GenMute™体外siRNA转染试剂,您基因沉默的首选! 商家活动 资讯...
货号： SL100566 供应商： 上海经科化学科技有限公司 英文名： PepMute™siRNATransfectionReagent 保存条件： RT/见说明书 数量： 大量现货 CAS号： 无 规格： 1.0ml 美国Signagen转染试剂
货号SL100566
PepMute™体外siRNA转染试剂
产品简介：
PepMute™体外siRNA转染试剂，是模拟病毒细胞穿膜肽配制的一种全新siRNA载体工具。在各种哺乳细胞中，在浓度只有1nMsiRNA它却能提供超过95%以上的沉默效率。运用我们专有的肽模拟合成技术，数以百计的病毒细胞穿膜肽被模拟、合成、筛选出来，并作为基因载体用在各种哺乳动物的细胞系中（图1）。PepMute™试剂作为一种非常有效的载体经过鉴定和验证，它能聚集和转染短（小于100bp）、单链或双链核苷酸如siRNA，miRNA模拟物和单链DNA，且被广泛用于哺乳动物细胞系中。
Figure1.AcartoonshowingPepMute™siRNATransfectionReagentwasdevelopedbyPST
产品规格：
-PepMute™试剂，1.0ml，转染0.5~5pmolessiRNA或miRNA模拟物，能在24孔板中足够完成1333次反应。
-PepMute™转染缓冲液（5X)，与PepMute™试剂配合使用以获得转染效率最大化，8.0ml（5x)浓缩原液下能制成40ml的工作液。
应用：
-siRNA,miRNA模拟物或mRNA转染
-DNA/siRNA共转染
-单链DNA转染
储存条件：
40C储存。若储存合适，产品的稳定性能保持12个月以上。
特点：
-在最终浓度为1.0nMsiRNA也能保持非常出色的沉默效应。
-使用在各种各样的细胞系中，超过95%的有基因沉默效应。
-单管反应，简单、标准的操作程序。
-与血清和抗生素兼容。
-适用于高通量筛选。
-细胞毒性低。
-价格实惠，物美价廉。
SilencingEfficacyComparisonbetweenPepMute™siRNATransfectionReagentandLeadingProducts
Figure2.ExcellentsilencingofendogenouslyexpressedKIF11(alsoknownasEG5)inHEK293cellswith1.0µlofPepMute™reagentand0.5pmolEG5siRNAperwellof24-wellplate.KIF11(alsoknownasEG5)encodesamotorproteinthatbelongstothekinesin-likeproteinfamilyinvolvedinchromosomepositioningandbipolarspindleformationduringcellmitosis.AreductioninKIF11levelscausesmitoticarrest.PepMute™reagenteffectivelydeliversEG5siRNA(final1.0nM)toHEK293cells,leadingtomorethan80%of"round-up"phenotypeofHEK293cells48hposttransfectionovernegativecontrol(final1.0nMwithshamEG5siRNA)whileleadingsiRNAtransfectinreagents,Lipofectamine™RNAiMAX(RNAiMAX,1.0nMEG5siRNA)/INTERFERin(1.0nMEG5siRNA)/Dharmafect(10.0nMEG5siRNA)andjetPRIME(20nMEG5siRNA)giveaverage37%,23%,53%and48%ball-shapedphenotyperespectivelyonHEK293cells.Thephenotypeof"rounded-up"293cellswerevisualized(upperpanel)andquantified(lowerpanel)48hposttransfectionwithaNikonmicroscope.
Figure3.SilencingefficiencycomparisonofPepMute™TransfectionReagent(upperpanel)withDharmafect4(middlepanel)andLipofectamine™RNAiMAX(RNAiMAX,lowerpanel)siRNATransfectionReagentsonA549cells.siRNAtargetingrenillaluciferaseatdifferentfinalconcentrationsrangingfrom0.5to20nMwasco-transfectedwithrenillaluciferasegene(0.5µgofpRL-CMVDNAperwell)bytheabovethreetransfectionreagentspermanufacturers"protocolsintoA549cellsgrowingona24-wellplate.Renillaluciferaseactivitywasdetermined36hafterpostco-transfectionwithrenillaluciferasedeterminationsystem(Promega).Theluminescencewasmeasuredfrom5.0µloflysateduring10sintegrationwithaluminometer(BeckmanCoulterLD400).Luciferaseactivitywasexpressedaslightunitsintegratedover10s(RLU)andnormalizedpermgofcellproteinbyusingtheBCAassay.Theerrorsbarsrepresentstandarddeviationderivedfromtriplicateexperiments.Luciferase-silencingefficiencywascalculatedrelativetountreatedcells.WhilePepMute™andDharmafect™4reagentsdeliveredsignificantgenesilencingfrom1.0nMofrenillaluciferasesiRNA,Lipofectamine™RNAiMAXgavegoodknockdownonlyafter20nMwhileenhancedgeneexpressionatlowconcentrationofsiRNA(0.5and1.0nMrespectively)wasobserved.
Figure4.PepMute™TransfectionReagentknockeddownstableGFPexpressioninMCF7cell(upperpanel)andU2OScell(lowerpanel)byreverselytransfecting5.0and1.0nMGFPsiRNArespectively.Greenfluorescenceprotein(GFP)wasstablyexpressedinMCF7andU2OScells.siRNAtargetingGFPgene(rightpanel)andashamsiRNA(leftpanel)wereintroducedintoMCF7andU2OScellswithfinal5.0and1.0nMrespectivelybyreversetransfectionwithPepMute™TransfectionReagent.GFPgenesilencingwasmonitored48hposttransfectionbyaNikonfluorescencemicroscope.QuantitativeanalysisshowedthatGFPsiRNAat5.0and1.0nMdeliveredbyPepMute™siRNATransfectionReagentknockeddown90%and95%stablyexpressedGFPinMCF7andU2OScellsrespectively.
温馨提示：不可用于临床治疗。
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发布于 ： 2017-03-03
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