罗氏X-tremeGENE9和X-tremeGENEHP的转染试剂、
罗氏公司新推出了两款高性能的DNA转染试剂,为其细胞分析产品线再添新军。这两款名为X-tremeGENE9和X-tremeGENEHP的转染试剂沿用了X-tremeGENEsiRNA转染试剂的前缀,应该与大名鼎鼎的Fugene6不属于一类。据罗氏介绍,这两个产品是多组分的独特试剂,并非脂质体。它们能够提供高的转染效率、重复性和细胞存活率。
这两款新产品都融合了罗氏二十年在转染试剂上的经验。X-tremeGENE9试剂为多种常用的细胞系带来了高效的性能,而X-tremeGENEHP试剂则更适合于难转染的细胞,比如原代细胞、昆虫细胞。如果您正在用其他试剂转染,但效果不佳,那么不妨试试这个。
两种试剂盒都综合了低的细胞毒性和高的转染效率,让更多细胞存活,且带来生理上更相关的结果。而且,转染步骤也相当简单:只需用无血清培养基稀释转染试剂,与质粒共同孵育,然后逐滴加入细胞中。研究人员所需的优化极少,当然,在转染之前,你还是得优化转染试剂与DNA的比例。建议的比例是3:1,但对于特定研究,2:1至7:1的比例可能会提高转染效率。
此外,X-tremeGENEHP试剂还经过0.2μm孔径的膜过滤,无动物来源成分,在血清中也有活性。它与核酸形成复合物,促进高效的DNA转移,而带来的生理和形态学改变极少。它非常适合细胞分析和蛋白表达研究。
至于这两种试剂的选择,请看下表。如果转染HeLa、HEK-293等普通细胞系,这两个都能胜任。至于那些难搞定的细胞,则最好选择X-tremeGENEHP试剂。若说到试剂的温和性,恐怕X-tremeGENE9试剂要更胜一筹。
| X-tremeGENEHP 试剂 | X-tremeGENE9 试剂 |
DNA 的转染 | +++ | +++ |
标准细胞系的转染 | +++ | +++ |
难转染细胞系的转染 | +++ | + |
原代细胞的转染 | ++(+) | 不建议 |
试剂的温和性 | ++(+) | +++ |
使用简单 | ++ | +++ |
转染后的毒性 | 非常低 | 非常低到极低 |
至于细胞系特异的转染步骤,罗氏网站上也列出了一些,估计还会不断补充。目前X-tremeGENEHP有以下细胞的具体步骤:HighFive、Sf9、HT-1080、K-562、MEF、PC-12等等。X-tremeGENE9则有293、CHO、COS-7、Hela等等。
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