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I2PP2A/SET-GST

I2PP2A/SET-GST Source: Recombinant human kidney produced in E. coli

Purity: > 90% by SDS-PAGE, apparent Mr ~ 67-kDa

Supplied: In 50 μl 50 mM Tris-HCl pH 7.0 buffer containing 14 mM β-mercaptoethanol, 1 mM benzamidine, 0.1 mM phenylmethanesulfonyl fluoride, 1 mM EDTA, 0.1% Brij-35 and 10% glycerol. Maintain preparations in aliquots at -70° C. Avoid repeated thawing.

Synonyms: I2PP2A-GST; Protein Phosphatase 2A Inhibitor Protein 2; SET; PHAP-II; Taf-1β

GloboZymes I2PP2A/SET GST-tagged preparations maintain all known activities of the native I2PP2A/SET protein tested to date. The GST-tagged preparations can also be used for binding and pull-down studies.

Background: I2PP2A/SET is  a potent inhibitor of Protein Phosphatase 2A (PP2A), a major mammalian protein serine/threonine phosphatase that regulates diverse cellular processes. Purified preparations of I2PP2A/SET inhibit all forms of the phosphatase tested to date in a substrate-selective manner. For example, the preparations inhibit PP2A potently (ki ~ 0.1 – 0.5 nM) with Myelin Basic Protein (MBP) and Histone H1 but not with casein as substrate.  I2PP2A/SET was originally found to occur as a fusion protein with the nucleoporin CAN (NUP214) in a patient with acute undifferentiated leukemia. Elevated expression of I2PP2A/SET has since been shown to occur in numerous cancers.  Transient expression of I2PP2A/SET in HEK-293 cells increases the DNA binding and AP1 activities of the proto-oncogene c-Jun. The sphingolipid second messenger cermaide binds to I2PP2A/SET and prevents it from inhibiting PP2A. This contributes, at least in part, to the mechanism by which Ceramide promotes apoptosis. I2PP2A/SET is multifunctional. It also prevents inhibition of E-CDK-2 by p21Cip1 and associates with B cyclin. It regulates histone binding to DNA, transcriptional activity and chromatin condensation. I2PP2A/SET undergoes phosphorylation at Ser9 and Ser24 in intact cells. The functional significance of these phosphorylations is uncertain. Some studies indicate that Ser9 phosphorylation may causes cytoplasmic detention of I2PP2A in Alzheimer disease.

References: Li M, Makkinje A, Damuni Z.  (1996)  J Biol Chem 271, 11059-11062; von Lindern, M. et al (1992)  Mol Cell Biol 12, 3346-3355; Al-Murrani, S. W., Woodgett, J. R., and Damuni, Z. (1999) Biochem J. 341, 293–298; Li, M., Damuni, Z. (1998) Proteins” Methods Mol Biol  93, 59-66; Katayose, Y. et al (2000)  J Biol Chem 275, 9209-9214

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2021-07-31
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与基于细胞的蛋白表达系统相比较,无细胞蛋白表达系统具有独特的优势,包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的总体产量。此外,无细胞蛋白表达系统更适用于激酶等毒性蛋白的表达、也可使用经过修饰的tRNA来进行标记,在某特定位点掺入非天然的氨基酸。同时,这些系统还可以用于高通量实验(1)。我们提供完备的无细胞蛋白表达系统,为研究者提供了多种 查看更多>
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记得08年左右的时候,正是辅酶Q10大行其道之时。各大品牌都在广告里力推含辅酶Q10的护肤品,说得很神奇,抗皱紧肤什么的。近几年发现很少有护肤品含有辅酶Q10了,广告也没有再提过Q10的事?请问是不是这东西没用,或是有副作用?为什么大牌护肤品都放弃Q10了...

在网上找此类标记资料,没怎么找到,是不是葡萄糖氧化酶不适合标记啊

原题
Identificationofmembranetype-1matrixmetalloproteinaseasatargetofhypoxia-inducIBLefactor-2[alpha]invonHippel-Lindaurenalcellcarcinoma.[Article]
来源
Oncogene.24(6):1043-1052,February3,2005.
AccessionNumber
00006374-200524060-00010.
Author
Petrella,BrendaL1;Lohi,Jouko3;Brinckerhoff,ConstanceE*,1,2
Institution
(1)DepartmentofBiochemistry,NorrisCottonCancerCenter,DartmouthMedicalSchool,Lebanon,NH03756,USA;(2)DepartmentofMedicine,NorrisCottonCancerCenter,DartmouthMedicalSchool,Lebanon,NH03756,USA;(3)DepartmentofPathology,HaartmanInstitute,UniversityofHelsinkiandHelsinkiUniversityCentralHospital,Helsinki,FIN-00014,Finland
摘要原文
Metastaticrenalcellcarcinoma(RCC)resultingfromthehereditarylossofthevonHippel-Lindau(VHL)tumorsuppressorgeneistheleADIngcauseofdeathinVHLpatientsduetothedeleteriouseffectsofthemetastatictumor(s).VHLfunctionsinthedestructionofthealphasubunitsoftheheterodimerictranscriptionfactor,hypoxia-induciblefactor(HIF-1[alpha]andHIF-2[alpha]),innormoxicconditions.WhenVHLfunctionislost,HIF-[alpha]proteinisstABIlized,andtargethypoxia-induciblegenesaretranscribed.Theprocessoftumorinvasionandmetastasisinvolvesthedestructionoftheextracellularmatrix,whichisaccomplishedprimarilybythematrixmetalloproteinase(MMP)familyofenzymes.Here,wedescribeaconnectionbetweenthelossofVHLtumorsuppressorfunctionandtheupregulationofmembranetype-1MMP(MT1-MMP)geneexpressionandprotein.Specifically,MT1-MMPisupregulatedinVHL-/-RCCcellsthroughanincreaseingenetranscription,whichismediatedbythecooperativeeffectsofthetranscriptionfactors,HIF-2andSp1.Further,weidentifyafunctionalHIF-bindingsiteintheproximalpromoterofMT1-MMP.Toourknowledge,thisisthefirstreporttoshowdirectregulationofMT1-MMPbyHIF-2andtoprovideadirectlinkbetweenthelossofVHLtumorsuppressorfunctionandanincreaseinMMPgeneandproteinexpression.
编译
vonHippel-Lindau(VHL)肿瘤抑制基因遗传性丢失引起的转移性肾细胞癌(RCC)在VHL病人中导致死亡的原因是转移性瘤的有害作用。在含氧正常情况下,VHL作用是破坏异二聚转录因子和缺氧诱导因子(HIF-1[a]和HIF-2[a])的a亚基。当VHL作用丧失后,HIF[a]蛋白变的稳定,并且靶缺氧诱导基因被转录。肿瘤侵入和转移的过程包括细胞外基质的破坏—主要通过基质金属蛋白酶(MMP)家族的酶完成。研究者阐明了VHL肿瘤抑制功能的丧失与I型膜基质金属蛋白酶(MT1—MMP)基因表达和蛋白质之间的联系。基因转录的增加使VHL-/-RCC细胞中MT1—MMP发生向上调节,这一作用是转录因子HIF-2[a]及sp1共同作用的结果。据称,这份论文首次报道HIF-2调节了MT1-MMP,并且提出VHL肿瘤抑制功能与MMP基因表达和蛋白质表达之间具有直接的联系。
我最近用重组表达的方式获得了一个蛋白酶,经过实验发现活性不好,所以希望能够先用生物信息学的方式对酶的部分核酸或者氨基酸进行修饰以增强其活性,不知道有没有老师做过或者知道怎么做,非常感谢,急求!!!
Q10是内源性的物质,基本不会有什么副作用。但是根据生产工艺的不同,可能会有个体差别,表现为起红疹。
希尔(Hill)反应将谷胱甘肽还原酶GS-SG、NADP和叶绿体混合一起用光照射,就会放氧详细请在 百度百科 搜索 希尔反应
ALT谷丙转氨酶,AST谷草转氨酶
辅酶a的作用与功效 123
小昱昱2017-01-13
各位大神大家好,本人菜鸟,目前正在复习生物化学准备考试。我想问下辅酶A在物质代谢中是不是可以作为一个整体来理解?书中都是直接写为COA没写出分子式,是不是在反应中它本身的分子结构没有发生变化?非常感谢!
门诊经常遇到这样的情况:一个年轻患者单纯腰椎间盘突出,无腰椎退变、不稳等,正规保守治疗无效后,面临多...
病情分析:你好,在化验肝功能时,转氨酶高提示肝细胞有损伤的情况的,不过如果只是稍微高一点,这个到不要紧的意见建议:有时在化验前休息不好,睡眠不足,饮食不节,过度饮酒或劳累,精神压力大,都有可能引起转肝功能轻度异常的,如果你没有不适的症状,可以先观察一段时间,在这个期间有一个合理的生活和饮食习惯,保持心情舒畅,避免过度劳累,这样会很好的。
可以。
  脂肪氧化酶可催化氧分子对面粉中的具有戊二烯1.4双键的油脂发生氧化,形成氢过氧化物,并氧化蛋白质分子中硫基(-SH)形成二硫键(-S-S-),诱导蛋白质分子聚合,从而起到增强面筋的作用,防止面筋蛋白水解,破坏胡萝卜素的双键。可见,脂肪氧化酶具有强筋和漂白双重功效,可以替代漂白剂过氧化苯甲酰。
  常见面粉添加剂:
  1、增筋类面粉添加剂,俗称面粉增筋剂,主要成分是VC等,提高面粉的筋度,使面粉可以满足生产拉面、水饺等高档面条的需要;
  2、面粉品质改良剂,可以全面的提高面粉的品质,使面粉从筋度、延伸性、稳定性等指标都可以满足高档面制品生产的需要;
  3、面粉增白剂,也就是稀释过氧化苯甲酰,其主要化学物质是过氧化苯甲酰,也就是俗称的“面粉增白剂”。该种物质具有强氧化作用,加快面粉的后熟,使面粉常温下需要半个月的后熟时间缩短为3-5天,它可以缓慢地氧化面粉中的叶黄素、胡萝卜素,使其由略带黄色变为白色。这就是为什么叫面粉增白剂的原因。
  4、面粉减筋剂,可以破坏面粉的筋度,使面粉可以用来生产饼干、桃酥等不需要筋度的食品。
  5、面包改良剂,添加到面粉中,使面包的内部组织结构细腻,气泡均匀,从而加工出来品相很好的面包。面包改良剂在西方国家被广泛的应用,我们国家的面粉品质本身不能满足加工面包的需要,必须添加面包改良剂才可以生产出合格生产面包。
转氨酶与肝功能

大多数肝病患者都把转氨酶和肝功能相提并论,提起肝功能,马上就想到转氨酶的高低。其实这种想法是有一定错误的,转氨酶只不过是临床上常用的检查肝脏功能的一项指标,转氨酶的正常与否,并不能代表肝功能的好坏,转氨酶的高低也不是与肝脏功能状态呈比例的。

一、肝脏有哪些功能

人体的肝脏一般在1250克左右,是一个重要的器官,人不能离开肝脏而存活。有人称肝脏为人体的“加工厂”,这不仅不过分,而且也只表达了肝脏的一部分功能而已。肝脏的功能包括:第一,代谢功能。其中包括了合成代谢、分解代谢和能量代谢。人每天摄入的食物中含有蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质等各种营养物质,这些物质在胃肠内初步消化吸收后被送到肝脏,在肝脏里被分解,“由大变小”,蛋白质变(分解)为氨基酸、脂肪分解为脂肪酸、淀粉分解为葡萄糖,等等,分解后的“小物质”又会根据身体需要再在肝脏内被合成为蛋白质、脂肪和一些特殊的碳水化合物或能量物质等,这是一个“由小变大”的过程。经过这个过程之后,摄入的营养物质就变成了人体的一部分,也就不会“吃猪肉长猪肉了”。在此顺便纠正一下人们普遍存在的某些错误的诸如吃肺补肺,吃肝补肝,吃脑补脑,甚至吃雄性动物的生殖器能够“壮阳”等荒谬的所谓“理论”。可想而知,如果肝脏“罢工”,人体的营养来源就会中断,生命也就危险了。第二,解毒功能。人体代谢过程中所产生的一些有害废物及外来的毒物、毒素、药物的代谢和分解产物,均在肝脏解毒。第三,胆汁生成和排泄:胆红素的摄取、结合和排泄,胆汁酸的生成和排泄都由肝脏承担。肝细胞制造、分泌的胆汁,经胆管输送到胆囊,胆囊浓缩后排放入小肠,帮助脂肪的消化和吸收。第四,造血、储血和调节循环血量的功能。新生儿的肝脏有造血功能,长大后不再造血,但由于血液通过两根血管(门静脉和肝动脉)流入肝脏,同时经过另一根血管(肝静脉)流出肝脏,因此肝脏的血流量很大,肝脏的血容量相应地也很大。如此说来肝脏就象一个仓库,在需要时可以供出一部分血液来,为其他器官所用,比如一个人发生了消化道大出血,血液容量急剧下降,心、脑、肾经受不住缺血,肝脏就可以帮一些忙了。第五,免疫防御功能。肝脏是最大的网状内皮细胞吞噬系统,它能通过吞噬、隔离和消除入侵和内生的各种抗原。另外,肝脏里的淋巴细胞也有很高含量,尤其是在有炎症反应时,血液或其他淋巴组织里的淋巴细胞很快“赶”到肝脏,解决炎症的问题。

二、如何正确认识“转氨酶”

通过以上所述大家对于功能已有基本的发解。是以,“转氨酶”水平的高低几乎不能反应肝脏的功能,转氨酶不过是肝细胞里面的一种成分而已,相比较而言这种成分在肝细胞中的含量比较高,肝细胞一旦遭到打击和破坏,转氨酶就被释放到了血液。而在这个时候,如果损害的肝脏细胞不多,肝脏完全能够正常工作。我们又可以再次用“加工厂”来说明这个问题,要维持正常人的生存,或正常的生命活动,大约只要有1/3的肝脏“开工”即可,就象有些工厂,生产能力大于市场需求,部分工人或部分机器停工不会影响生产线的正常运转。

但是,如何正确认识转氨酶的确是有点学问的。我们说转氨酶水平的高低不能完全代表肝功能的好坏,更确切地说转氨酶水平与肝功能状态不成平行关系。概要地有这么几种情况:①转氨酶水平正常,肝脏损害持续存在。见于某些肝炎病人,比如所谓慢性乙型肝炎病毒携带者,这些人乙型肝炎病毒指标一直阳性,但转氨酶从来没有升高过,可是如果对这样的病人做肝脏活组织检查却能发现肝脏的炎症反应很严重,有的已经发生了纤维化,甚至肝硬化和肝癌;还有不少急性和慢性丙型肝炎病人也有类似情况。②转氨酶水平很高,但不过是一时性的肝损害,不会给肝功能造成很大影响,后果也不很严重,比如服用某种对肝脏毒性较强的药物。我们医院就曾经有位老教授,生病住院期间,就因为吃了一粒药物,转氨酶升高到2 000多单位,停药后两天就恢复到正常;另外,大多数急性甲型肝炎病人在发病期转氨酶水平很高,经过短期休息和治疗后很快恢复正常;一次性大量喝酒也会有类似现象。③黄疸很深,转氨酶不高,甚至正常。有三种情况:一是胆道阻塞,胆汁排泄不畅,做肝功能试验检查时发现血液胆红素很高,而转氨酶不高或轻度升高,可见于胆管结石、胆道和胰头周围的肿瘤患者;二是重型肝炎。这是一种很严重的肝病,病死率很高。患病的早期,转氨酶有不同程度的升高,胆红素在较高的水平上,但随着病情的进展,胆红素越来越高,转氨酶反而下降,及至正常,医学上称之为“胆酶分离”,这是病情严重的信号,靠药物治疗恐已无济于事,条件允许时最好及时做肝移植手术。我们医院在这两年里就处理过十几例这样的病人,其中有一家三兄弟均为严重肝病,经过肝移植后恢复得很好。三是淤胆型肝炎。可由多种原因引起,以肝内小胆管损害为主,导致胆汁分泌异常,比如各种少数急性黄疸型肝
炎、药物性肝炎、妊娠等。④某些肝硬化和肝癌病人,尽管得了晚期肝病,肝功能很糟糕,但转氨酶却是正常的。不少人因为有了大量腹水、消化道出血,或者体检时发现其他异常才得知原发疾病。需要提醒的是,这些所谓“少数”病人在我们医生的病例记载里却不算少,在人们的生活水平普遍提高的今天,每年1~2次健康体检是不可缺少的,能发现不少发病很隐匿、进展很缓慢的疾病,隐源性肝硬化是其中一种。⑤转氨酶长期异常,但水平不高。这多见于慢性肝炎病人,包括慢性乙型和丙型肝炎、自身免疫性肝炎、长期大量饮酒后的酒精性肝炎等。像这种转氨酶水平不是很高,大多在100~200单位之间,或者小于100单位的慢性肝炎病人最需要重视,因为这类病人的人数最众,病情持续发展,预后也最差,最终要发展为肝硬化或肝癌。宜及早采取恰当的治疗,尤其是病毒性肝炎病人的抗病毒治疗。⑥最后还有一类现代文明病,即脂肪肝,表现为转氨酶轻度升高,一般不超过100单位,这种人一般体重超标,或严重超标。近几年来在我们国家“脂肪肝”的发病率逐年上升,这与饮食结构不当、饮食过量、嗜酒无度、缺乏运动等有关,是典型的“富贵病”。过去人们称结核病为“富贵病”,意思是说只有富贵人才生得起的病,实在是一种讽刺。现代人中发病率不断攀升的脂肪肝、高血压、糖尿病、冠心病、胆石症才是真正的富贵病,该引起我们警惕了!

关于“转氨酶”还有一个称谓的问题值得一提。在大众口头上,“转氨酶、GPT、PT、大PT、小PT”用得比较混乱。医学上被简称为转氨酶的有两种,分别是“丙氨酰氨基转移酶”和“门冬氨酸氨基转移酶”。过去分别用英文字母GPT、GOT来简称,现在称ALT和 AST,各家医院的肝功能化验单上都注明了这两种转氨酶,他们都是肝细胞内的酶,如果两种都比较高,而且AST水平超过ALT,一般说明肝细胞损害比较严重,而且特别多见于酒精性肝炎。
参考资料:http://www.labmed.cn/jiaoxue/hychsh/200507/839.html展开