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BioAssay Systems/EnzyChrom™ Acetylcholine Assay Kit/100 tests/EACL-100
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BioAssay Systems/EnzyChrom™ Acetylcholine Assay Kit/100 tests/EACL-100
品牌 / 
BioAssay Systems
货号 / 
EACL-100
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EnzyChrom™ Acetylcholine Assay Kit

EnzyChrom™ Acetylcholine Assay Kit Catalog No: EACL-100
Price: $369 Qty:
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Acetylcholine Assay Kit
  • Product Overview
  • Product FAQ
  • Product Citations
  • Assay Service
ProtocolSDS

Application

  • For quantitative determination of acetylcholine and evaluation of drug effects on acetylcholine metabolism.

Key Features

  • Use 20 μL samples. Linear detection range: colorimetric assay 10 to 200 μM, fluorimetric assay 0.4 to 10 μM acetylcholine.

Method

  • OD570nm, or FL530/585nm

Samples

  • Serum, plasma, urine, saliva, milk, tissue, and cell culture etc

Species

  • All

Size

  • 100 tests

Detection Limit

  • OD, FL: 10, 0.4 μM

Shelf Life

  • 6 months

More Details

  • ACETYLCHOLINE is a neurotransmitter produced in acetylcholinergic neurons. It plays important roles in skeletal muscle movement, regulation of smooth and cardiac muscles, as well as in learning, memory and mood. BioAssay Systems method provides a simple, direct and high-throughput assay for measuring acetylcholine in biological samples. In this assay, acetylcholine is hydrolyzed by acetylcholinesterase to choline which is oxidized by choline oxidase to betaine and H2O2. The resulting H2O2 reacts with a specific dye to form a pink colored product. The color intensity at 570nm or fluorescence intensity (530/585 nm) is directly proportional to the acetylcholine concentration in the sample.

Can the acetylcholine level in human serum be measured with this kit?

We have not tested this assay with blood samples. In the literature search I found the following reference:Plasma levels in young women: 456.1 +/- 53.1 (SEM) pg/mL which equals 3.1 nM. (Kawashima et al. Neuroscience Letters 80:(3), 339-342; 1987.) If this is indeed a representative study, it would mean that our assay is not sensitive enough to detect acetylcholine in plasma or serum samples. Furthermore, plasma levels of choline are much higher (~10 µM) and will thus have to be removed before assaying.

What is the principle of this assay?

The assay is based on the enzymatic degradation of acetylcholine to choline and acetate and the subsequent detection of choline.

Can this assay measure acetylcholine in brain tissue?

We have not tested acetylcholine assay specifically with brain tissue samples, but believe it should work. Typical concentrations of choline and acetylcholine in brain tissue are 10-70 nmoles/g. So if the tissue sample is suspended in ice-cold PBS at 500 mg/mL, we should expect 5-35 ?M choline or acetylcholine in the supernatant.Suggested protocol: weigh brain tissue (approx. 50 mg) and add 100 µL ice-cold PBS, lyze tissue by homogenization or sonication. Centrifuge at 14,000 rpm for 10 min at 4°C. Carefully transfer the supernatant to a clean tube and perform the assays for choline and acetylcholine.Due to the low concentration range, the fluorescence assay procedure is recommended.For more detailed product information and questions, please feel free to Contact Us. Or for more general information regarding our assays, please refer to our General Questions.
Ahmad, A., Ramasamy, K., Jaafar, S. M., Majeed, A. B. A., & Mani, V. (2014). Total isoflavones from soybean and< i=""> tempeh reversed scopolamine-induced amnesia, improved cholinergic activities and reduced neuroinflammation in brain. Food and Chemical Toxicology 65: 120-128. Assay: Acetylcholine in rat brain. Baitharu, I., Jain, V., Deep, S. N., Hota, K. B., Hota, S. K., Prasad, D., & Ilavazhagan, G. (2013). Withania somnifera root extract ameliorates hypobaric hypoxia induced memory impairment in rats. Journal of ethnopharmacology 145(2): 431-441. Assay: Acetylcholine in rat hippocampus. Chen L et al (2012). Acute exposure to DE-71: Effects on locomotor behavior and developmental neurotoxicity in zebrafish larvae. Environ Toxicol Chem. 31(10):2338-44. Assay: Acetylcholine in fish. He C, et al (2012). Embryonic exposure to benzo(a)pyrene influences neural development and function in rockfish (Sebastiscus marmoratus). Neurotoxicology 33(4):758-62. Assay: Acetylcholine in fish. He C, et al (2012). Exposure of Sebastiscus marmoratus embryos to pyrene results in neurodevelopmental defects and disturbs related mechanisms. Aquat Toxicol 15(116-117):109-15. Assay: Acetylcholine in fish. Mani V, et al (2012). Effects of the Total Alkaloidal Extract of Murraya koenigii Leaf on Oxidative Stress and Cholinergic Transmission in Aged Mice. Phytother Res. 27(1):46-53. Assay: Acetylcholine in mouse brain.To find more recent publications, pleaseclick here.
If you or your labs do not have the equipment or scientists necessary to run this assay, BioAssay Systems can perform the service for you.Simply send us your samples:- Fast turnaround - Quality data - Low costPlease email or call 1-510-782-9988 x 2 to request assay service.
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2021-08-20
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抗滋养层细胞膜抗体检测意义,在于合体滋养层浆膜上有可被母体识别的抗原系统,它们的存在影响着孕妇与胎儿之间的免疫平衡,研究表明在不明原因流产的妇女血清中,抗滋养层细胞膜抗体比正常孕妇明显增高,种抗体的增高与流产之间有着密切联系。其机制可能与封闭抗体的减少有关。  合体滋养层细胞的表面不表达HLA,但存在一种独特的抗原,称滋养层抗原(TA)。由于该抗原的抗血清能与淋巴细胞发生交叉反应,故命名为滋养层淋巴细胞交叉反应抗原(trophoblast-lymphocyte cross reaction antiˉgen,TLX)。TLX(实为抗TA的血清蛋白)在功能上能诱导母体产生封闭抗体。该抗体可与TA结合,使其不能刺激母体形成免疫反应过程。
如果是单标兔抗羊跟驴抗羊无所谓,只是注意封闭血清跟二抗来源相同就行。但如果是双标,就要考虑到二抗种属问题了
建议使用二抗来源的血清,这样,如果样品对二抗来源有非特异吸附的话,在这一步就可以排除了,降低背景,提高信噪比,比较有利于显现一些弱的信号。
如果封闭不好,二抗直接与样品结合,荧光背景高,就很难判断结果了。
封闭是血清与非特异性位点结合,以消除非特异性染色,提高目的蛋白的准确性和降低背景。并非所有的免疫组化都由山羊血清封闭,因为一般二抗是羊抗X,所以采用山羊血清,其与使用二抗来源有关。
你也可以搜索【牧羊人】或者【牧羊人论坛】多和其他养羊朋友一起交流养羊体会和疑难解答哦。

目前是最好的养羊技术交流平台。
那里有一个版块叫做【有问必答】的,一般只要描述清楚的问题,都能够得到论坛羊友的解答。
如果是关于 羊病问题,最好是把羊的大小、品种、平时喂什么料、体温排泄变化等详细说明。如果能够搭配清晰的图片说明更好了。
对于高级用户 还能提供实地学习机会哦
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.

2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟

3.PBS洗净:3min*3

4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS

5.PBS洗净:2*5min

6.羊血清封闭:37度,20分钟

7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时

8.4度 PBS洗净,3min*5次

9.二抗 37度小于一小时
要看你山羊抗体的交叉反应效果。BSA的效果。
一般用BSA。
病情描述(发病时间、主要症状等):封闭抗体的检验单帮忙看看。AB血清-CD3+78.5AB血清-CD4+52.8AB血清-CD8+25.3患血清-CD3+69.9患血清-CD4+46.4患血清-CD8+21.6CD3-BE8.6CD4-BE6.3CD8-BE3.7想得到怎样的帮助:请问这个数值正常吗?AB...
糖包衣及其方法 X技术123
阿赛_seven2018-01-26
都说是封闭,羊血清究竟封闭的是什么(抗原?)那接下来加一抗怎么又能反应结合?不是封闭了吗?
拿你查看免疫组化试剂盒说明书,
针对这个应该有详细的解说的
一抗孵育时间 搜索123
椃棜L2018-02-10
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.

2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟

3.PBS洗净:3min*3

4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS

5.PBS洗净:2*5min

6.羊血清封闭:37度,20分钟

7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时

8.4度 PBS洗净,3min*5次

9.二抗 37度小于一小时
1、一般来说二抗来源 goat 和donkey 较多,rb用的少。
2、对的,封闭血清一般建议与二抗来源一致。