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Gendepot/Ceraplex Keratinocyte Serum-Free Complete Media(10X), Single quotes, C3380/50ml/C3380-005
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Ceraplex Keratinocyte Serum-Free Complete Media is a serum-free medium for optimized for the cultivation of epithermalKeratinocytes without feeder cells. The medium is optimized for primary human cells but can be used for horse and Porcine and rat keratinocytes when adapting the CaCl2concentration. In addition, it is suited for rat corneal keratinocytes. BPE,EGF,Insulin,Hydrocortisone,Epinephrine,Transferrin and CaCl2are contained in the medium.

ReconstitutionAdd to cell culture tested water( GenDEPOT UltraPure Water, Cell Culture Tested , W 9200-045, 450ml)

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在正常孕妇的血清中,存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性IgG抗体,它可抑制淋巴细胞反应(MLR),封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用,防止辅助T细胞识别胎儿抗原的抑制物,并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子(MIF),故称其为封... 查看更多>
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SeparoporeAMP亲和层析凝胶4B(冻干粉)AMP-Sepharose4B(Lyophilized)(20182005-2)是由苏州达麦迪生物医学科技有限公司代理或销售的Separopore品牌的试剂,产品来源于美国。苏州达麦迪生物医学科技有限公司是中国最权威的SeparoporeAMP亲和层析凝胶4B(冻干粉)AMP-Sepharose4B(Lyophilized)(20182005-2)试剂销售服务商之一,在其它等地方销售SeparoporeAMP亲和层析凝胶4B(冻干粉) 查看更多>
什么是封闭血清(Blocking Serum=Normal Serum)?封闭血清就是将养殖的非免疫的正常动物采血,然后不加抗凝剂,血液凝固,血块收缩,析出的淡黄色液体。经过特殊工艺处理后的血清,特别适在各类免疫学实验中用于封闭处理, 比如:IHC、IF/ICC、ELISA等。 血清与血浆的区别?血浆是指血液中除去细胞成分后剩下的淡黄色或无色半透明液体,一般需要经过抗凝处理 。血清与血浆的区别在于血清中不含某些在凝血过程中被消耗的凝... 查看更多>
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如果是单标兔抗羊跟驴抗羊无所谓,只是注意封闭血清跟二抗来源相同就行。但如果是双标,就要考虑到二抗种属问题了
封闭不当反而会使阴性本底增高,操作时洗涤彻底,取决于 ELISA 的模式及具体的实验条件,业已起到了类似封闭剂的作用.5%的牛血清白蛋白,封闭一般是不可少的(见2,而且封闭后的载体不易长期保存,吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙 。特别是用单抗腹水直接包被时。高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用。 BIM试剂盒为您提供.2。脱脂奶粉也是一种良好的封闭剂,双抗体夹心法。抗原或抗体包被时所用的浓度较低.05%-0。包被好的E LISA 板干燥后放入密封袋或锡袋中,封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,从而排斥在ELISA 其后的步骤中干扰物质的再吸附。但在间接法测定中; ,因此在试剂盒的制备中较少应用; ,在低温可保存数月。一般说来,其最大的特点是价廉。并非所有的ELISA 固相均需封闭,也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封闭剂的,可以高浓度使用(5%)。封闭的手续与包被相类似; 。最常用的封闭剂是0,不经封闭也可得到满意的结果;封闭 (blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程,但由于奶粉的成份复杂.2)。封闭是否必要,只要酶标记物是高活性的
不可以。透膜也好,酶消化也好,抗原热修复也好,消除内源性过氧化物酶和内源性生物素也好,都要在血清封闭之前,如果你忘记了前面的步骤,可以洗去封闭液,补上必须的程序,再封闭,不洗,吸干封闭液直接加一抗。
1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同?
参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的。
2、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?
参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:
(1)选取一抗时要来源于两种不同的动物,我用的是来源于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti-rat-Tex-Red(红)。
(2)我的做法是两种一抗(CHI抗体)同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索,我感觉一抗4度孵育过夜比较好,背景比较清晰。
(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片,阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG,荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。
(4)封闭血清与二抗来源动物一致,我用的是10%的正常donkey血清。
(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。
3、问:本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光,二抗为FITC标记,想请教各位大侠:
(1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
(2)封片时是否用甘油缓冲液即可,还是用甘油和0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液等量混合封片?
(3)免疫酶染色中的3%过氧化氢及2N盐酸是否还需要用?
参考见解:
(1)你的二抗是用FITC标记的,为避免荧光分解,分装及荧光显微镜观察时均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液,后者能使玻片透明;
(3)关于免疫酶染色,如果是用过氧化物酶做标记,就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶;2N盐酸需要使用,目的是使DNA变性,让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合。
4、问:做间接法免疫荧光染色,如何设置对照?
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照,看是否非特异性染色。
(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化,这个对照必须有,目的是看自发荧光,脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
(2)阴性对照:标本直接滴加二抗,呈阴性反应。
(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清,以PBS冲洗后,在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体,应呈阴性反应。
5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色,结果用激光共聚焦显微镜看很好:有阳性信号,阴性对照组也没有荧光,但是拿到荧光显微镜下看,我的阴性对照组一片绿,像非特异性染色,到底哪个结果才是真实的呢?

参考见解:激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多,出现上述现象首先要排除荧光显微镜的问题,如是不是紫外灯泡寿命到期了或者别的原因,荧光显微镜没有问题,那就以共聚焦显微镜的结果为主。展开
在免疫组化中用二抗同源的非免疫动物血清进行封闭的目的是为了减少非特异性结合.你所检测的标本是鼠的,如果你再用鼠的血清进行封闭的话,那么这个血清中就可能含有你所检测的目的蛋白,然后一抗就与之结合,干扰实验结果.而如果你用羊的血清进行封闭的话,那就起不到封闭的目的了,就是说就算这个封闭血清与一些非特异位点结合了,但是因为它是羊的,所以二抗同样会和它结合,进而出现假阳性的结果!所以最好用二抗同源的正常动物血清封闭
抗滋养层细胞膜抗体检测意义,在于合体滋养层浆膜上有可被母体识别的抗原系统,它们的存在影响着孕妇与胎儿之间的免疫平衡,研究表明在不明原因流产的妇女血清中,抗滋养层细胞膜抗体比正常孕妇明显增高,种抗体的增高与流产之间有着密切联系。其机制可能与封闭抗体的减少有关。  合体滋养层细胞的表面不表达HLA,但存在一种独特的抗原,称滋养层抗原(TA)。由于该抗原的抗血清能与淋巴细胞发生交叉反应,故命名为滋养层淋巴细胞交叉反应抗原(trophoblast-lymphocyte cross reaction antiˉgen,TLX)。TLX(实为抗TA的血清蛋白)在功能上能诱导母体产生封闭抗体。该抗体可与TA结合,使其不能刺激母体形成免疫反应过程。
一抗孵育时间 搜索123
椃棜L2018-02-10
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.

2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟

3.PBS洗净:3min*3

4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS

5.PBS洗净:2*5min

6.羊血清封闭:37度,20分钟

7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时

8.4度 PBS洗净,3min*5次

9.二抗 37度小于一小时
怎么引进,hhp全封闭血脂去除系统-HHP去脂降粘技术
,我需要这个仪器有关的供应商的信息,有知道的人不,腾讯看你的专家团队给力不,想买这个仪器,但关于这个资料我已经了解很多了,但不知道去哪引进,哪里买。麻烦告诉哪里买,
我们做的是:5%猪血清(顺便说一下,有时是不可以用牛血清封闭的,比如用bsa免疫的动物血清的检测)in PBST,37度一个小时即可。实验室整个就是这样做的,没有出现什么问题。本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
可以使用无蛋白封闭液 PW040 PW041 PW042,
血清封闭:组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合,造成后续结果的假阳性;封闭血清一般是和二抗同一来源的,血清中动物自身的抗体,预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合;也可以用小牛血清、BSA、羊血清等,但不能与一抗来源一致。
拿你查看免疫组化试剂盒说明书,
针对这个应该有详细的解说的
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