（求助）关于脱蜡的请教
2005-07-29
问题描述：
我的切片在做免疫组化,总是感觉蜡脱不干净,不知道什么原因?我的程序是
1二甲苯中脱蜡5-10分钟。
2换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。
3无水乙醇5分钟。
490%乙醇2分钟。
570%乙醇2分钟
6蒸馏水2分钟。
从烤箱出来需要冷却吗?
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chengdepk2000
用户
脱蜡之前要先放入烤箱考一下,目的是是石蜡在高温条件下溶解,这样在脱蜡过成中石蜡才能更充分的溶解在二甲苯中,我觉得这样做的效果才好.
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yixiantian_1978
用户蜡脱干净很重要，你在二甲苯中的脱蜡时间太短，而且没有事先放入烤箱考一下。给你我们教研室的脱腊步骤，1.切片置60℃烤箱中预温30min。2‘切片浸入二甲苯（Ⅰ）中，60℃ 30min，然后入二甲苯（Ⅱ），室温10min脱蜡。3.切片于室温下依次入无水乙醇10min，95％乙醇5min，90％乙醇2min，80％乙醇2min，70％乙醇2min，双蒸水2min。效果挺好。耐心点 祝好运
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shihong4699
用户我们的做法:1、脱蜡前置烤箱中1~2小时2、以下全为室温：二甲苯III，无水乙醇III最少各10分钟，然后95％，90％，80％，70％乙醇各5分钟，后流水冲5分钟，单蒸水洗一遍，再进行抗原修复，效果很好谨供参考，祝好运！！
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tommaomao
用户不同意yixiantian_1978 看法，石蜡切片应该在烤箱中考1-2小时温度为60度，但二甲苯脱蜡时。不能放在高温环境，会影响到某些抗原性，许多抗原在二甲苯高温下会失去抗原性，所以甚用。你放在常温下二甲苯I， II各15分钟即可。酒精无水乙醇3min，95％乙醇3min，80％乙醇3min.祝好运
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elist43
用户烤箱中应该是60度烤，1～2个小时可以了，目的是为了增加组织附在玻片上的粘合力，烤完以后拿出来就可以脱蜡染色了，因为我们一般是用全自动的染色机，所以我烤完片子就拿出来染色的。最初几步二甲苯脱蜡时间需要长一点，你5～10分钟的时间是要看你切片的厚度和片子的大小的，片子大一点，第一缸脱20分钟也可以，蜡脱的干净点，后面几缸可以时间短些，你酒精的时间也偏短了点，可以适当增加一点时间，自己模一下条件吧，有点耐心！
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yushp
用户我们实验室使用松香脱蜡，又干净又没有二甲苯的异味，方法和二甲苯的差不多。
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shuaierhu
用户60。烤1～2小时就可以了，然后脱腊一定要彻底，换新鲜的二甲苯，至少15分钟，二甲苯2 至少20分钟，这些指的时室温情况下（25。），如果温度低时间要延长。
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mouse778191
用户60度烤30分钟，放入二甲苯中时间可以延长30分钟都没有问题的，另外二甲苯最好经常换新的。我也觉得不要在两次二甲苯中再烤。
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源子9185
用户我也遇到了相同的问题，愁死，在摸索条件，楼主摸出条件来记得说一声啊~不过我在想会不会是片子的问题？
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