Description:
BacPAK6Sec+linearizedbaculovirusDNAisthelatestbaculovirusexpressionsystemtocomeoutoftheOETlabs.BytakingtheoriginalBacPAK6systemandgeneticallymodifyingit,BacPAK6Sec+isabletoincreasetheyieldofrecombinantproteinandtheeaseofharvesting.
BacPAK6Sec+containsadeletionofthechitinasegene(chiA)fromtheoriginalBacPAK6viralbackbone.
Chitinasehasbeenshownbybothconfocalandelectronmicroscopytolocatetotheendoplasmicreticulum,whereitisdenselypackedinaparacrystallinearray,whichseverelyinhibitsthefunctionandefficacyofthesecretorypathway.BydeletingthechiA,secretionoftargetproteinsintothecytoplasmisincreased,greatlyenhancingtheyieldofharvestablerecombinantprotein.
TheconceptofdeletingthechiAgenecameafterthesuccessoftheflashBAC™platformthatutilizesthesamegeneticdeletionforincreasedrecombinantproteinyield.TofindoutmoreabouttheflashBAC™system,clickhere.
BacPAK6linearDNAistheoriginalconvenient,highlyefficientreagentforgeneratingrecombinantbaculovirusexpressionvectors. Itcomprisesamodified Autographacalifornica nucleopolyhedrovirus(AcMNPV)genomewith lacZ insertedinplaceofthenativepolyhedringenecodingregionforconvenientblue/whiteselection.
DigestionofBacPAK6DNAatthreesiteswithBsu36Iremoves lacZ andpartofORF1629,whichisanessentialAcMNPVgene. ThelinearvirusDNAisunabletoinitiateareplicationcycleininsectcells.
Co-transfectionofinsectcellswithlinearBacPAK6DNAandacompatIBLetransfervectorcontainingthecompleteORF1629andaforeigngeneofinterestresultsinrecombinationandrestorationofthecircular,infectiousvirusgenome. Over95%ofthevirusderivedfromtheco-transfectioncomprisesrecombinantvirus. Usually,asingleplaqueassaytitrationincubatedwithX-galandcounterstainedwithneutralredissufficienttodifferentiateparentalbluefromrecombinantwhite(colourless)plaques. ThesecanbereADIlyisolatedandamplifiedtoworkingstocksofpurifiedrecombinantvirusinafewdays.
TheBacPAK6Sec+reagentfromOETLtdcomprisestransfection-ready,linearized(Bsu36I-digested)virusDNA. Itisavailablein5,24and96reactionpacks. Forbulkpurchases,pleasecontactusoninfo@oetltd.com.
WeofferapromotionaldealonallBacPAK6productstoincludeafree3reactionflashBAC™kittohelpyoudecideifmakingtheswitchistherightchoiceforyourlab.
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如果是做科研，国内外很多知名的药企都是你学习借鉴的榜样。
我想在体外培养的细胞中，加入PD-L1重组蛋白，激活PD-L1:PD-1通路，但我没能查到相关的文献，不清楚PD-L1重组蛋白的用量。请问各位有相关的经验吗？或者阅读过相关的文献？
事实上,现在多数药用级别白蛋白都是用血清生产的.
白蛋白的销售方向若是面向实验室,可采用重组质粒转到微生物发酵的方法生产,对土地面积的要求小,更集约,成本效率更高.
各位业内前辈，我们正在考虑引进符合GMP认证标准的CHO细胞系，用于表达可做疫苗生产的重组蛋白类。目前已有符合标准信息的是Thermofisher的CHO-S悬浮培养细胞资料，希望能再多了解一些和这株细胞类似的其他公司符合GMP标准的生产株细胞做个比较。谢谢指教！
基因敲除除可中止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的一门新技术。80年代初，胚胎干细胞（ES细胞）分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年，首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。此后的几年中，基因敲除技术得到了进一步的发展和完善。
基因敲除的技术路线如下：
（1）构建重组基因载体﹔
（2）用电穿孔、显微注射等方法把重组DNA转入受体细胞核内﹔
（3）用选择培养基筛选已击中的细胞﹔
（4）将击中细胞转入胚胎使其生长成为转基因动物，对转基因动物进行形态观察及分子生物学检测。
基因敲除的靶细胞目前最常用的是小鼠ES细胞。基因敲除的技术路线虽不复杂，但由于高等真核细胞内外源DNA与靶细胞DNA序列自然发生同源重组的机率非常低，约为百万分之一，要把基因敲除成功的细胞筛选出来是一件非常困难的工作。因此，同源重组的筛选和检测就成了基因敲除技术所要解决的关键问题。目前已有多种筛
基因重组只是控制同一性状表达不同而已，但是它不会改变性状的基本情况。如：控制眼睛颜色的基因，亲本的基因重组之后可能亲本为黑色，子代便为蓝色。但绝对不会控制眼睛颜色的基因在重组之后就变成控制耳朵的基因。
