TaqDNA聚合酶 TaqDNA聚合酶属于耐热性聚合酶,分子量94KD,催化5→3DNA合成,DNA聚合时的延伸速度是所有嗜热DNA聚合酶中最快的。其最佳反应温度70~75℃,dNTPs的工作浓度为100~300μM,最佳Mg2+浓度为2~3mM,最佳pH为8.1~9.1,其PCR产物含3端单个dA,能进行T-A克隆。DNA扩增(PCR)时,20μl反应体系需1~1.5unit,50μl反应体系需2~3units。 经实验证实,本公司TaqDNA聚合酶能很好地扩增2.1kb人基因组DNA片段和6kbLambda基因组DNA片段。超过此扩增长度的结果不能保证。 V-TaqDNA聚合酶 ——扩增长片段及复杂结构的DNA聚合酶 TaqDNA聚合酶是最常用的PCR酶,以LambdaDNA为模板可以很好地扩增6kb的DNA片段,以人基因组DNA为模板可以很好地扩增2kb的DNA片段,但很难扩增更长的DNA片段。为了克服TaqDNA聚合酶的这种缺陷,许多公司采用了各种各样的PCR系统,系统中包含TaqDNA聚合酶和有校对活性的耐热DNA聚合酶。而V-TaqDNA聚合酶尤其适合复杂的长片段的扩增,它能扩增长至10kb的人基因组DNA和20kb的LambdaDNA。与U-TaqDNA聚合酶相比,V-Taq的另一个优点是酶活力更高,扩增效率明显高于U-Taq。因此,V-TaqDNA聚合酶混合物是一种适用性更为广泛的酶,它能以各种DNA为模板,能扩增短片段的DNA也能扩增长片段的DNA,能扩增简单的DNA也能扩增复杂的DNA。 PfuDNA聚合酶 耐热性DNA聚合酶,分子量90KD,催化5→3DNA合成,DNA聚合时的保证延伸速度600bp/min,最佳温度65-75℃,dNTPs的工作浓度为100-300μM,最佳Mg2+浓度为2-3mM,最佳pH为8.1-9.1,其PCR产物为平整末端,无3端的单个dA。PfuDNA聚合酶具有独特的3→5外切核酸酶活性,能修正错配碱基,从而保证DNA扩增的高保真度。无5→3外切核酸酶活性。尤其适用于长度2kbDNA的高保真扩增,使用方法同TaqDNA聚合酶,DNA扩增(PCR)时,20μl反应体系需1~1.5unit,50μl反应体系需2~3units。 dNTPs混和装(各10mM) dNTPs(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)钠盐的三蒸水溶液,浓度各10mM,pH7.5,纯度>99.5%(HPLC),-20℃保存。可用于PCR扩增、DNA测序和缺口平移等分子生物学实验。  dNTPs独立装(各100mM) dATP,dCTP,dGTP,dTTP各0.4ml,浓度100mM,pH7.5,纯度>99%(HPLC),-20℃保存。可用于PCR扩增、DNA测序和缺口平移等分子生物学实验。 |