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Omega Bio-Tek/E.Z.N.A.® Universal Pathogen Kit/free-sample/D4035-00S
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Omega Bio-Tek/E.Z.N.A.® Universal Pathogen Kit/free-sample/D4035-00S
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Omega Bio-Tek
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D4035-00S
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Overview

The E.Z.N.A.® Universal Pathogen Kit allows for the rapid and reliable isolation of high-quality host genomic DNA, gram-positive and negative bacterial DNA, fungal spore DNA and viral DNA and viral RNA from tissue, urine, serum, and fecal samples. Elution volumes as low as 15 µL can be used to maintain higher nucleic acid concentrations.

The system combines Omega Bio-tek’s MicroElute columns with RBB Buffer to eliminate PCR inhibiting compounds within the samples and elute highly concentrated DNA. Purified DNA is suitable for PCR, restriction digestion and hybridization applications. There are no organic extractions, thus reducing plastic waste and hands-on time. Multiple samples can be processed in parallel.

Specifications

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

FeaturesSpecifications
Starting Amount 25-30 mg tissue, 250 µL fecal sample / serum / urine/blood,
Starting Material tissue, urine, serum, and fecal sample
Elution Volume15-100 μL
TechnologySilica MicroElute spin column
Processing ModeManual, Centrifugation/Vacuum
NoteHost genomic DNA, gram positive and negative bacterial DNA, fungal spore DNA, and viral DNA and RNA

Kit Components

ItemAvailable Separately
Disruptor TubesView Product
MicroElute® LE DNA ColumnsView Product
2 mL Collection Tubes /product/2-0ml-tube-cap-less-graduated-100-pk-50pk-cs/">View Product
SLX-Mlus BufferView Product
DS BufferCall for Pricing
PCP Buffer---
RBB BufferView Product
HBC BufferView Product
DNA Wash BufferView Product
Elution BufferView Product
Proteinase K SolutionView Product

Protocol and Resources

Product Documentation & Literature

PROTOCOL

D4035 E.Z.N.A.® Universal Pathogen Kit

SDS

D4035 SDS

SALES SHEET

Product Data

Using E.Z.N.A.® Universal Pathogen Kit on various samples produced better quality DNA.

Figure 1. Human fecal samples suspended in PBS solution were spiked into corresponding organisms. Fecal samples were then processed according to each manufacturer’s recommended protocols. qPCR was performed in triplicate for each sample using primers specific for the target organism. Data shown are averages on triplicate reactions.

Citations

View Citations
  • Lin, Qiuyuan, et al. “Real-Time Fluorescence Loop-Mediated Isothermal Amplification Assay for Rapid and Sensitive Detection of Streptococcus Gallolyticus Subsp. Gallolyticus Associated with Colorectal Cancer.” Analytical and Bioanalytical Chemistry, vol. 411, no. 26, 6 Aug. 2019, pp. 6877–6887, 10.1007/s00216-019-02059-8. Accessed 1 June 2020.

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2021-08-23
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博雅辑因(北京)生物科技有限公司在发布的CRISPR/Cas9 Validated SLC12A9 sgRNA; 基因敲除sgRNA供应信息,浏览与CRISPR/Cas9 Validated SLC12A9 sgRNA; 基因敲除sgRNA相关的产品或在搜索更多与CRISPR/Cas9 Validated SLC12A9 sgRNA; 基因敲除sgRNA相关的内容。 查看更多>
2021-09-14
围绕疾病所开展的基础研究离不开模式动物,利用基因工程技术建立的动物模型是研究疾病机制及诊治的重要手段,也是基础医学研究和转化医学研究的重要桥梁。赛业作为规模庞大的转基因/基因敲除模式动物商业技术平台,历经十多年的发展,已服务数千客户,学术引用累计超过1300篇,是目前国际上最主要、最被认可的基因工程模式动物商业服务平台之一。在基因工程模式动物领域数年不懈的耕耘,让赛业积累了丰富的模式动物制备经验,也获得了... 查看更多>
博雅辑因(北京)生物科技有限公司在发布的ELOF1 Knockout HEK293T Cell Line; ELOF1 基因敲除细胞-CRISPR供应信息,浏览与ELOF1 Knockout HEK293T Cell Line; ELOF1 基因敲除细胞-CRISPR相关的产品或在搜索更多与ELOF1 Knockout HEK293T Cell Line; ELOF1 基因敲除细胞-CRISPR相关的内容。 查看更多>
 10000平米全新模式生物研究中心:正式启用新模式生物研究中心兴建于太仓沙溪,总面积达10000平米,其中5000平米为SPF级别动物实验室,配备有IVC和EVC饲养设备超过500套,可养殖SPF级别大小鼠近30000笼,动物种群规模超10万只。 1000篇引用文献12000合作实验室:成功保障赛业生物每年可构建基因敲除鼠、转基因鼠10000例以上,合作单位涵盖全球的生命科学实验室和跨国制药公司。学术引用文献已超千篇,并多次发表在... 查看更多>
威斯腾生物在发布的转基因/基因敲除动物模型构建服务供应信息,浏览与转基因/基因敲除动物模型构建服务相关的产品或在搜索更多与转基因/基因敲除动物模型构建服务相关的内容。 查看更多>
CRISPR/Cas9 技术培训背景介绍:CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期选择压力中形成的一种适应性免疫防御,可用来有效抵御病毒及外源 DNA 的入侵。CRISPR 的 TypeII 已经被广泛用于基因工程,它包含 Cas9,crRNA 和 tracrRNA,其中 crRNA 含有能够识别 20bp 的靶向互补序列。Cas9,crRNA 和 tracrRNA 组成复合体,识别并结合 crRNA 互补的序列,然后解开 DNA 双链,Cas9 中的 HNH 活性位点剪切 crRNA 的互 查看更多>
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弗元生物,专注干细胞与再生医学研究,在干细胞、再生医学、基因编辑方向上竭力,为生物医学的发展做出自己的贡献。弗元生物细胞基因编辑平台与中科院合作开展CRISPR/Cas9细胞基因编辑工作,平台使用该技术编辑基因超过300例,具有丰富的实际操作经验。在非致死基因的敲除上成功率接近100%。目前,平台仅针对细胞进行操作,目标细胞包括肿瘤细胞系、永生化细胞系、原代细胞、间充质干细胞、胚胎干细胞、iPS。平台采用独有的操作体系,可以快速在常规细... 查看更多>
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将重组载体电转到胚胎干细胞中基因敲除小鼠已经成为现代生命科学基础研究和药物研发领域不可或缺的实验动物模型。基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠是目前为止唯一一个可以满足几乎所有基因组修饰要求的打靶技术.课题设计.获得F1代小鼠.利用百奥赛图自主开发的UCA试剂盒对sgRNA/Cas9进行活性检测;7、EGE技术(基于Crisprcas9技术)是当下比较火热的基因敲除小鼠制备技术;4;Cas9mRNA;5;2,利用PCR和southernblot杂交技术(基因敲除小鼠检测金标准)对F1代小鼠进行基因型鉴定.得到嵌合鼠.小鼠受精卵原核注射sgRNA/.按照课题设计,完成打靶载体设计和构建;2,基因敲除/,用G418筛选转染后的胚胎干细胞.体外转录sgRNA/。利用这两种技术制备基因敲除小鼠的流程是什么样的,得到阳性克隆;敲入效率高,速度快;敲入,可实现多基因,最快2个月即可得到F0代阳性鼠.进一步通过PCR和southernblot杂交技术(基因敲除小鼠检测金标准)对上一步得到的阳性克隆进行筛选,但目前只应用在小鼠的基因敲除上,在生命科学;6.设计构建打靶载体;3.获得Fo代小鼠,利用PCR对Fo代小鼠进行基因型鉴定;3.设计构建识别靶序列的sgRNA,其实不然;4、利用EGE技术(基于Crisprcas9技术)制备基因敲除小鼠的流程1,5个月得到F1F1代杂合子小鼠、人类医药和健康研究领域中发挥着重要的作用、基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠的流程.将胚胎干细胞阳性克隆注射到小鼠囊胚中。基于胚胎干细胞的基因打靶技术?一,并获得F1阳性杂合子小鼠,得到稳定整合外源基因的胚胎干细胞阳性克隆,EGE技术(基于Crisprcas9技术)系统构建简单:1;5。虽然EGE技术(基于Crisprcas9技术)制备基因敲除小鼠看似比基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠流程繁琐,而且其周期长工作量大,订购课题BAC菌.设计构建致靶基因切割的EGE系统载体质粒;8;Cas9mRNA和打靶载体,并植入到假孕小鼠的子宫内;6。二、多物种基因敲除/展开

各位同仁大家好,最近在尝试利用CRISPR/cas9技术敲除基因,苦于手里头资源有限,只有lentiCRISPRv2以及相应的包装体系,没有pSpCas9(BB)-2A-Puro(PX459)V2.0,无奈公司货期较久,想立刻开展实验,不知哪位同仁有此质粒并愿意交换,不甚感激。


在一项新的研究中,来自美国北卡罗来纳州立大学的研究人员利用CRISPR-Cas系统开发出能够识别出特定的细菌菌株,切割它们的DNA,从而消除感染,而且经证实选择性除去特定的细菌菌株同时不影响有益的细菌群体是可行的。这种新方法是利用很多细菌中存在的被称作CRISPR-Cas的免疫系统来发挥作用的。这种CRISPR-Cas系统作用机制如下所示:产生小片段被称作CRISPRRNA的RNA链,与一种特定入侵者中特异性的DNA序列匹配,当这些CRISPRRNA找到这样的匹配DNA序列时,它们释放Cas蛋白来切割这种DNA序列。在这项研究中,经设计让CRISPRRNA匹配细菌自身的靶DNA序列能够让细菌自杀,这是因为细菌的CRISPR-Cas系统攻击它自身的DNA序列;在存在不同细菌组合的培养物中测试了这种方法,并且能够只清除特定的细菌菌株;这种方法清除了一种细菌物种的菌株,但是不能清除相同物种中的另一种菌株,尽管它们的基因组序列99%是相同的。
大家好,对于新技术CRISPR/Cas9Talen-基因敲除,这里有一个群,331527578,群里有一些资料,欢迎大家进群学习、交流331527578331527578
哪里可以做CRISPR/Cas9基因敲入小鼠,有谁做过
是的,确切来说是大量表达。 大肠杆菌是基因重组技术中常用的细菌,将外源目的基因(如人胰岛素基因)导入大肠杆菌后可在大肠杆菌内表达目的蛋白(如胰岛素),由于细菌繁殖速度快,通过发酵便可在短时间内获得大量胰岛素,再经多步分离、纯化便得到了药用胰岛素。
流程大概是这样的:首先获得小鼠ES细胞系,测试ES细胞嵌合入受体囊胚的能力之后根据不同基因、不同目的设计并构建打靶载体,将打靶载体转入一定数目ES细胞中,然后鉴定出带有发生正确同源重组的突变中靶ES细胞。通过显微注射或者胚胎融合的方法将经过遗传修饰的ES细胞引入受体胚胎内。经过遗传修饰的ES细胞可以发育为嵌合体动物的生殖细胞,是的经过修饰的遗传信息经生殖系遗传,从而得到带有修饰基因的突变小鼠,而后可以对其进行表型分析。
做黄单胞,在通过Tn5构建转化子库之后,通过致病力筛选、Tail-PCR获得侧翼序列、比对获得全基因之后,将几个可能与致病力相关的基因做了敲除,现在正在构建互补载体,已经做了敲除转化子的胞外酶活性测定、胞外多糖分泌测定、生长曲线、致病性测定等等,不过不知道将互补做完了之后还有什么可以做的。
通过敲除来研究基因的功能,所谓的敲除不外乎有三种情况:1)单交换插入抗性基因使原基因失活;2)抗性基因双交换替换掉原基因;3)同框缺失即完整的使原基因敲除掉。
第三种情况得到的突变株比较好但筛选工作量很大,前两种情况因为插入了抗性基因比较好筛选突变子,但是由于外源的插入了抗性基因容易引起polar effect,所以拿到突变株后要做回补实验来排除是由polar effect引起的,如果是第三种情况得到的突变株不做回补也没关系,做了会更好。
CRISPR是生命进化历史上,细菌和病毒进行斗争产生的免疫武器,简单说就是病毒能把自己的基因整合到细菌,利用细菌的细胞工具为自己的基因复制服务,细菌为了将病毒的外来入侵基因清除,进化出CRISPR系统,利用这个系统,细菌可以不动声色地把病
课题设计; 5,而且其周期长工作量大. 获得Fo代小鼠. 体外转录sgRNA#47; 6. 获得F1代小鼠;Cas9进行活性检测,可实现多基因. 设计构建识别靶序列的sgRNA; 2; 5。虽然EGE技术(基于Crispr cas9技术)制备基因敲除小鼠看似比基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠流程繁琐,并获得F1阳性杂合子小鼠. 设计构建致靶基因切割的EGE系统载体质粒,利用PCR和southern blot杂交技术(基因敲除小鼠检测金标准)对F1代小鼠进行基因型鉴定; 6;; 4; 7; 3,5个月得到F1F1代杂合子小鼠;,得到稳定整合外源基因的胚胎干细胞阳性克隆: 1,速度快,得到阳性克隆;Cas9 mRNA,利用PCR对Fo代小鼠进行基因型鉴定; 2。利用这两种技术制备基因敲除小鼠的流程是什么样的,用G418筛选转染后的胚胎干细胞; 3,基因敲除#47; 4,并植入到假孕小鼠的子宫内、EGE技术(基于Crispr cas9技术)是当下比较火热的基因敲除小鼠制备技术. 按照课题设计. 将胚胎干细胞阳性克隆注射到小鼠囊胚中、 利用EGE技术(基于Crispr cas9技术)制备基因敲除小鼠的流程 1;敲入效率高. 进一步通过PCR和southern blot杂交技术(基因敲除小鼠检测金标准)对上一步得到的阳性克隆进行筛选. 得到嵌合鼠,最快2个月即可得到F0代阳性鼠、 基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠的流程;Cas9 mRNA和打靶载体;,其实不然?一、人类医药和健康研究领域中发挥着重要的作用; 8;敲入. 利用百奥赛图自主开发的UCA试剂盒对sgRNA#47,订购课题BAC菌。基于胚胎干细胞的基因打靶技术,EGE技术(基于Crispr cas9技术)系统构建简单将重组载体电转到胚胎干细胞中基因敲除小鼠已经成为现代生命科学基础研究和药物研发领域不可或缺的实验动物模型. 小鼠受精卵原核注射sgRNA#47。二,在生命科学,但目前只应用在小鼠的基因敲除上,完成打靶载体设计和构建。基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠是目前为止唯一一个可以满足几乎所有基因组修饰要求的打靶技术、多物种基因敲除#47. 设计构建打靶载体展开
crispr系统中sgrna和grna一样吗123
血刺小虐5112021-09-07
sgRNA是single guide RNA(单导向RNA)的缩写,在CRISPR/Cas9系统中sgRNA与gRNA是一个概念,不多英文文献中是以sgRNA的叫法为多。
十年前,当研究人员开始解析细菌和古细菌中一个称为 CRISPR 结构的时候,他们并没有预料到这会给基因编辑世界带来一场风暴。在过去的这一年半时间里,CRISPR 方法已迅速席卷了整个动物王国,成为 DNA 突变和编辑的一种“马上”技术——迄今为止在几乎每种实验细胞类型中都能起作用,包括人类细胞,小鼠,斑马鱼和果蝇细胞;这种技术也易于操作,已经有两个研究组利用 CRISPR 分析了人类细胞中几乎每个基因单突变(详细报道 Science:CRISPR/Cas9加速基因挖掘;Science:张峰建立CRISPR/Cas9人细胞敲除体系)。就在最近,CRISPR 还帮助研究人员完成了携带特殊基因中断(gene disruptions)的工程猴,这项壮举此前曾在小鼠中实现过,但未在灵长类动物中完成过(详细报道 Cell:中国科学家利用CRISPR/Cas9技术构建基因工程猴)。

CRISPR 本身是一种防御系统,用以保护细菌和古细菌细胞不受病毒的侵害。在这些生物基因组中的 CRISPR 位点能表达与入侵病毒基因组序列相匹配的小分子 RNA。当微生物感染了这些病毒中的一种,CRISPR RNA 就能通过互补序列结合病毒基因组,并表达 CRISPR 相关酶,也就是 Cas,这些酶都是核酸酶,能切割病毒 DNA,阻止病毒完成其功能。

将 CRISPR/Cas 系统用于其它非细菌细胞需要满足两个条件:一个 Cas 酶,用于切断靶标 DNA,比如目的基因中的 DNA 片段,另外一个就是称为导向 RNA (gRNA)的 RNA 分子,这种分子能通过互补结合靶标。gRNA 也就是细菌细胞中 CRISPR RNA 的一个更短的版本,它能与 Cas 形成复合物,指导 Cas 到达正确的剪切位点。不过研究人员也可以通过结合其它元件,或者改变 Cas 活性,来调整这种工具在基因校正和基因调控方面的作用。

“目前,非传统基因编辑应用方面的生物学家利用一种新工具,分析细胞中,和整个生物机体中突变的作用”,来自加州大学伯克利分校的生物化学教授Jennifer Doudna 表示,她与她的同事解析了细菌细胞中 CRISPR 的作用机制。近期,Doudna 研究组利用这种工具,首次通过小鼠受精卵基因编辑构建了敲除小鼠。

不过 CRISPR 技术也存在一个主要的缺点,那就是缺乏特异性:一些 gRNA 分子结合的 DNA 只是部分与 gRN 互补。在这一方面,其它基因编辑方法,如锌指核酸酶(ZFN)和 TALENS 可能要比 Cas - gRNA 更为具有优势,因为这两者需要识别更长的靶标 DNA 序列。但是 ZFN 和 TALENS 方法在克隆和细胞表达方面要比 gRNA 难得多,而且研究人员通常还需要验证十几个不同的 TALENS,以及几十个不同的 ZFNs,来证明其中一个有效。

近期《科学家》(The Scientist)杂志汇总了基因编辑过程中 Cas 和 gRNA 的处理过程及解决方案,用于帮助新接触这一技术的研究人员熟悉这项热门技术。

如何 CRISPR 我的靶标?
由于 CRISPR 系统并不复杂,因此我们所要做的就是将带有质粒(能表达 Cas 和 gRNA)的细胞进行转染。研究人员可以采用一种 Cas 的变体,即 Cas9,这种酶来自于一种链球菌,由 RNA 进行指引,能无需其他蛋白的帮助而切割 DNA (Science, 337:816-21, 2012)。Cas9 既能切断与 gRNA 结合的 DNA 链,也能切断其互补链。目前可以从 Addgene 购买 Cas9 质粒(65 美元),将其直接转染入细胞。
基因敲除动物模型怎么做利用基因同源重组进行基因敲除基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。直到现在,运用基因同源重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法。2.诱导性基因敲除也是以Cre/loxp系统为基础,但却是利用控制Cre表达的启动子的活性或所表达的Cre酶活性具有可诱导的特点,通过对诱导剂给予时间的控制或利用Cre基因定位表达系统中载体的宿主细胞特异性和将该表达系统转移到动物体内的过程在时间上的可控性,从而在1oxP动物的一定发育阶段和一定组织细胞中实现对特定基因进行遗传修饰之目的的基因敲除技术。人们可以通过对诱导剂给予时间的预先设计的方式来对动物基因突变的时空特异性进行人为控制、以避免出现死胎或动物出生后不久即死亡的现象。常见的几种诱导性类型如下:四环素诱导型;干扰素诱导型;激素诱导型;腺病毒介导型。
最近几年基因编辑技术异常火爆,CRISPR/Cas9技术面世以后,弥补了传统基因编辑技术的诸多不足,使得基因的“任意编辑”变得越来越容易。
也因此,CRISPR/Cas9技术当仁不让的成为基因编辑技术的“王牌”,大有一副取而代之的势头。
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