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Ancell/anti-TCR Cβ1/120 tests/101-060
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Ancell/anti-TCR Cβ1/120 tests/101-060
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Ancell
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101-060
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Human T cell receptor (TCR) is a T cell surface expressed heterodimer of alpha/beta or gamma/delta chains. TCR’s recognize antigen peptides bound to MHC molecules forming the basis of antigen specific response by T cells (3, 4).

Isotype: Murine IgG2a

Immunogen: Human HA1.7 TCR beta chain expressed on transgenic mouse cells

Specificity: Antibody JOVI-1 recognizes human C beta 1 TCR gene product and reacts with 50-75% of T cells in normal human blood (1). JOVI-1 does not bind to TCR C beta 2 (5).

Functional Application: Antibody JOVI-1 is mitogenic for T cells expressing TCR C beta 1.

References:

1. J.L. Viney, et al, (1992) Hybridoma 11: 701-713. PMID: 1284120

2. A. Weiss, (1993) Cell 73: 209-212.

3. M.M. Daris, (1995) Nature 375: 104.

4. S. Valitutti, et al, (1995) Nature 375: 148-151.

5. Paul M Maciocia, Martin A Pule, et al. (2017) Nature Medicine 23: 1416-1423.doi: 10.1038/nm.4444. Epub2017 Nov 13.PMID: 29131157

6. M Shi, P Horn, et al. (April 11, 2019) Clinical Cytometry https://doi.org/10.1002.cyto.b.21782

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2016-12-11
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同仁化学研究所向中国市场新推出HilyMax基因转染试剂,同仁化学研究所的新型阳离子脂质体基因转染试剂HIlyMax最近在实验方面有了新的进展,即H1299细胞的实验条件已经成熟。 查看更多>
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DNAFect是一种高效的阳离子脂质体转染试剂,适用于多种细胞的DNA转染。对于大多数细胞系包括原代细胞都有较高的转染效率,并且对细胞毒性极低。本转染试剂可应用于瞬时转染、稳定转染、共转染、进行高通量DNA转染,基因表达和基因功能研究。 查看更多>
WESTERN BLOT PROTOCOLIn a Western blot, proteins that are separated on polyacrylamide gels on the basis of size are transferred to a membrane for detection wit 查看更多>
基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到细胞内。目前,最常用的转染试剂是阳离子脂质体和阳离子聚合物,它们的特点和病毒类似,容易透过细胞膜。其中,阳离子脂质体在体外基因转染中有很高的效率,然而在体内,它迅速被血清清除,在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,这将导致高水平的毒性,因此,在很大程度上限制了其应用。由于阳离子脂质体的局限性,阳离子聚合物转染试剂日益受到重视。 本试剂采用专利配方的阳离子聚合物为主要成分,可以与DNA形成稳定的复合物,保护DNA免受核酸酶的降解,在增加核酸稳定性的同时, 查看更多>
Westernblot 实验步骤 1. 组织块称重 2. 利用液氮、研钵粉碎组织块 3. 加入RIPA缓冲液(每克组织3 ml RIPA),PMSF(每克组织30μl,10 mg/ml PMSF),利用Polytron进一步匀浆(15,000转/分*1分钟)维持4℃ 4. 加入PMSF(每克组织30μl,10 mg/ 查看更多>
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转染 123
selena21122021-08-03
最近要购买转染试剂,市场上现在转染试剂的品牌和名字可谓玲琅满目,不知道如何选择,最近有汉恒生物公司的销售向我推荐他们公司的Lipofiter转染试剂免费试用装,不知道有谁用过这个公司的转染试剂呢,效果怎么样?或者大家都是用过哪些转染试剂,觉得哪种比...

目前大多数的细胞转染实验会用到脂质体类的转染试剂,但是脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。而这些作用就是脂质体造成细胞毒性的根本原因。这会对相关研究数据产生严重的干扰,甚至影响研究的结论。

由于脂质类转染试剂对细胞的毒性是由其脂质特性决定的,目前众多的研究者和生物公司将新一代转染试剂的开发聚焦在非脂质体的聚合物上,并已有一些优秀的试剂产品上市,如Engreen公司的Entranster系列转染试剂,为纳米材料,细胞毒性低,转染效率高,已逐渐取代脂质体试剂,成为各大实验室的新宠。

我先开个头哈:

现今基因导入是生物技术实验的家常便饭,常用的方法无非是转染、病毒感染、电转这几种。

几乎所有做细胞转染的战友们都面临过这样的尴尬。

效率低,

效率低、

效率好低。(烦恼的事也要说三遍)

于是,我们就开始寻找各种各样的转染试剂,遂经蒸煮炸烤,百般试验,

运气好还能拣个宝,点儿背的那就一千个

为了广大细胞转染的战友,为了大家心中不再有那个“物种”,特开此贴,大家贡献一下资源、分享一下心得、或者吐槽一下心中的不忿,忘大家顶起,顶起,再顶起!!!


Signagen转染试剂(transfectionreagent)
—DNA转染试剂Polyjet-适用于普遍的哺乳动物细胞

LipoD293-适用于悬浮细胞的转染(包括昆虫细胞SF9)-对于普遍的哺乳动物细胞具有更优异的转染效率

—DNAandsiRNA转染试剂
Lipojet-适用于大多数哺乳动物细胞的转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/RNA共转染(co-transfection)-效果优于Lipofectamine2000
—siRNA转染试剂
GenMute-适用于大多数哺乳动物细胞转染-低毒性(无需换液)-用量少-DNA/siRNA共转染(co-transfection)PepMute-适用于普遍的哺乳动物细胞的转染

各位战友,我准备做MiRNA转染前列腺癌细胞,现在知道的转染试剂Lip2000,一种是英骏生物公司的,另外一种是赛默飞ThermoFisher),我不知道该选择哪一种转染效果好一点,有了解这方面的朋友请知道一下我,谢谢!

脂质体的转染毒性是最大的,很明显,那么多的细胞死亡是由于转染的细胞毒性导致的。对于这一点我有两个建议,一个是减少DNA的用量,我一般做转染,对于任何细胞,只要是12孔板,一般都是用1ugDNA,这个量绝对够了。,因为质粒转染进入细胞的本质,和病毒感染没区别,质粒的各种元件会从宿主细胞内抢夺细胞机器大量开始转录翻译你的目的蛋白,在这个过程中会产生大量的没有正确折叠蛋白,这些异常折叠蛋白进一步引起ER stress导致细胞凋亡。因此你用DNA太多,本身就有细胞毒性。另外就是脂质体本身的毒性。事实上,对于293系的细胞系,最好用的是PEI这种东西。毒性小,转染效率高,一般对293系列的细胞系可以轻易达到80%。polyscience有粉末买,买回来后直接在分子纯度的水里配置成1ug/uL的溶液,和你的质粒按照1ug DNA/6ug PEI对293进行转染。
而且直接使用自制的PEI非常便宜,在293上远比商品化的脂质体要好。

另外,如果你们实验室确实钱多,不怕花钱,建议你取用Promega的FugenHD,那个转染效率比脂质体更好,而且毒性小,至于价格。。。。。。。。。。。也更高。。。。。。。。。

另外,你说漂浮的细胞有表到GFP,那个不一定是真的GFP,很多时候
都可以,关键看你的实验操作摸索啦。
当然,如果考虑成本这块的话,义翘sinofection可以考虑哦~

有战友对比过罗氏X-tremeGENEDNATransfectionReagent和lipofectamine3000的优劣吗?求解答

近期,上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofecttransfectionreagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(Engreen)进行了一次RNA转染比较。比较情况如下:

实验方法

转染试剂:Turbofecttransfectionreagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(EngreenBiosystemCo,Ltd)

待处理细胞:humanCD8+T细胞

1.针对Turbofect转染的方法

每孔培养体积均为100μL,细胞数目在105左右。

取0.5μLagomir,加入9.5μL无血清RPMI1640,充分混匀;

取0.2μLTurbofecttransfectionreagent和agomir稀释液充分混合。

转染复合物制备完成;混匀后室温下孵育15-20分钟,直接取10μL加入已铺好细胞的孔中,继续培养24h收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

转染Mix的配制:100nMago/N.C.:(0.5μLagomir+0.2μLTurbofect+9.3μL无血清的RPMI1640)×2.5=1.25+0.5+23.25

2.EntransterTM-R4000转染

每孔培养体积均为100μL,细胞数目在105左右。

取0.5μLagomir,加入9.5μL无血清RPMI1640,充分混匀,制成10μLagomir稀释液;

取0.25μLEntransterTM-R4000,然后加入9.75μL无血清稀释液体,充分混匀,制成10μLEntransterTM-R4000稀释液;

将EntransterTM-R4000稀释液和agomir稀释液充分混合(可用振荡器或加样器吹吸10次以上),室温静置15分钟。

转染复合物制备完成;

将20μL转染复合物加入孔中的细胞悬液中,前后移动培养皿,混合均匀;

转染后6h观察细胞状态,并更换培养基,继续培养24h后收取细胞,用PBS洗涤3次以上,以备RNA抽提。

转染Mix的配制:100nMago/N.C.:(0.5μLagomir+9.5μL无血清的RPMI1640)×2.5=1.25+23.75;Etranster稀释液:(0.25μLEtranster+9.75μL无血清的RPMI1640)×5=1.25+48.75(室温静置5分钟),取20μL至ago和N.C.管中,室温静置15分钟。

实验结果

结论:从目的miRNA表达水平的检测结果来看,转染24h后,英格恩生物公司(EngreenBiosystem)的EntransterTM-R4000(ago/NC:422912倍)转染试剂的效果优于Turbofect转染试剂(ago/NC:285870倍)。

讨论:从实验结果来看,英格恩生物公司(EngreenBiosystem)的EntranstenTM-R4000(ago/NC:422912倍)转染试剂的效果优于Turbofect转染试剂(ago/NC:285870倍)。EntransterTM-R4000是英格恩生物(EngreenBiosystem)最新研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。EntransterTM-R4000不仅可以转染小RNA,而且针对mRNA等长链RNA优化。该试剂可将RNA导入多种细胞系,包括原代细胞和悬浮细胞。无论有无血清、抗生素存在均可获得很高的转染效率。


如题,PolyplusTransfection转染试剂在中国区的代理商有哪些?求推荐1-2个靠谱的,谢谢!

表面活性剂原理及应用 图文123
蚌硼遇淌╮2017-10-03
悬浮细胞NB4用哪种转染试剂比较好
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
786-o cell用什么转染试剂
内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁(cellwall)上的特有成分,主要是脂多糖中的类脂A,在细菌被裂解时被释放出来,由于其化学结构和特性,在质粒的纯化过程中很容易混入质粒DNA一同提取出来。内毒素的存在会严重的影响质粒转染细胞的效率,此外会激活造血细胞(如B细胞、巨噬细胞等)的非特异免疫反应,造成实验的假阳性,所以转染级质粒的提取纯化必须去除内毒素。
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