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LifeSensors/DU6302-25 µL (panel) Di-Ubiquitin K63-2/DU6302-20UL (panel) Di-Ubiquitin K63-2
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LifeSensors/DU6302-25 µL (panel) Di-Ubiquitin K63-2/DU6302-20UL (panel) Di-Ubiquitin K63-2
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IQFDiUbTechnology

LifeSensors’sdiubiquitinsubstratesrepresentanewclassofsubstratesforthecontinuousfluorescentmeasurementoftrueisopeptidaseactivity.TheC-terminusofwildtypeubiquitinisconjugatedviaanisopeptidebondtolysine48(K48)ofasecondubiquitinmoleculewiththeresultantdiubiquitinforminganinternallyquenchedfluorescentFRETpair(IQF).Eachubiquitinislabeledwithasinglemoleculeofeitherafluorescentreporter(i.e.TAMRA)orahighlyefficientquenchingdye.CleavageoftheIQFDiUbbydeubiquitylasesleadstoseparationofthefluorophorefromquencherandsubsequentincreaseinobservedfluorescence.

IQFDiUbVariants

ThereisaremarkabledifferencebetweenK48-andK63-linkedubiquitinmoleculesintheirthree-dimensionalstructure,whichaccountsfortheirindividualfunctions.Beyonddifferentiallinkages(e.g.K48,K63,K11),LifeSensorshascreatedsubpanelsofIQFdiubiquitinsubstrateswithineachlinkage. BecauseeachDUBislikelytorecognizeandcleavesubstrateswithuniquestericconsiderations,thesesubpanelsvaryinlocationofreporterfluorophoreandquencher. WerecommendthateachDUBbeempiricallyevaluatedagainstapanelofIQFDiUbsubstratestoselectthetheoptimalfluorophore/quencherpairing.

IQFDiUbsubstratepanels

InordertoefficientlydeterminetheoptimalsubstrateforanyDUB,orrapidlyassessapanelofvariousDUBs,LifeSensorsofferscomprehensivepanelsforeitherK48 (DiUb48panelcatno.DU0101) orK63linkeddiubiquitins  (DiUb63PanelDU0102).Eachpanel containallsixvariantsoftherespectivelinkagealongwithacontrolenzyme(USP2core).Inadditionthereisalsoafull(K48/K63) panel (DU0201) thatcontainsall12variants.

Needbulkquantities?Wewouldbehappytoworkoutacustompricethatfitsyourbudget.Pleaseemail info@lifesensors.com formoreinformation.

ThisproductiscoveredbyUSpatent#8,518,660Bypurchasingthisproduct,thepurchaseragreestocomplywiththetermsofour LimitedUseLabelLicense.



Info


Amount25µL
StateLiquid
Concentration20µM
Buffer50mMSodiumMES,pH6.0
Variant2
Linkage

K63

Molecularweight18,548.4+/-18Da
FluorescentreadoutTAMRA
StorageIQFDiUbsarestablefor4-6monthsat4ºC.Longterm(>6months)storageat-80ºCisrecommended.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.



Applications


  • Kineticcharacterizationofdeubiquitylases(DUBs)
  • DemonstrationofnovelDUBactivityand/orlinkagespecificity
  • MonitoringofheterologousDUBproduction/purification
  • Highthroughputscreening(HTS)forantagoNISTsoragonistsof deubiquitylaseactivity
  • Additionalmaterialsrequired(forfurtherdetails,pleaseseemanual): 
    • 384-(GreinerBioOne781209) or96-well(655076)blackplatesorequivalent
    • Fluorescentplatereader
    • FiltersormonochromatorsformonitoringfluorescenceofTAMRA(Ex540nm,Em580nm)
    • Dichroicmirrorwitha550-570nmcutoffisrecommendedforoptimalsignal-to-background

Benefits

  • MoreBIOLOGicallyrelevantsubstratecomparedtotrADItionalmono-ubiquitinderivatives.
  • FluorophoresareNOTattheN-orC-terminus,modificationsknowntoperturbubiquitinstructure.
  • AvarietyoflinkagesandfluorophorepositioningavailableforoptimalactivityofyourDUBofinterest.
  • Validatedinboth96-welland384-wellformat.


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Western Blot印迹常用的转移膜主要是硝酸纤维素膜(Nitrocellulose Blotting Membranes,NC)和PVDF膜,此外也有用尼龙膜、DEAE纤维素膜做蛋白印迹。选择的根据主要有:a. 膜与目的蛋白分子的结合能力(也就是单位面积的膜能结合蛋白的载量),以及膜的孔径(也就是拦截蛋白的大小);b. 不影响后续的显色检测(也就是适和用于所选的显色方法,信噪比好);c. 如果后继实验有其他要 查看更多>
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产品名称: 兔诱导型NO合酶 elisa 国内优质ELISA厂家 产品简介: 兔诱导型NO合酶 elisa 国内优质ELISA厂家 ELISA试剂盒 国产现货 SIXIN生产的优质ELISA试剂盒直供全国。http://www.aatbio.com.cn/elisa/ 兔诱导型NO合酶 elisa 国内优质ELISA厂家 进口试剂采购网,上海通善生物科技有限公司(BioLeaf)旗下生命科学研究B2C一站式采购平台。 进口试剂采购网兔诱 查看更多>
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酶在生活中的应用123
mengting100102018-03-29
用得最频繁的估计应该是以下几种:
1、洗碗用的洗洁精,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
2、洗头用的洗发水,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
3、洗澡用的沐浴露,含脂肪酶,能快速水解油脂,还可能含其他酶成分
4、洗衣用的洗衣粉或洗衣液,含有多种酶,比如脂肪酶、蛋白酶等

除了以上用的频繁外,还有一些可能用到的,
比如某些促进消化的药片,含有脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶等
厨房用的嫩肉粉,含有蛋白酶等
异柠檬酸酶辅酶分NAD和NADP并且“依赖NAD作为辅酶的异柠檬酸酶”只存在于线粒体内

那糖酵解中依赖NAD的酶不是要在线粒体内反应?
溶蛋白酶是由(蛋白酶)溶解。
因为溶蛋白酶是蛋白质本质的酶
可以的。
食物酶:
天然存在於所有的生食物中。他们是消化酶的外部来源。食物酶在烹饪和处理过程中很容易被破坏。
一些富含酶的食物:
青木瓜内含丰富的木瓜酵素、木瓜蛋白酶、凝乳蛋白酶、胡萝卜素。
绿豆富含维生素B族、葡萄糖、蛋白质、淀粉酶、氧化酶。
生的蔬菜水果坚果种子富含各种酶,如菠菜、海藻等。
胡萝卜富含维生素C分解酶,萝卜、香瓜、菜花富含过氧化物酶,南瓜含维生素C分解酶,蕨菜含有维生素B1分解酶,菠萝和猕猴桃富含蛋白酶,无花果富含淀粉酶和蛋白酶,纳豆菌中富含淀粉酶、纤维酶。

人体内存在大量酶,结构复杂,种类繁多,到目前为止,已发现3000种以上(即多样性).如米饭在口腔内咀嚼时,咀嚼时间越长,甜味越明显,是由于米饭中的淀粉在口腔分泌出的唾液淀粉酶的作用下,水解成麦芽糖的缘故.因此,吃饭时多咀嚼可以让食物与唾液充分混合,有利于消化.此外人体内还有胃蛋白酶,胰蛋白酶等多种水解酶.人体从食物中摄取的蛋白质,必须在胃蛋白酶等作用下,水解成氨基酸,然后再在其它酶的作用下,选择人体所需的20多种氨基酸,按照一定的顺序重新结合成人体所需的各种蛋白质,这其中发生了许多复杂的化学反应.可以这样说,没有酶就没有生物的新陈代谢,也就没有自然界中形形色色、丰富多彩的生物界.
酶促反应动力学123
蒲公英的雨2021-07-30
大神求教,酶促反应动力学与双相动力学的区别?如何准确求出相应动力学的km值,S型动力学与双相动力学一般都有会有两个km,如何选用km进行后期研究?谢谢
具体情况具体分析,先要看这些酶之间是否有相互作用,比如蛋白酶可以降解其他酶。还要看是否反应条件被改变,比如一种酶催化后产生的反应改变体系的ph,温度什么的,影响其他的催化效率
相关疾病:肺癌Wednesday,June07,2017A58-y-oldwomanpresentstotheemergency......
铼_123
yxh58282512018-03-30
在酶的概念中,强调了酶是生物体活细胞产生的,但在许多情况下,细胞内生成的酶,可以分泌到细胞外或转移到其它组织器官中发挥作用。通常把由细胞内产生并在细胞内部起作用的酶称为胞内酶(endoenzyme),而把由细胞内产生后分泌到细胞外面起作用的酶称为胞外酶(extroenzyme)。一般主要是水解酶类,如淀粉酶、脂肪酶(lipase)、人体消化道中的各种蛋白酶(proteinase)都属胞外酶。而水解酶类以外的其它酶类都属胞内酶。
蛋白酶分布在外(界)环境中,不分布在内环境。
蛋白酶分布广泛,主要存在于人和动物消化道中,而消化道通过口与肛门与外界相通,属于外环境或外界环境
(溶菌酶、凝血酶原等)分布在内环境
(消化)酶分布在消化道
生物:淋巴细胞存在于组织液中吗?
胞内酶只存在于细胞内吗,有哪些?
除胞内酶与消化酶,其它酶都属于内环境的成分吗?
酶可以分解有蛋白酶分解其它酶,酶主要是分解有机物质,对于无机物大多数不能