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| Product Name | SensoLyte ® AFC Thrombin Activity Assay Kit *Fluorimetric* |
| Size | 1 kit |
| Catalog # | AS-72130 |
| US$ | $456 |
Thrombin, a serine protease, plays a central role in hemostasis by converting soluble plasma fibrinogen into an insoluble fibrin clot and by promoting platelet aggregation.Thrombin also influences a number of normal and pathological processes, including inflammation, tissue repair, embryogenesis, angiogenesis, and tumor invasion.The SensoLyte® AFC Thrombin Assay Kit is optimized for screening of enzyme inhibitors.This kit contains a fluorogenic substrate which shows high reactivity and low background.Thrombin cleaves the substrate resulting in the release of the AFC (7-amido-4-trifluoromethylcoumarin) fluorophore.Fluorescence can be monitored at excitation/emission= 380 nm/500 nm.The assays are performed in a convenient 96-well or 384-well microplate format. Kit size: 100 assays. | |
| Detailed Information |  Datasheet Material Safety Data Sheets (MSDS) |
| Product Citations | Ambadapadi, S. et al. (2015) Reactive Center Loop (RCL) peptides derived from serpins display independent coagulation and immune modulating activities J. Biol. Chem. 291 2874-2887doi: 10.1074/jbc.M115.704841Nair, DG. et al. (2014). Interactions of some commonly used drugs with Human α-thrombin. J Biomol Struct Dyn doi: 10.1080/07391102.2014.923329.Wendeler, M. et al. (2014). Process-scale purification and analytical characterization of highly gamma-carboxylated recombinant human prothrombin. J Chromatogr A 1325, 171.Yang, H. et al. (2013). Interleukin-1 promotes coagulation, which Is necessary for protective immunity in the lung against Streptococcus pneumoniae infection. J Infect Dis 207, 50. doi: 10.1093/infdis/jis651.Sasaki, T. et al. (2012). Intravenous and oral administrations of DD2 [7-Amino-2-(sulfanylmethyl)heptanoic acid] produce thrombolysis through inhibition of plasma TAFIa in rats with tissue factor-induced microthrombosis. Thrombosis Res 130, e222. doi:10.1038/jid.2012.204Lim, HA. et al. (2011). Novel agmatine and agmatine-like peptidomimetic inhibitors of the West Nile Virus NS2B/NS3 serine protease. Eur J Med Chem 10.1016/j.ejmech.2011.04.055. |
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四川禾业科技有限公司在发布的冻干粉水分测定仪|卡尔费休容量法供应信息，浏览与冻干粉水分测定仪|卡尔费休容量法相关的产品或在搜索更多与冻干粉水分测定仪|卡尔费休容量法相关的内容。 查看更多
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其他 SouthernBiotech(SBA)公司建于1982年,致力于为全球免疫研究的科学家提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆二抗和其它特异性抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒... 查看更多
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Separopore蛋白A交联琼脂糖凝胶4B-CL（冻干粉）ProteinA-Separopore(Agarose)4B-CL(Lyophilized)(20181028-1)是由苏州达麦迪生物医学科技有限公司代理或销售的Separopore品牌的试剂，产品来源于美国。苏州达麦迪生物医学科技有限公司是中国最权威的Separopore蛋白A交联琼脂糖凝胶4B-CL（冻干粉）ProteinA-Separopore(Agarose)4B-CL(Lyophilized)(20181028- 查看更多
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2021-08-16
免疫组化中的血清封闭原理封闭血清没有也不应该和样品发生反应，应该是说，血清把没有包被 (coating)到的地方通通填满，以防止一抗乱吸附，所以封闭可以用二抗同物种血清，也可用 BSA 或 Gelatin，就是不能使用一抗同物种血清，因为里面含有同物种抗体，肯定会被二抗辨识。先加一抗后再封闭的话，一抗就会结合到固相表面上，这种结合力是非特异性的疏水作用力，这种作用力是比较强的，经过处理的固相表面如硝酸纤维膜，酶标板对蛋白的吸附力更强，你 查看更多
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2021-09-07
广州蕊特生物科技有限公司在发布的血浆冻干粉供应信息，浏览与血浆冻干粉相关的产品或在搜索更多与血浆冻干粉相关的内容。 查看更多
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2021-09-06
在正常孕妇的血清中，存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性IgG抗体，它可抑制淋巴细胞反应（MLR），封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用，防止辅助T细胞识别胎儿抗原的抑制物，并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子（MIF），故称其为封... 查看更多
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2021-08-23
南京森贝伽生物科技有限公司在发布的兔血浆/冻干粉兔血浆供应信息，浏览与兔血浆/冻干粉兔血浆相关的产品或在搜索更多与兔血浆/冻干粉兔血浆相关的内容。 查看更多
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2021-09-23
盘古基因生物工程（南京）股份有限公司在发布的bFGF冻干粉供应信息，浏览与bFGF冻干粉相关的产品或在搜索更多与bFGF冻干粉相关的内容。 查看更多
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2021-08-28
为贯彻落实国家食品药品监督管理局加强无菌药品生产监管视频会议的精神，加快新版GMP的实施工作，督促注射剂生产企业注重GMP设备改造过程中的系统验证工作，近日，浙江省食品药品监督管理局在杭州举办了大容量注射剂和冻干粉针剂生产企业座谈会。全省注射剂生产企业质量负责人及部分地市GMP检查联络员共约60余人参加了此次座谈会。会上，浙江省局传达了国家局“加强无菌药品生产监管视频会议”的精神，就GMP设备改造过程中，批量成倍... 查看更多
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2021-08-29
在线客服 : :tongpaibio 菌种 菌液的制备：一：取上述培养好的菌种斜面移入接种室或净化工作台，放置室温后, 用接种环取菌苔少许接种置营养肉汤中(10ml/支,已灭菌), 将已接种毕的细菌管置35℃~37℃培养18~24小时，取出备用。一般于冰箱中保存可用两周。二：取上述培养好的营养肉汤菌悬液（浓菌液）1ml，加到9ml 0.9%无菌氯化钠溶液混匀，为10-1，再取另一只刻度吸管吸取10-1菌液1 ml加到9ml 0.9% 查看更多
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2021-08-08
天津阿斯尔生物科技有限公司在发布的重组甲状腺过氧化物酶 SF9 (冻干粉)供应信息，浏览与重组甲状腺过氧化物酶 SF9 (冻干粉)相关的产品或在搜索更多与重组甲状腺过氧化物酶 SF9 (冻干粉)相关的内容。 查看更多
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2021-09-01
Equitech-Bio公司IgG冻干粉，Equitech-Bio公司IgG冻干粉 查看更多
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封闭抗体的检验单帮忙看看。AB血清CD3+78.5_百姓问医生123
蜜桃妙2021-08-02
细胞培养时要用无血清培养基,为何还要加FBS 细胞技术讨论版...123
n1e247J2018-02-05
牛血清白蛋白（BSA），又称第五组分，是牛血清中的一种白蛋白在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，能减轻有些不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性。
牛血清白蛋白（BSA）用途：
1、 在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，减轻不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的。
2 、ELISA中也常常用到，比如封闭液，样本稀释液，酶结合物稀释液都可以用BSA。
3、生化研究，遗传工程和药物研究。
胎牛血清（fbs）是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
胎牛血清(FBS)的作用：
1、提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。
2、提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5、起酸碱度缓冲液作用。
6、提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。展开
牛血清白蛋白（BSA）用途：
1、 在酶切反应缓冲液中加入BSA，通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附，能减轻有些酶的变性，减轻不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的。
2 、ELISA中也常常用到，比如封闭液，样本稀释液，酶结合物稀释液都可以用BSA。
3、生化研究，遗传工程和药物研究。
胎牛血清（fbs）是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
胎牛血清(FBS)的作用：
1、提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。
2、提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。
3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。
4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5、起酸碱度缓冲液作用。
6、提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。展开
每个月20号申请帮别人做封闭抗体治疗对我自己的身体有影响吗？每个月二十毫升血帮别人做封闭抗体治疗对我自己的身体有影响吗
免疫双标二抗的封闭血清选择和二抗的种属来源选择西域123
小伙q662021-07-20
建议使用二抗来源的血清，这样，如果样品对二抗来源有非特异吸附的话，在这一步就可以排除了，降低背景，提高信噪比，比较有利于显现一些弱的信号。
如果封闭不好，二抗直接与样品结合，荧光背景高，就很难判断结果了。
如果封闭不好，二抗直接与样品结合，荧光背景高，就很难判断结果了。
GE医疗一体化同步扫描SIGNA PET/MR成像系统正式发布首页2021第...123
2021-07-25
做封闭的时候是不应该加AB型血清的。做封闭的目的就是用非特异性的抗体和蛋白质结合掉细胞上那些可以和抗体非特异性结合的位点。
血清的目的就是因为含有白蛋白和抗体，所以一举两得。不过不应该用AB型。这是人的血清。流式检测一般都是使用小鼠单克隆抗体，所以封闭的血清也应该是用种的小鼠血清。
血清的目的就是因为含有白蛋白和抗体，所以一举两得。不过不应该用AB型。这是人的血清。流式检测一般都是使用小鼠单克隆抗体，所以封闭的血清也应该是用种的小鼠血清。
(求助)ELISA封闭的时间应该是多少比较好啊? 免疫学讨论版...123
liuhua2018-02-04
我们做的是:5%猪血清（顺便说一下，有时是不可以用牛血清封闭的，比如用bsa免疫的动物血清的检测）in PBST,37度一个小时即可。实验室整个就是这样做的，没有出现什么问题。本数据来源于百度地图，最终结果以百度地图最新数据为准。
免疫组化中的血清封闭原理 实验方法123
林子哥902018-01-14
封闭是血清与非特异性位点结合，以消除非特异性染色，提高目的蛋白的准确性和降低背景。并非所有的免疫组化都由山羊血清封闭，因为一般二抗是羊抗X，所以采用山羊血清，其与使用二抗来源有关。
贝克曼A63880 核酸纯化试剂盒上海林钊生物科技有限公司123
2021-07-24
求免疫荧光DHE染色具体步骤和细胞流式的具体步骤_问答详情_...123
夏暖10086sky2018-02-03
细胞免疫荧光的详细操作步骤1，取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心。2，4%多聚甲醛固定20分钟，PBS洗三遍。3，0.2%TritonX100通透10分钟，PBS洗三遍。4，与二抗相同宿主的血清封闭30分钟，PBS洗三遍。5.，一抗4度湿盒内过夜，也可37度2小时，感觉前者效果好，PBS洗三遍。6，二抗室温2小时，或者37度1半小时，PBS洗三遍。7，最好用DAPI染核，然后直接照荧光片。8，蒸馏水洗掉PBS，甘油封片，指甲油封片子的四周。
【求助】一抗是羊抗鼠的,二抗必须用驴抗羊吗? 免疫学讨论版...123
猫隐丶隹悤2021-07-31
如果是单标兔抗羊跟驴抗羊无所谓，只是注意封闭血清跟二抗来源相同就行。但如果是双标，就要考虑到二抗种属问题了
三天两觉吧这是三天两觉吧我们的日常是坑别人,写脑洞,...123
°迷岛xQZ32018-02-02
1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白，两者操作过程有哪些不同?
参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇，切片固定用多聚甲醛，而染色方法是一样的。
2、问:近期要做免疫荧光双标，不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?
参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:
(1)选取一抗时要来源于两种不同的动物，我用的是来源于rabbit和rat的抗体，二抗则是不同荧光信号标记的，我用的是donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti-rat-Tex-Red(红)。
(2)我的做法是两种一抗（CHI抗体）同时孵育，然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索，我感觉一抗4度孵育过夜比较好，背景比较清晰。
(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片，阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG，荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。
(4)封闭血清与二抗来源动物一致，我用的是10%的正常donkey血清。
(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。
3、问:本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光，二抗为FITC标记，想请教各位大侠:
(1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
(2)封片时是否用甘油缓冲液即可，还是用甘油和0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液等量混合封片?
(3)免疫酶染色中的3%过氧化氢及2N盐酸是否还需要用?
参考见解:
(1)你的二抗是用FITC标记的，为避免荧光分解，分装及荧光显微镜观察时均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液，后者能使玻片透明;
(3)关于免疫酶染色，如果是用过氧化物酶做标记，就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶;2N盐酸需要使用，目的是使DNA变性，让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合。
4、问:做间接法免疫荧光染色，如何设置对照?
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照，看是否非特异性染色。
(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化，这个对照必须有，目的是看自发荧光，脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
(2)阴性对照:标本直接滴加二抗，呈阴性反应。
(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清，以PBS冲洗后，在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体，应呈阴性反应。
5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色，结果用激光共聚焦显微镜看很好:有阳性信号，阴性对照组也没有荧光，但是拿到荧光显微镜下看，我的阴性对照组一片绿，像非特异性染色，到底哪个结果才是真实的呢?
参考见解:激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多，出现上述现象首先要排除荧光显微镜的问题，如是不是紫外灯泡寿命到期了或者别的原因，荧光显微镜没有问题，那就以共聚焦显微镜的结果为主。展开
参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇，切片固定用多聚甲醛，而染色方法是一样的。
2、问:近期要做免疫荧光双标，不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?
参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:
(1)选取一抗时要来源于两种不同的动物，我用的是来源于rabbit和rat的抗体，二抗则是不同荧光信号标记的，我用的是donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti-rat-Tex-Red(红)。
(2)我的做法是两种一抗（CHI抗体）同时孵育，然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索，我感觉一抗4度孵育过夜比较好，背景比较清晰。
(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片，阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG，荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。
(4)封闭血清与二抗来源动物一致，我用的是10%的正常donkey血清。
(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。
3、问:本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光，二抗为FITC标记，想请教各位大侠:
(1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
(2)封片时是否用甘油缓冲液即可，还是用甘油和0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液等量混合封片?
(3)免疫酶染色中的3%过氧化氢及2N盐酸是否还需要用?
参考见解:
(1)你的二抗是用FITC标记的，为避免荧光分解，分装及荧光显微镜观察时均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液，后者能使玻片透明;
(3)关于免疫酶染色，如果是用过氧化物酶做标记，就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶;2N盐酸需要使用，目的是使DNA变性，让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合。
4、问:做间接法免疫荧光染色，如何设置对照?
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照，看是否非特异性染色。
(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化，这个对照必须有，目的是看自发荧光，脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
(2)阴性对照:标本直接滴加二抗，呈阴性反应。
(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清，以PBS冲洗后，在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体，应呈阴性反应。
5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色，结果用激光共聚焦显微镜看很好:有阳性信号，阴性对照组也没有荧光，但是拿到荧光显微镜下看，我的阴性对照组一片绿，像非特异性染色，到底哪个结果才是真实的呢?
参考见解:激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多，出现上述现象首先要排除荧光显微镜的问题，如是不是紫外灯泡寿命到期了或者别的原因，荧光显微镜没有问题，那就以共聚焦显微镜的结果为主。展开
小鼠3T3L1前脂肪细胞系的特异性标记论文万方医学网123
小裤衩°3912021-07-26
1、一般来说二抗来源 goat 和donkey 较多，rb用的少。
2、对的，封闭血清一般建议与二抗来源一致。
2、对的，封闭血清一般建议与二抗来源一致。
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