
甲基化PCR中,DNA经亚硫酸盐修饰后,是否可以用RTPCR的试剂盒继续进行扩增?
2021-08-04
问题描述:
目前我准备做甲基化PCR,由于经费问题,可能无法购买高价的试剂盒。看过甲基化PCR的原理后,在考虑经过修饰后,是否可以用RT-PCR的试剂盒(有现成的)来做甲基化PCR。请大牛指导!另求各位推荐性价比高的亚硫酸盐修饰试剂盒,谢谢!
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weiqingsw


你说的RT-PCR的试剂盒,应该是定量PCR的试剂盒吧?这个理论上应该是不行的,甲基化PCR其实是很难扩增的,对酶的要求比较高。而qPCR的试剂盒,其实酶的量可能比普通的taq酶还少,他要求指数期数据要好,如果酶量多的话,指数期应该会比较短。可以用普通的taq酶试试。

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我目前有一个天根的荧光PCR试剂盒

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cocochanel


转化后是很难扩增的....一般的盒子恐怕不行

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好的,谢谢各位大神。我可能打算放弃做这个甲基化PCR了,以后有机会再做,谢谢各位的指导。
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