3、生化研究，遗传工程和药物研究。
胎牛血清（fbs）是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
胎牛血清(FBS)的作用：
1、提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。
2、提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5、起酸碱度缓冲液作用。
6、提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。展开
免疫组化实验时已经用血清封闭了还可以再次透膜吗?对封闭的位点会有...123
asiar20102018-01-30
不可以。透膜也好，酶消化也好，抗原热修复也好，消除内源性过氧化物酶和内源性生物素也好，都要在血清封闭之前，如果你忘记了前面的步骤，可以洗去封闭液，补上必须的程序，再封闭，不洗，吸干封闭液直接加一抗。
请问福州迈新的免疫组化试剂盒质量如何? 免疫学讨论版123
欲猫人72602018-01-14
拿你查看免疫组化试剂盒说明书，
针对这个应该有详细的解说的
针对这个应该有详细的解说的
HemoGenix品牌简介 HemoGenix 干细胞;流式细胞仪;细胞 ...123
liking9432018-01-30
封闭不当反而会使阴性本底增高，操作时洗涤彻底，取决于 ELISA 的模式及具体的实验条件，业已起到了类似封闭剂的作用.5%的牛血清白蛋白，封闭一般是不可少的(见2，而且封闭后的载体不易长期保存，吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙 。特别是用单抗腹水直接包被时。高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用。 BIM试剂盒为您提供.2。脱脂奶粉也是一种良好的封闭剂，双抗体夹心法。抗原或抗体包被时所用的浓度较低.05%-0。包被好的E LISA 板干燥后放入密封袋或锡袋中，封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙，因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面，从而排斥在ELISA 其后的步骤中干扰物质的再吸附。但在间接法测定中; ，因此在试剂盒的制备中较少应用; ，在低温可保存数月。一般说来，其最大的特点是价廉。并非所有的ELISA 固相均需封闭，也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封闭剂的，可以高浓度使用(5%)。封闭的手续与包被相类似; 。最常用的封闭剂是0，不经封闭也可得到满意的结果;封闭 (blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程，但由于奶粉的成份复杂.2)。封闭是否必要，只要酶标记物是高活性的
小鼠3T3L1前脂肪细胞系的特异性标记论文万方医学网123
小裤衩°3912021-07-26
1、一般来说二抗来源 goat 和donkey 较多，rb用的少。
2、对的，封闭血清一般建议与二抗来源一致。
2、对的，封闭血清一般建议与二抗来源一致。
封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)123
2021-07-27
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如何降低ELISA的背景_文章123
liuhua2018-01-30
ELISA实验的原理似乎很简单，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，间中夹杂着洗涤和封闭。然而，即使是平淡无奇的洗涤和封闭，如果做得不太好，也有可能毁了整个实验。在实验结束时，我们是否能获得有意义的信息，这在很大程度上取决于结果的信噪比。背景噪音会影响您对结果的判断。如何降低ELISA的背景，下面有一些tips。洗涤很重要
洗涤步骤看似很无聊，其实很重要，因为如果未结合的材料（如非特异结合的抗体或检测试剂）残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。如有必要，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果背景过高，而您怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。封闭更关键
封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高，怀疑封闭不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液，或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
最常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定，在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用，因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度（正常浓度为0.01-0.1%），它会降低特异结合，产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液，后者可协助洗涤过程中的封闭。蛋白封闭液则有所不同，是永久的。它们与开放位点结合并封闭，同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白（BSA）、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过，它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。
抗体浓度须优化我们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤，但是如果试剂稍有不同，则可能需要优化抗体的量。记住，非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点，切勿使用过多的一抗或二抗。
洗涤步骤看似很无聊，其实很重要，因为如果未结合的材料（如非特异结合的抗体或检测试剂）残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音。如有必要，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。如果背景过高，而您怀疑洗涤不够时，可以尝试增加洗涤次数。封闭更关键
封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。如果您的背景过高，怀疑封闭不充分，那么您可以尝试使用更高浓度的封闭液，或适当延长封闭时间。如果您一直被背景问题所困扰，那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间，但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液：蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素，包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
最常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定，在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用，因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度（正常浓度为0.01-0.1%），它会降低特异结合，产生假阴性。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封闭液，后者可协助洗涤过程中的封闭。蛋白封闭液则有所不同，是永久的。它们与开放位点结合并封闭，同时稳定与微孔板结合的抗原分子。常用的蛋白封闭液包括牛血清白蛋白（BSA）、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有效拦截许多不同类型的分子相互作用。不过，它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。解决这个问题的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。
抗体浓度须优化我们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤，但是如果试剂稍有不同，则可能需要优化抗体的量。记住，非特异的抗体结合会增加背景。为了防止这一点，切勿使用过多的一抗或二抗。
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