关于逆转录酶的反应温度
2021-07-24
问题描述：
我师兄买的MBI产的RevertAidFirstStrandCDNASynthesisKit中MuLV逆转录酶的反应温度为42OC，但我看书上介绍说，MuLV逆转录酶在42oC时迅速失活.不知道我们在用的时候应采用哪个温度？
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eeflying
用户
MMLV的反应温度为37`-42C，差不太多。 MMLV在这个温度的半衰期很短，一个多小时就差不多灭活了。 但已足够下一步PCR用了。 这就是一般酶在使用时不一定要冰上操作， 但逆转录酶一定冰上操作。
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Fang_CY
用户逆转录酶的失活与温度有一定关系。M-MLV可以在不高于42度下使用。但具体采用那个温度，要考虑你的目的基因的长度及结构的复杂程度。如果含GC不高，可以在37度下使用；如果含GC较高，则在42度下有利于打开RNA形成的二级结构，从而有利于RT。
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Yong
用户更高温度的逆转录酶是Takara的bcabest，反应温度65度，有利于扩增高GC含量的样品
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eeflying
用户Yong更高温度的逆转录酶是Takara的bcabest，反应温度65度，有利于扩增高GC含量的样品MMLV还是AMV,那么高？
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Yong
用户鬼子说是Bacilluscaldotenax来源的BcaBESTPolymerase，应该是细菌http://www.takara.com.cn/html/d/d_46.htm
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