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—维生素C可改变重要表观遗传修饰酶功能

来自 : mayitao

货号：	P1041/P1042/P1043/P1044
供应商：	东盛生物
数量：	大量
保存条件：	-20℃保存2年。
规格：	250U/1000U/3000U/18000U

Optimus^TM HotstartTaqDNA聚合酶

货号

	P1041	P1042	P1043	P1044
规格	250U	1000U	3000U	18,000U
Optimus^TM HotstartTaqDNA聚合酶（5U/μl）	50μl	200 μl	200 μlx3	100μlx36
10×HotstartBuffer（Mg²⁺ plus）	1.25ml	1.25mlx2	1.25mlx6	1.25mlx36
6×LoadingBuffer	1ml	1ml	1ml

保存条件
-20℃保存2年。

产品说明
东盛HotstartTaqDNA聚合酶是一种创新型的化学修饰热启动酶，该酶在室温下活性被完全封闭，依赖温度激活酶活性，可有效减少非特异性扩增，具有非常高的特异性。扩增片段长度可达5kb（简单模板）。延伸速率为0.5kb/min（70-75℃）。该酶具有5-3聚合酶活性，无3-5外切酶活性。扩增产物具有3-dA末端。东盛HotstartTaqDNA聚合酶采用先进的化学修饰技术生产,动物源性DNA污染为0，稳定性更强，具有抗体法热启动酶不可比拟的优势，同时，预变性时间缩短至3分钟，工作效率比大多数化学修饰法热启动酶更高，是一款非常新颖、实用的产品。

活性定义
一个活性单位（U）指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30min内，摄入10nmol全核苷酸所需的酶量。

质量控制
相关测试表明无外源核酸内切酶或核酸外切酶污染；PCR检测无宿主残余DNA，能有效特异地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，扩增活性无明显改变。

10×HotstartBuffer
50mMKCl
100mMTris-HCl
200mMNH₄Cl
20mMMgCl₂

酶贮存液
200mMTris-HCl
1mMDTT
0.1mMEDTA
100mMKCl
0.5%Tween 20
50%Glycerol
0.5%TritonX-100

应用举例
反应体系

λ DNA（2.5ng/μl）	1μl
引物1（10μM）	2μl
引物2（10μM）	2μl
10× HotstartBuffer	5μl
dNTP（2.5mM）	4μl
HotstartTaq（5U/μl）	0.5 -1 μl
超纯水	补足至50μl

反应条件

94℃	3min
94℃	30 sec
55-68℃	30sec
72℃	1-2min
72℃	10min

注意事项
1本产品采用改进的化学修饰技术，依赖温度激活DNA聚合酶，能有效抑制非特异性结合，可在室温下配置反应体系。
2HotstartTaqDNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在PCR产物3末端通常会加上1个多余的脱氧腺嘌呤核苷。
3模板DNA推荐用量（50μl标准PCR体系）

人类基因组DNA	0.1-1μg
λ DNA	0.5-5ng
质粒DNA	0.1-10ng
大肠杆菌DNA	10-100ng

Q&A
HotstartTaqDNA聚合酶的特异性为何高于普通TaqDNA聚合酶？
答：HotstartTaqDNA聚合酶是采用化学修饰技术对普通TaqDNA聚合酶进行了修饰，室温下活性被完全封闭，需要依赖温度激活DNA聚合酶。低温时酶活性被抑制，高温时酶被激活,均在极短时间内完成。每一步反应都会有低温抑制、高温激活的效果，所以特异性更好。
HotstartTaqDNA聚合酶的扩增产物能否直接进行TA克隆？
答：可以。

温馨提示：不可用于临床治疗。

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发布于： 2020-01-05 阅读（324）

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