常见缓冲液配制方法执业药师备考
提供商: 上海天贺生物科技有限公司 服务名称: 石蜡包埋 规格: 25元/样本 通常制作石蜡切片前,需先进行5个步骤,即固定好的组织需经脱水、透明、浸蜡、包埋,方可进行石蜡切片。
一.脱水
酒精是制片最常用的试剂,可与水互溶,酒精的脱水能力较强,对于组织会有明显的收缩作用。因此用酒精作为脱水剂时,应先从低浓度酒精开始,浓度递增,这样可以避免组织过度收缩。目前有些脱水机具备震摇功能,这样可加快脱水进程。
二.透明
组织脱水后,要经过浸蜡透明的过程,使石蜡渗透到组织中去,达到包埋的支持作用。由于脱水剂如酒精与石蜡不溶,因此必须使用一种与酒精和石蜡都互溶的媒剂将酒精置换掉,待酒精完全被完全取代后,组织成透明状态,即透明。
三.浸蜡
透明后即可将组织浸入溶解的石蜡进行浸蜡,石蜡逐渐浸入组织间隙,取代透明剂,这一过程叫浸蜡。石蜡的质量和熔度与切片质量密切相关,所用的石蜡有一定的熔点和硬度。
四.包埋
包埋,就是将浸蜡的组织块从溶解的石蜡中取出,放入充满熔融石蜡的包埋框内,使组织和包埋剂相熔并迅速冷却的过程。包埋剂凝固后,加强了组织的硬度和韧度,从而利于切片。
五.石蜡切片
在包埋以后,就可进行切片。包埋好的石蜡块装在切片机上,进行固着整修,通常切片厚度为3-5um,注意切片速度不宜太快,防止切片机震动厉害引起切片厚薄不均匀。切好的切片须贴附于载玻片上,一般采用捞片法,但切片常有细小的横纹,必须经展平后才能贴附,否则影响染色和观察。
组织切片是无色透明的,必须进行染色后才能观察到各种微细结构,染色后的切片须再次经过脱水、透明、中性树脂封片,待封藏剂凝固后便成为一张成功的石蜡切片。
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发布于 : 2019-04-25
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